ਮੇਰੇ ਦਿਮਾਗ ਵਿੱਚ ਖੋਜ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੇ ਇਤਿਹਾਸ ਵਿੱਚ ਕਈ ਕ੍ਰਾਂਤੀਕਾਰੀ ਕਾਢਾਂ ਐਂਟੀਜੇਨ-ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਬਾਈਡਿੰਗ, ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਅਤੇ ਸੀਕਵੈਂਸਿੰਗ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਇਮਯੂਨੋਲੇਬਲਿੰਗ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਹਨ।ਅੱਜ ਅਸੀਂ PCR ਤਕਨੀਕ ਬਾਰੇ ਗੱਲ ਕਰਾਂਗੇ।ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਲੋਕ ਆਦਤਨ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਨੂੰ ਤਿੰਨ ਪੀੜ੍ਹੀਆਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਦੇ ਹਨ: ਆਮ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ, ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਅਤੇ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ।
Cਓਮਨ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨੀਕ
ਕੈਰੀ ਮੁਲਿਸ (1944.12.28-2019.8.7)
ਕੈਰੀ ਮੁਲਿਸ ਨੇ 1983 ਵਿੱਚ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਰੀਐਕਸ਼ਨ (ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਰੀਐਕਸ਼ਨ, ਪੀਸੀਆਰ) ਦੀ ਕਾਢ ਕੱਢੀ। ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਜਦੋਂ ਉਹ ਆਪਣੀ ਪ੍ਰੇਮਿਕਾ ਨੂੰ ਚਲਾ ਰਿਹਾ ਸੀ, ਤਾਂ ਉਸ ਨੂੰ ਅਚਾਨਕ ਪ੍ਰੇਰਨਾ ਦੀ ਝਲਕ ਆਈ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ (ਡਰਾਈਵਿੰਗ ਦੇ ਲਾਭਾਂ ਬਾਰੇ) ਬਾਰੇ ਸੋਚਿਆ।ਕੈਰੀ ਮੁਲਿਸ ਨੂੰ 1993 ਵਿੱਚ ਕੈਮਿਸਟਰੀ ਵਿੱਚ ਨੋਬਲ ਪੁਰਸਕਾਰ ਨਾਲ ਸਨਮਾਨਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਨਿਊਯਾਰਕ ਟਾਈਮਜ਼ ਨੇ ਟਿੱਪਣੀ ਕੀਤੀ: "ਬਹੁਤ ਹੀ ਅਸਲੀ ਅਤੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ, ਲਗਭਗ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰੀ-ਪੀਸੀਆਰ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦੇ ਯੁੱਗਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਦਾ ਹੈ।
ਪੀਸੀਆਰ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ: ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੇ ਉਤਪ੍ਰੇਰਕ ਦੇ ਤਹਿਤ, ਮਦਰ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਨੂੰ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ ਦੇ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਬਿੰਦੂ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਮਦਰ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੇ ਪੂਰਕ ਧੀ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਡੀਐਨਏ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਡੈਨੇਚਰੇਸ਼ਨ, ਐਨੀਲਿੰਗ, ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ ਅਤੇ ਹੋਰ ਸਟੈਪਾਂ ਰਾਹੀਂ ਵਿਟਰੋ ਵਿੱਚ ਕਾਪੀ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਵਿਟਰੋ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਡੀਐਨਏ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਹੈ, ਜੋ ਵਿਟਰੋ ਵਿੱਚ ਕਿਸੇ ਵੀ ਟੀਚੇ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਧਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਆਮ ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਫਾਇਦੇ
1.ਕਲਾਸਿਕ ਵਿਧੀ, ਅੰਤਰਰਾਸ਼ਟਰੀ ਅਤੇ ਘਰੇਲੂ ਮਿਆਰਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰੋ
2.ਸਾਧਨ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦੀ ਘੱਟ ਕੀਮਤ
3.ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ ਹੋਰ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਲਈ ਮੁੜ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ
ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕੀਤੀ ਫੋਰਜੀਨ ਪੀਸੀਆਰ ਮਸ਼ੀਨ: https://www.foreivd.com/foreamp-sn-695-series-thermal-cycler-96-wells-pcr-machine-product/
ਸੰਬੰਧਿਤ ਉਤਪਾਦ: https://www.foreivd.com/pcr-herotm-with-dye-product/
ਆਮ ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਨੁਕਸਾਨ
1.ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਆਸਾਨ
2.ਮੁਸ਼ਕਲ ਕਾਰਵਾਈ
3.ਸਿਰਫ ਗੁਣਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ
4.ਮੱਧਮ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ
5.ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਜਦੋਂ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਬੈਂਡ ਦਾ ਆਕਾਰ ਟੀਚਾ ਬੈਂਡ ਦੇ ਬਰਾਬਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਸ ਨੂੰ ਵੱਖਰਾ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ।
Cਐਪੀਲਰੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ-ਅਧਾਰਤ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ
ਸਧਾਰਣ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀਆਂ ਕਮੀਆਂ ਦੇ ਜਵਾਬ ਵਿੱਚ, ਕੁਝ ਨਿਰਮਾਤਾਵਾਂ ਨੇ ਕੇਸ਼ਿਕਾ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਯੰਤਰ ਪੇਸ਼ ਕੀਤੇ ਹਨ.ਕੇਸ਼ਿਕਾ ਵਿੱਚ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਪੜਾਅ ਪੂਰਾ ਹੋ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਵੱਧ ਹੈ, ਅਤੇ ਕਈ ਬੇਸਾਂ ਦੇ ਅੰਤਰ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਐਮਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ MAERKER ਦੁਆਰਾ ਗਿਣਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਉਤਪਾਦ ਸਮੱਗਰੀ.ਨੁਕਸਾਨ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਅਜੇ ਵੀ ਖੋਲ੍ਹਣ ਅਤੇ ਯੰਤਰ ਵਿੱਚ ਪਾਉਣ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ, ਅਤੇ ਅਜੇ ਵੀ ਗੰਦਗੀ ਦਾ ਇੱਕ ਵੱਡਾ ਖਤਰਾ ਹੈ।
CਐਪੀਲਰੀElectrophoresis
2. ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਕੁਆਂਟੀਟੇਟਿਵ ਪੀਸੀਆਰ (ਕੁਆਂਟੀਟੇਟਿਵ ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ, qPCR) ਤਕਨਾਲੋਜੀਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਵੀ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, 1995 ਵਿੱਚ ਪੀਈ (ਪਰਕਿਨ ਐਲਮਰ) ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਹੈ। ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਦਾ ਵਿਕਾਸ ਇਤਿਹਾਸ ਏਬੀਆਈ, ਰੋਚੇ, ਅਤੇ ਬਾਇਓ-ਆਰ ਵਰਗੀਆਂ ਦਿੱਗਜਾਂ ਦੇ ਆਤਮਾ-ਪ੍ਰੇਰਕ ਸੰਘਰਸ਼ਾਂ ਦਾ ਇਤਿਹਾਸ ਹੈ।ਜੇ ਤੁਸੀਂ ਦਿਲਚਸਪੀ ਰੱਖਦੇ ਹੋ, ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ ਇਸਨੂੰ ਦੇਖ ਸਕਦੇ ਹੋ.ਇਹ ਤਕਨੀਕ ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਪਰਿਪੱਕ ਅਤੇ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਅਰਧ-ਗੁਣਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨੀਕ ਹੈ।
ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕੀਤੀ qPCR ਮਸ਼ੀਨ:https://www.foreivd.com/mini-real-time-pcr-system-forequant-sf2sf4-product/
ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਡਾਈ ਵਿਧੀ (SYBR ਗ੍ਰੀਨ I):SYBR ਗ੍ਰੀਨ I ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਲਈ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਡੀਐਨਏ-ਬਾਈਡਿੰਗ ਡਾਈ ਹੈ, ਜੋ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹਦਾ ਹੈ।ਮੁਕਤ ਅਵਸਥਾ ਵਿੱਚ, SYBR ਗ੍ਰੀਨ ਕਮਜ਼ੋਰ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਛੱਡਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਇੱਕ ਵਾਰ ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹਿਆ ਹੋਇਆ, ਇਸਦਾ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ 1000 ਗੁਣਾ ਵੱਧ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਸਲਈ, ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੁਆਰਾ ਨਿਕਲਣ ਵਾਲਾ ਕੁੱਲ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਮੌਜੂਦ ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਦੇ ਅਨੁਪਾਤੀ ਹੈ ਅਤੇ ਐਂਪਲੀਫਾਈਡ ਉਤਪਾਦ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨਾਲ ਵਧੇਗਾ।ਕਿਉਂਕਿ ਡਾਈ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ ਨਾਲ ਜੁੜਦੀ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਗਲਤ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਪੈਦਾ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਸੰਬੰਧਿਤ ਉਤਪਾਦ: https://www.foreivd.com/real-time-pcr-easytm-sybr-green-i-kit-product/
ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਪੜਤਾਲ ਵਿਧੀ (ਟੈਕਮੈਨ ਤਕਨਾਲੋਜੀ): ਦੌਰਾਨਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ, ਇੱਕ ਖਾਸ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਜਾਂਚ ਨੂੰ ਉਸੇ ਸਮੇਂ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਇੱਕ ਜੋੜੀ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਪੜਤਾਲ ਇੱਕ ਲੀਨੀਅਰ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਰਿਪੋਰਟਰ ਸਮੂਹ ਅਤੇ ਇੱਕ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਕੁਨਚਰ ਗਰੁੱਪ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਦੋਵਾਂ ਸਿਰਿਆਂ 'ਤੇ ਲੇਬਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਜਦੋਂ ਪੜਤਾਲ ਬਰਕਰਾਰ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਰਿਪੋਰਟਰ ਸਮੂਹ ਦੁਆਰਾ ਛੱਡੇ ਗਏ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਕੁੰਜਰ ਸਮੂਹ ਦੁਆਰਾ ਲੀਨ ਕਰ ਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਖੋਜ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ ਹੈ;ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ (ਐਕਸਟੇਂਸ਼ਨ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ) ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਟਾਕ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ 5'-3' ਡਾਇਸਰ ਗਤੀਵਿਧੀ ਜਾਂਚ ਨੂੰ ਹਜ਼ਮ ਕਰੇਗੀ ਅਤੇ ਡੀਗਰੇਡ ਕਰੇਗੀ, ਤਾਂ ਜੋ ਰਿਪੋਰਟਰ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਗਰੁੱਪ ਅਤੇ ਕਵੇਨਚਰ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਗਰੁੱਪ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ, ਤਾਂ ਜੋ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਮਾਨੀਟਰਿੰਗ ਸਿਸਟਮ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਸਿਗਨਲ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ, ਜੋ ਕਿ, ਹਰ ਵਾਰ ਇੱਕ ਰੀਅਲ ਐੱਮ.ਐੱਚ.ਐੱਲ.ਏ. ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਸਿਗਨਲਾਂ ਦੇ ਸੰਗ੍ਰਹਿ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਗਠਨ ਦੇ ਸੰਪੂਰਨ ਸਮਕਾਲੀਕਰਨ ਨੂੰ izes.ਤਕਮਨ ਪੜਤਾਲ ਵਿਧੀ ਕਲੀਨਿਕਲ ਖੋਜ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਰਤੀ ਜਾਣ ਵਾਲੀ ਖੋਜ ਵਿਧੀ ਹੈ।
ਸੰਬੰਧਿਤ ਉਤਪਾਦ: https://www.foreivd.com/quickeasy%e1%b5%80%e1%b4%b9-real-time-pcr-kit-taqman-product/
QPCR ਦੇ ਫਾਇਦੇ
1.ਵਿਧੀ ਪਰਿਪੱਕ ਹੈ ਅਤੇ ਸਹਾਇਕ ਉਪਕਰਣ ਅਤੇ ਰੀਏਜੈਂਟ ਪੂਰੇ ਹਨ
2.ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦੀ ਮੱਧਮ ਕੀਮਤ
3.ਵਰਤਣ ਲਈ ਆਸਾਨ
4.ਉੱਚ ਖੋਜ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ
qPCR ਦੇ ਨੁਕਸਾਨ
ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਜੀਨ ਦਾ ਪਰਿਵਰਤਨ ਖੁੰਝੀ ਖੋਜ ਵੱਲ ਖੜਦਾ ਹੈ।
ਘੱਟ ਇਕਾਗਰਤਾ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦਾ ਖੋਜ ਨਤੀਜਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਖੋਜ ਲਈ ਸਟੈਂਡਰਡ ਕਰਵ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਗਲਤੀ ਹੈ।
3. ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ (ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ, ਡੀਪੀਸੀਆਰ) ਤਕਨਾਲੋਜੀ
ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਅਣੂਆਂ ਦੀ ਸੰਪੂਰਨ ਮਾਤਰਾ ਲਈ ਇੱਕ ਤਕਨੀਕ ਹੈ।qPCR ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ, ਡਿਜੀਟਲ PCR ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ DNA/RNA ਅਣੂਆਂ ਦੀ ਸੰਖਿਆ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਅਣੂਆਂ ਦੀ ਸੰਪੂਰਨ ਮਾਤਰਾ ਹੈ।1999 ਵਿੱਚ, ਬਰਟ ਵੋਗਲਸਟਾਈਨ ਅਤੇ ਕੇਨੇਥ ਡਬਲਯੂ. ਕਿਨ-ਜ਼ਲਰ ਨੇ ਰਸਮੀ ਤੌਰ 'ਤੇ dPCR ਦੀ ਧਾਰਨਾ ਦਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਕੀਤਾ।
2006 ਵਿੱਚ, ਫਲੂਡੀਗਮ ਇੱਕ ਵਪਾਰਕ ਚਿੱਪ-ਅਧਾਰਤ dPCR ਯੰਤਰ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਵਾਲਾ ਪਹਿਲਾ ਸੀ।2009 ਵਿੱਚ, ਲਾਈਫ ਟੈਕਨੋਲੋਜੀਜ਼ ਨੇ ਓਪਨ ਐਰੇ ਅਤੇ ਕੁਆਂਟ ਸਟੂਡੀਓ 12K ਫਲੈਕਸ dPCR ਸਿਸਟਮ ਲਾਂਚ ਕੀਤੇ।2013 ਵਿੱਚ, ਲਾਈਫ ਟੈਕਨੋਲੋਜੀਜ਼ ਨੇ QuantStudio 3DdPCR ਸਿਸਟਮ ਲਾਂਚ ਕੀਤਾ, ਜੋ 20,000 ਵਿਅਕਤੀਗਤ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸਮਾਨ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਨਮੂਨੇ ਵੰਡਣ ਲਈ ਉੱਚ-ਘਣਤਾ ਵਾਲੇ ਨੈਨੋਸਕੇਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਫਲੂਇਡਿਕ ਚਿੱਪ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਵਿੱਚ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ.
2011 ਵਿੱਚ, ਬਾਇਓ-ਰੈਡ ਨੇ ਬੂੰਦ-ਆਧਾਰਿਤ QX100 dPCR ਯੰਤਰ ਲਾਂਚ ਕੀਤਾ, ਜੋ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ 20,000 ਬੂੰਦ-ਵਾਟਰ-ਇਨ-ਤੇਲ ਵਿੱਚ ਸਮਾਨ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵੰਡਣ ਲਈ ਵਾਟਰ-ਇਨ-ਆਇਲ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਬੂੰਦਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਬੂੰਦ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ।2012 ਵਿੱਚ, RainDance ਨੇ RainDrop dPCR ਯੰਤਰ ਲਾਂਚ ਕੀਤਾ, ਜੋ ਕਿ ਉੱਚ-ਪ੍ਰੈਸ਼ਰ ਗੈਸ ਦੁਆਰਾ ਚਲਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਹਰ ਇੱਕ ਮਿਆਰੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਨੂੰ ਇੱਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਇਮਲਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਵੰਡਣ ਲਈ 1 ਮਿਲੀਅਨ ਤੋਂ 10 ਮਿਲੀਅਨ ਪਿਕੋਲੀਟਰ-ਪੱਧਰ ਦੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਬੂੰਦਾਂ ਵਾਲੇ।
ਹੁਣ ਤੱਕ, ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਨੇ ਦੋ ਵੱਡੇ ਧੜੇ ਬਣਾਏ ਹਨ, ਚਿੱਪ ਕਿਸਮ ਅਤੇ ਬੂੰਦ ਕਿਸਮ।ਕੋਈ ਫਰਕ ਨਹੀਂ ਪੈਂਦਾ ਕਿ ਕਿਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦਾ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਹੈ, ਇਸਦੇ ਮੁੱਖ ਸਿਧਾਂਤ ਪਤਲੇਪਣ, ਅੰਤਮ ਬਿੰਦੂ ਪੀਸੀਆਰ ਅਤੇ ਪੋਇਸਨ ਵੰਡ ਨੂੰ ਸੀਮਿਤ ਕਰ ਰਹੇ ਹਨ।ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਵਾਲੀ ਮਿਆਰੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਨੂੰ ਹਜ਼ਾਰਾਂ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਸਮਾਨ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਚਿਪਸ ਜਾਂ ਮਾਈਕ੍ਰੋਡ੍ਰੋਪਲੇਟਸ ਵਿੱਚ ਵੰਡੀਆਂ ਜਾਂਦੀਆਂ ਹਨ, ਤਾਂ ਜੋ ਹਰੇਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਇੱਕ ਟੈਂਪਲੇਟ ਅਣੂ ਸ਼ਾਮਲ ਹੋਵੇ, ਅਤੇ ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ-ਅਣੂ ਟੈਂਪਲੇਟ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹ ਕੇ ਸਿਗਨਲ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਜਾਂ ਗੈਰਹਾਜ਼ਰੀ ਗਿਣੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਸੰਪੂਰਨ ਮਾਤਰਾ ਅੰਕੜਾ ਪੋਇਸਨ ਵੰਡ ਦੇ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਕਈ ਡਿਜੀਟਲ PCR ਪਲੇਟਫਾਰਮਾਂ ਦੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਹਨ ਜੋ ਮੈਂ ਵਰਤੇ ਹਨ:
1. ਬਾਇਓ-ਰੈਡ QX200 ਬੂੰਦ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਬਾਇਓ-ਰੈਡQX200 ਇੱਕ ਬਹੁਤ ਹੀ ਸ਼ਾਨਦਾਰ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਹੈ, ਬੁਨਿਆਦੀ ਖੋਜ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ: 20,000 ਨਮੂਨੇ ਬੂੰਦ ਜਨਰੇਟਰ ਦੁਆਰਾ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਵਾਟਰ-ਇਨ-ਆਇਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਬੂੰਦਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਆਮ ਪੀਸੀਆਰ ਮਸ਼ੀਨ 'ਤੇ ਵਧਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਹਰੇਕ ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਬੂੰਦ ਦੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਇੱਕ ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਡ੍ਰੋਪਲੇਟ ਰੀਡਰ ਦੁਆਰਾ ਪੜ੍ਹਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਵਧੇਰੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਹੈ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਦਾ ਜੋਖਮ ਮੱਧਮ ਹੈ।
Xinyi TD1 ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਬੂੰਦ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰXinyi TD1 ਇੱਕ ਘਰੇਲੂ ਡਿਜੀਟਲ PCR ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਹੈ, ਬੁਨਿਆਦੀ ਖੋਜ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ: ਇੱਕ ਬੂੰਦ ਜਨਰੇਟਰ ਰਾਹੀਂ 30,000-50,000 ਵਾਟਰ-ਇਨ-ਆਇਲ ਬੂੰਦਾਂ ਪੈਦਾ ਕਰੋ, ਇੱਕ ਆਮ PCR ਯੰਤਰ 'ਤੇ ਵਧਾਓ, ਅਤੇ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਬੂੰਦ ਪਾਠਕ ਹਰੇਕ ਬੂੰਦ ਦੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਵਿੱਚ ਬੂੰਦਾਂ ਦੀ ਪੈਦਾਵਾਰ ਅਤੇ ਰੀਡਿੰਗ ਦੋਵੇਂ ਹੀ ਗੰਦਗੀ ਦੇ ਘੱਟ ਜੋਖਮ ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਸਮਰਪਿਤ ਚਿੱਪ ਵਿੱਚ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
ਸਟੀਲਾ ਨਾਇਕਾ ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਡ੍ਰੋਪਲੇਟ ਚਿੱਪ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰSTILLA Naica ਇੱਕ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਨਵਾਂ ਡਿਜੀਟਲ PCR ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਹੈ।ਮੁੱਢਲੀ ਖੋਜ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਹੈ: ਚਿੱਪ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਹੱਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਚਿੱਪ ਨੂੰ ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਡ੍ਰੋਪਲੇਟ ਜਨਰੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਪਾਓ, ਅਤੇ 30,000 ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਬੂੰਦਾਂ ਪੈਦਾ ਕਰੋ।ਚਿੱਪ 'ਤੇ ਫੈਲਾਓ, ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਚਿੱਪ 'ਤੇ ਪੂਰਾ ਹੋ ਗਿਆ ਹੈ।ਫਿਰ ਐਂਪਲੀਫਾਈਡ ਚਿੱਪ ਨੂੰ ਮਾਈਕ੍ਰੋ-ਡ੍ਰੋਪਲੇਟ ਰੀਡਿੰਗ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਤਸਵੀਰਾਂ ਲੈ ਕੇ ਪੜ੍ਹਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ ਪੂਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਇੱਕ ਬੰਦ ਚਿੱਪ ਵਿੱਚ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਗੰਦਗੀ ਦਾ ਜੋਖਮ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
4. ਥਰਮੋਫਿਸ਼ਰ ਕੁਆਂਟ ਸਟੂਡੀਓ 3ਡੀ ਚਿੱਪ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ
ThermoFisher QuantStudio 3D ਇੱਕ ਹੋਰ ਕਲਾਸਿਕ ਚਿੱਪ-ਅਧਾਰਿਤ ਡਿਜੀਟਲ PCR ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਹੈ।ਇਸਦੀ ਬੁਨਿਆਦੀ ਖੋਜ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਹੈ: ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਘੋਲ ਨੂੰ ਸਪ੍ਰੈਡਰ ਵਿੱਚ ਜੋੜੋ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਘੋਲ ਨੂੰ ਸਪ੍ਰੈਡਰ ਦੁਆਰਾ 20,000 ਮਾਈਕ੍ਰੋਵੇਲਜ਼ ਨਾਲ ਚਿੱਪ 'ਤੇ ਬਰਾਬਰ ਫੈਲਾਓ।, ਚਿੱਪ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ PCR ਮਸ਼ੀਨ 'ਤੇ ਪਾਓ, ਅਤੇ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਚਿੱਪ ਨੂੰ ਰੀਡਰ ਵਿੱਚ ਪਾਓ ਅਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹਨ ਲਈ ਇੱਕ ਫੋਟੋ ਲਓ।ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਹੈ, ਅਤੇ ਸਾਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਇੱਕ ਬੰਦ ਚਿੱਪ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਗੰਦਗੀ ਦਾ ਜੋਖਮ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
5. JN MEDSYS ਕਲੈਰਿਟੀ ਚਿੱਪ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ
JN MEDSYS ਸਪੱਸ਼ਟਤਾ ਇੱਕ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਨਵਾਂ ਚਿਪ-ਕਿਸਮ ਦਾ ਡਿਜੀਟਲ PCR ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਹੈ।ਇਸਦੀ ਮੁੱਢਲੀ ਖੋਜ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਹੈ: ਐਪਲੀਕੇਟਰ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਘੋਲ ਨੂੰ ਐਪਲੀਕੇਟਰ ਦੁਆਰਾ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਫਿਕਸ ਕੀਤੀਆਂ 10,000 ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬਾਂ 'ਤੇ ਬਰਾਬਰ ਫੈਲਾਓ।ਮਾਈਕ੍ਰੋਪੋਰਸ ਚਿੱਪ 'ਤੇ, ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਘੋਲ ਕੇਸ਼ਿਕਾ ਕਿਰਿਆ ਦੁਆਰਾ ਚਿੱਪ ਵਿੱਚ ਦਾਖਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਚਿੱਪ ਵਾਲੀ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬ ਨੂੰ ਐਮਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਪੀਸੀਆਰ ਮਸ਼ੀਨ 'ਤੇ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਫੋਟੋ ਖਿੱਚ ਕੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਪੜ੍ਹਨ ਲਈ ਚਿੱਪ ਨੂੰ ਰੀਡਰ ਵਿੱਚ ਪਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਵਧੇਰੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਹੈ.ਗੰਦਗੀ ਦਾ ਖ਼ਤਰਾ ਘੱਟ ਹੈ।
ਹਰੇਕ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਦੇ ਮਾਪਦੰਡਾਂ ਨੂੰ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਅਨੁਸਾਰ ਸੰਖੇਪ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ:
ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਦੇ ਮੁਲਾਂਕਣ ਸੂਚਕ ਹਨ: ਸਪਲਿਟ ਯੂਨਿਟਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ, ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਚੈਨਲਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ, ਸੰਚਾਲਨ ਦੀ ਗੁੰਝਲਤਾ ਅਤੇ ਗੰਦਗੀ ਦਾ ਜੋਖਮ।ਪਰ ਸਭ ਤੋਂ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਗੱਲ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਖੋਜ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ.ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਪਲੇਟਫਾਰਮਾਂ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਦਾ ਇੱਕ ਤਰੀਕਾ ਹੈ ਇੱਕ ਦੂਜੇ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਨ ਲਈ ਮਲਟੀਪਲ ਡਿਜੀਟਲ ਪੀਸੀਆਰ ਪਲੇਟਫਾਰਮਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ, ਅਤੇ ਦੂਜਾ ਤਰੀਕਾ ਸਹੀ ਮੁੱਲਾਂ ਵਾਲੇ ਮਿਆਰੀ ਪਦਾਰਥਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ ਹੈ।
dPCR ਦੇ ਫਾਇਦੇ
1.ਪੂਰਨ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨਾ
2.ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ
3.ਘੱਟ ਨਕਲ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾ ਸਕਦਾ ਹੈ
dPCR ਦੇ ਨੁਕਸਾਨ1. ਮਹਿੰਗਾ ਸਾਜ਼ੋ-ਸਾਮਾਨ ਅਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ 2. ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਲੰਬਾ ਖੋਜ ਸਮਾਂ 3. ਤੰਗ ਖੋਜ ਸੀਮਾ
ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ, ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀਆਂ ਤਿੰਨ ਪੀੜ੍ਹੀਆਂ ਦੇ ਆਪਣੇ ਫਾਇਦੇ ਅਤੇ ਨੁਕਸਾਨ ਹਨ, ਅਤੇ ਹਰ ਇੱਕ ਦੇ ਆਪਣੇ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਹਨ, ਅਤੇ ਇਹ ਕੋਈ ਰਿਸ਼ਤਾ ਨਹੀਂ ਹੈ ਕਿ ਇੱਕ ਪੀੜ੍ਹੀ ਦੂਜੀ ਦੀ ਥਾਂ ਲੈ ਲਵੇ।ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਨਿਰੰਤਰ ਤਰੱਕੀ ਨੇ ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਵਿੱਚ ਨਵੀਂ ਜੀਵਨਸ਼ਕਤੀ ਦਾ ਟੀਕਾ ਲਗਾਇਆ ਹੈ, ਇਸ ਨੂੰ ਇੱਕ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇੱਕ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਦਿਸ਼ਾ ਨੂੰ ਅਨਲੌਕ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਖੋਜ ਨੂੰ ਵਧੇਰੇ ਸੁਵਿਧਾਜਨਕ ਅਤੇ ਸਹੀ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
ਸਰੋਤ: ਡਾ. ਯੂਆਨ ਤੁਹਾਨੂੰ ਜਾਂਚ ਲਈ ਲੈ ਜਾਂਦਾ ਹੈ
ਸਿਫਾਰਸ਼ੀ ਉਤਪਾਦ:
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਨਵੰਬਰ-18-2022
