ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਸ਼ਾਨਦਾਰ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਇਸਦੀ ਵਿਸ਼ਾਲ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਸਮਰੱਥਾ ਅਤੇ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਅਤੇ ਖੋਜ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰਨ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸਮਰੱਥਾ ਅਤੇ ਖੋਜ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰਨ ਲਈ ਵਚਨਬੱਧ ਹਾਂ, ਪਰ ਸਿਰਦਰਦ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਹੈ।ਝੂਠੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਅਕਸਰ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਕਰਾਸ-ਦੂਸ਼ਣ ਜਾਂ PCR ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਦੂਸ਼ਣ ਦੀ ਇੱਕ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਮਾਤਰਾ ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿੱਚ ਗਲਤ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਪੰਜ ਕਿਸਮ ਦੇ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਗੰਦਗੀ
ਪੀਸੀਆਰ ਗੰਦਗੀ ਦੇ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਕਾਰਨ ਹਨ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਮੋਟੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਹੇਠ ਲਿਖੀਆਂ ਸ਼੍ਰੇਣੀਆਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ:
ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਗੰਦਗੀ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਲਈ ਕੰਟੇਨਰ ਦੇ ਗੰਦਗੀ ਕਾਰਨ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜਾਂ ਜਦੋਂ ਨਮੂਨਾ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਇਹ ਢਿੱਲੀ ਸੀਲਿੰਗ ਦੇ ਕਾਰਨ ਕੰਟੇਨਰ ਤੋਂ ਬਾਹਰ ਲੀਕ ਹੋ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਾਂ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਕੰਟੇਨਰ ਦੇ ਬਾਹਰਲੇ ਪਾਸੇ ਲਗਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਅੰਤਰ-ਦੂਸ਼ਣ ਹੁੰਦਾ ਹੈ;ਗੰਦਗੀ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਗੰਦਗੀ ਵੱਲ ਖੜਦੀ ਹੈ;ਕੁਝ ਮਾਈਕਰੋਬਾਇਲ ਨਮੂਨੇ, ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਵਾਇਰਸ, ਐਰੋਸੋਲ ਨਾਲ ਫੈਲ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜਾਂ ਐਰੋਸੋਲ ਬਣ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਆਪਸੀ ਗੰਦਗੀ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਮੁੱਖ ਕਾਰਨ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਦੌਰਾਨ, ਨਮੂਨਾ ਬੰਦੂਕ, ਕੰਟੇਨਰ, ਡਬਲ ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ ਅਤੇ ਹੋਰ ਘੋਲ ਪੀਸੀਆਰ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੁਆਰਾ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।
ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਅਤੇ ਕੁਝ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਜੋ ਕਲੋਨ ਕੀਤੇ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡਾਂ ਨੂੰ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਜੋਂ ਵਰਤਦੀਆਂ ਹਨ, ਕਲੋਨ ਕੀਤੇ ਪਲਾਜ਼ਮਿਡ ਗੰਦਗੀ ਦੀ ਸਮੱਸਿਆ ਵੀ ਆਮ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ ਯੂਨਿਟ ਵਾਲੀਅਮ ਵਿੱਚ ਕਲੋਨਿੰਗ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਦੀ ਸਮੱਗਰੀ ਕਾਫ਼ੀ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਵਧੇਰੇ ਸੰਦਾਂ ਅਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਜੀਵਿਤ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਦੇ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹੋਣ ਦੀ ਬਹੁਤ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਜੀਵਿਤ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਮਜ਼ਬੂਤ ਵਿਕਾਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰਜਨਨ ਸਮਰੱਥਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਐਮਪਲੀਫਾਈਡ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦਾ ਗੰਦਗੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਆਮ ਗੰਦਗੀ ਦੀ ਸਮੱਸਿਆ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਕਾਪੀ ਮਾਤਰਾ ਵੱਡੀ ਹੈ (ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 1013 ਕਾਪੀਆਂ/ਮਿਲੀ), ਜੋ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਕਾਪੀ ਨੰਬਰ ਦੀ ਸੀਮਾ ਤੋਂ ਕਿਤੇ ਵੱਧ ਹੈ, ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਗੰਦਗੀ ਦੀ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਮਾਤਰਾ ਗਲਤ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਏਰੋਸੋਲ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਗੰਦਗੀ ਦਾ ਸਭ ਤੋਂ ਸੰਭਾਵਿਤ ਰੂਪ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸ ਨੂੰ ਨਜ਼ਰਅੰਦਾਜ਼ ਕਰਨਾ ਵੀ ਸਭ ਤੋਂ ਆਸਾਨ ਹੈ।ਇਹ ਤਰਲ ਸਤਹ ਅਤੇ ਹਵਾ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਰਗੜ ਕੇ ਬਣਦਾ ਹੈ।ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਐਰੋਸੋਲ ਗੰਦਗੀ ਉਦੋਂ ਬਣ ਸਕਦੀ ਹੈ ਜਦੋਂ ਢੱਕਣ ਨੂੰ ਖੋਲ੍ਹਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਨਮੂਨਾ ਐਸਪੀਰੇਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜਾਂ ਉਦੋਂ ਵੀ ਜਦੋਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਟਿਊਬ ਨੂੰ ਜ਼ੋਰ ਨਾਲ ਹਿਲਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਗਣਨਾਵਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਇੱਕ ਐਰੋਸੋਲ ਕਣ ਵਿੱਚ 48,000 ਕਾਪੀਆਂ ਹੋ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ, ਇਸਲਈ ਇਸ ਨਾਲ ਹੋਣ ਵਾਲਾ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਇੱਕ ਸਮੱਸਿਆ ਹੈ ਜੋ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਧਿਆਨ ਦੇ ਹੱਕਦਾਰ ਹੈ।
ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਟੈਸਟਿੰਗ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਅਕਸਰ ਇੱਕ ਖਾਸ ਜੀਨ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕੋ ਜੋੜੇ ਦੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ।ਸਮੇਂ ਦੇ ਨਾਲ, ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਸਪੇਸ ਵਿੱਚ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਗੰਦਗੀ ਦੀ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਹੋਵੇਗੀ।ਇੱਕ ਵਾਰ ਅਜਿਹੀ ਗੰਦਗੀ ਹੋ ਜਾਵੇ ਤਾਂ ਇਸ ਨੂੰ ਥੋੜ੍ਹੇ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਖ਼ਤਮ ਕਰਨਾ ਮੁਸ਼ਕਲ ਹੋ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਪਹਿਲੀਆਂ ਤਿੰਨ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਅਸੀਂ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਸਾਧਨਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਾਂ, ਪਰ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਨੂੰ ਰੋਕਣਾ ਮੁਸ਼ਕਲ ਹੈ, ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਗੈਰ-ਮਿਆਰੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਦੇ ਨਿਰਮਾਣ ਵਿੱਚ।ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ, ਜਦੋਂ ਪਾਈਪੇਟ ਦੀ ਟਿਪ ਤਰਲ ਨੂੰ ਚੂਸਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਉਡਾਉਂਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬ ਕਵਰ ਖੋਲ੍ਹਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇੱਕ ਐਰੋਸੋਲ ਬਣਦਾ ਹੈ।ਐਰੋਸੋਲ ਦੁਆਰਾ ਲਿਜਾਏ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਡੀਐਨਏ ਅਣੂ (ਇੱਕ ਐਰੋਸੋਲ ਹਜ਼ਾਰਾਂ ਡੀਐਨਏ ਲੈ ਸਕਦਾ ਹੈ) ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰਨਾ ਮੁਸ਼ਕਲ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਉਹ ਹਵਾ ਵਿੱਚ ਤੈਰਦੇ ਹਨ।ਇੱਕ ਵਾਰ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦਾ ਅਗਲਾ ਦੌਰ ਸ਼ੁਰੂ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਝੂਠੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਲਾਜ਼ਮੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਾਪਰਨਗੇ।
ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਚਿੱਤਰ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਨੇ ਦਿਲਚਸਪੀ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਬੈਂਡ ਨੂੰ ਵੀ ਵਧਾਇਆ ਹੈ:
ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਅਤੇ ਰੋਕਥਾਮ ਦੇ ਇਸ ਅੰਕ ਦਾ ਪਹਿਲਾ ਹਿੱਸਾ ਇੱਥੇ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਅਗਲਾ ਅੰਕ ਤੁਹਾਡੇ ਲਈ ਦੂਜਾ ਭਾਗ "ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਗੰਦਗੀ ਦੀ ਰੋਕਥਾਮ" ਲਿਆਏਗਾ, ਇਸ ਲਈ ਬਣੇ ਰਹੋ!
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਜੁਲਾਈ-25-2017