ਜਾਣ-ਪਛਾਣ:

RNA, ਵਿਗਿਆਨਕ ਨਾਮ ribonucleic acid, ਇਸਦਾ ਸੰਖੇਪ ਰੂਪ RiboNucleic Acid ਤੋਂ ਆਉਂਦਾ ਹੈ, ਇੱਕ ਕਿਸਮ ਦਾ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਹੈ ਜੋ ਫਾਸਫੋਡੀਸਟਰ ਬਾਂਡਾਂ ਦੁਆਰਾ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਦਰਜਨਾਂ ਰਿਬੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਨੂੰ ਜੋੜ ਕੇ ਬਣਦਾ ਹੈ।

ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਪੜਚੋਲ ਕਰਨ ਦਾ ਆਧਾਰ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ-ਮੁਕਤ ਕੁੱਲ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਕੱਢਣਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਦੇ ਮੂਲ ਸਿਧਾਂਤ ਦਾ ਸਾਰ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ:

1. ਪਹਿਲਾਂ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜੋ

2. ਫਿਰ ਮੈਕਰੋਮੋਲੀਕੂਲਰ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ (ਪ੍ਰੋਟੀਨ, ਲਿਪਿਡਸ, ਡੀਐਨਏ, ਆਦਿ) ਨੂੰ ਹਟਾਓ।

3. ਅੰਤ ਵਿੱਚ, ਲੂਣ ਅਤੇ ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਨੂੰ ਹਟਾਉਂਦੇ ਹੋਏ, ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਹੋਰ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਕੱਢਣ ਦੀ ਵਿਧੀ ਦਾ ਅਤੀਤ ਅਤੇ ਵਰਤਮਾਨ

ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਦੀ ਵਿਧੀ ਦੀ ਪਹਿਲੀ ਪੀੜ੍ਹੀ ਹੈ TRIzol ਵਰਖਾ ਵਿਧੀ (ਵਰਤਣ ਵਾਲੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਵਿੱਚ guanidine isothiocyanate, phenol, chloroform, etc.) ਦੀ ਕਾਢ ਪਿਓਟਰ ਚੋਮਸੀਨਸਕੀ ਅਤੇ ਦਾਦੀ ਨਿਕੋਲੇਟਾ ਸੈਚੀ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਖੋਜ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦਿੰਦੀ ਹੈ, ਉਦੋਂ ਤੋਂ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਖੋਜ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਆਸਾਨ ਹੋ ਗਈ ਹੈ।

ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ, ਦਾਦਾ ਜੀ ਨੇ ਇਹ ਪੇਟੈਂਟ ਇਨਵਿਟ੍ਰੋਜਨ ਨੂੰ ਵੇਚ ਦਿੱਤਾ, ਅਤੇ ਇਨਵਿਟ੍ਰੋਜਨ ਨੇ ਇਸ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਦੁਨੀਆ ਵਿੱਚ ਅੱਗੇ ਵਧਾਇਆ ਅਤੇ ਇੱਕ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਤਰੀਕਾ ਬਣ ਗਿਆ।

ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ, ਇਨਵਿਟ੍ਰੋਜਨ ਨੂੰ ਥਰਮੋ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ!

ਪ੍ਰਤੀਨਿਧੀ ਉਤਪਾਦ: ਇਨਵੀਟ੍ਰੋਜਨ ਦਾ TRIzol ਰੀਐਜੈਂਟ

ਹਾਲਾਂਕਿ, TRIzol ਵਰਖਾ ਵਿਧੀ ਲਈ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਵਰਖਾ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਰੀਐਜੈਂਟ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕੰਮ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਲੰਬਾ ਸਮਾਂ ਲੈਂਦੇ ਹਨ।

ਇਸ ਲਈ, ਦੂਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ ਦੇ ਕਾਲਮ-ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਵਿਧੀ ਹੋਂਦ ਵਿੱਚ ਆਈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਹੋਰ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਨੂੰ ਦੂਰ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਰਿਕਵਰੀ ਨੂੰ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਕਰਨ ਲਈ ਸਿਲਿਕਾ ਜੈੱਲ ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਇੱਕ ਖਾਸ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਸੋਖਣ ਸਮੱਗਰੀ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ।

ਦੂਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ ਦਾ ਤਰੀਕਾ ਸਥਿਰ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਕਾਰਵਾਈ ਨੂੰ ਸਰਲ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜੋਖਮ ਦੇ ਕਾਰਕ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰਦਾ ਹੈ।

ਪ੍ਰਤੀਨਿਧ ਉਤਪਾਦ: QIAGEN RNeasy ਅਤੇ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਘਰੇਲੂ ਉਤਪਾਦ

ਹਾਲਾਂਕਿ, ਪਹਿਲੀ ਅਤੇ ਦੂਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ ਦੇ ਦੋਨੋਂ ਤਰੀਕਿਆਂ ਲਈ ਡੀਐਨਏ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ DNase ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਬਾਅਦ ਦੇ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਲਈ ਕੁਝ ਅਸੁਵਿਧਾ ਲਿਆਉਂਦਾ ਹੈ।ਬਕਾਇਆ DNase ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦੇਵੇਗਾ ਅਤੇ ਪਹਿਲੇ-ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਨੂੰ ਘਟਾ ਦੇਵੇਗਾ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਹੋਵੇਗੀ।

ਇਸ ਲਈ, ਤੀਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ ਕੱਢਣ ਦਾ ਤਰੀਕਾ ਦੂਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ.ਪ੍ਰਯੋਗ ਨੂੰ ਕੋਈ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਜੋੜਨ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਸਿਰਫ਼ ਦੋ ਕਾਲਮਾਂ ਨਾਲ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਕਾਲਮ 1: ਡੀਐਨਏ ਸਾਫ਼ ਕਰਨ ਲਈ ਡੀਐਨਏ-ਸਫ਼ਾਈ ਕਾਲਮ

ਕਾਲਮ 2: ਸਿਰਫ RNA ਕਾਲਮ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ RNA ਨੂੰ ਸੋਖ ਲੈਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਮੁੜ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਦਾ ਹੈ

ਅਜਿਹਾ ਸਧਾਰਨ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਨਾ ਸਿਰਫ਼ ਸਮੇਂ ਦੀ ਬਚਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਸਗੋਂ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੇ ਸੰਚਾਲਨ ਦੀ ਸਹੂਲਤ ਵੀ ਦਿੰਦਾ ਹੈ!

ਪ੍ਰਤੀਨਿਧ ਉਤਪਾਦ: QIAGEN RNeasy Plus ਅਤੇਫੋਰਜੀਨਆਰਐਨਏ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਲੜੀ ਉਤਪਾਦ

(RNeasy Plus)

(ਫੋਰਜੀਨ ਦਾਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ)

ਚੁੱਪਚਾਪ ਦੱਸਾਂ!ਫੋਰਜੀਨ ਦੀ RNA ਕਿੱਟ ਇੱਕ ਬਹੁਤ ਹੀ ਆਸਾਨ-ਵਰਤਣ ਲਈ RNase ਇਰੇਜ਼ਰ ਵੀ ਪੇਸ਼ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਮਨੁੱਖੀ ਸਰੀਰ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਵੀ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇ ਪਦਾਰਥਾਂ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ, 1 ਮਿੰਟ ਵਿੱਚ ਠੋਸ ਸਤ੍ਹਾ 'ਤੇ 400μg RNase ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ!

ਤਸਵੀਰ1: ਸੰਚਾਲਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਤੁਲਨਾ ਚਾਰਟ

ਫੋਰਜੀਨ ਦੇ ਉਤਪਾਦ ਸਿਰਫ਼ ਦੋ ਗੀਤਾਂ ਵਿੱਚ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਦੂਜਿਆਂ ਨੂੰ ਤੁਹਾਡੀ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੀ ਤਰੱਕੀ ਤੋਂ ਈਰਖਾ ਨਾ ਕਰੋ!

ਤਸਵੀਰ2:Eਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਤੁਲਨਾ ਚਾਰਟ

ਪਹਿਲੀ ਪੀੜ੍ਹੀ (1: TRIzol)

ਦੂਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ (2: QIAGEN ਦੀ RNeasy)

ਤੀਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

ਤਸਵੀਰ3: qPCR ਗ੍ਰਾਫ (ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਰਵ ਗ੍ਰਾਫ)

ਪਹਿਲੀ ਪੀੜ੍ਹੀ (ਹਰੇ ਦਾ ਮਤਲਬ TRIzol -, ਲਾਲ ਦਾ ਮਤਲਬ TRIzol +)

ਦੂਸਰੀ ਪੀੜ੍ਹੀ (ਆਕਾਸ਼ ਨੀਲੇ ਦਾ ਅਰਥ ਹੈ ਕਿਆਜੇਨ ਆਰਨਸੀ-, ਲਾਲ ਦਾ ਅਰਥ ਹੈ ਕਿਆਜੇਨ ਆਰਨਸੀ +)

ਤੀਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ (ਨੀਲੇ ਦਾ ਅਰਥ ਹੈ ਕਿਆਏਜੇਨ ਆਰਨਸੀ ਪਲੱਸ, ਹਰਾ ਦਾ ਮਤਲਬ ਫੋਰਜੀਨ)

(ਨੋਟ: qPCR ਗ੍ਰਾਫ “-” ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ DNase ਸ਼ਾਮਲ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਅਤੇ DNA ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਹਟਾਇਆ ਨਹੀਂ ਗਿਆ ਹੈ। ਇਸਲਈ, CT ਵੱਧ ਹੈ ਅਤੇ ਨਤੀਜਾ ਸਹੀ ਨਹੀਂ ਹੈ; “+” ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ DNase ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਹੈ ਅਤੇ DNA ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਹਟਾ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਨਤੀਜਾ ਸਹੀ ਹੈ)

ਹਰ ਤਕਨੀਕੀ ਅਪਗ੍ਰੇਡ ਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ ਕਿ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦਾ ਸੰਚਾਲਨ ਇੱਕ ਸਰਲ ਅਤੇ ਵਧੇਰੇ ਉਪਭੋਗਤਾ-ਅਨੁਕੂਲ ਦਿਸ਼ਾ ਵਿੱਚ ਵਿਕਸਤ ਹੋ ਰਿਹਾ ਹੈ।

ਫੋਰਜੀਨ ਦਾ ਉਦੇਸ਼ ਵਧੇਰੇ ਵਿਗਿਆਨਕ ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਸਮੇਂ ਅਤੇ ਲਾਗਤ ਨੂੰ ਬਚਾਉਣ, ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ, ਅਤੇ ਸਾਂਝੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਧੇਰੇ ਕੀਮਤੀ ਵਿਗਿਆਨਕ ਖੋਜ ਪ੍ਰਾਪਤੀਆਂ ਬਣਾਉਣ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰਨਾ ਹੈ।