ਪ੍ਰਯੋਗ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਕਰਮਚਾਰੀਆਂ ਦੇ ਵਿਵਹਾਰ ਨੂੰ ਮਿਆਰੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ PCR ਪ੍ਰਯੋਗ SOP ਦੀ ਸਥਾਪਨਾ ਕਰੋ।
ਪ੍ਰਯੋਗਕਰਤਾ ਓਪਰੇਟਿੰਗ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਸਖਤੀ ਨਾਲ ਪਾਲਣਾ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜੋ ਮਨੁੱਖੀ ਕਾਰਕਾਂ ਕਰਕੇ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ ਜਾਂ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਨੂੰ ਹੋਣ ਤੋਂ ਰੋਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਪ੍ਰਯੋਗਕਰਤਾ ਕੋਲ ਸੰਬੰਧਿਤ ਪੇਸ਼ੇਵਰ ਗਿਆਨ ਅਤੇ ਹੁਨਰ ਹੋਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਸੰਬੰਧਿਤ ਉਪਕਰਣਾਂ ਦੇ ਸੰਚਾਲਨ ਵਿੱਚ ਮੁਹਾਰਤ, ਪੂਰੀ ਕਾਰਜ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਸਪੱਸ਼ਟ ਕਰਨਾ, ਗੰਦਗੀ ਦੇ ਇਲਾਜ ਦੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਿਧੀਆਂ ਵਿੱਚ ਮੁਹਾਰਤ ਹਾਸਲ ਕਰਨਾ, ਅਤੇ ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਸਹੀ ਵਿਆਖਿਆ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
ਇੱਕ ਮਿਆਰੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਸਥਾਪਤ ਕਰੋ।
ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਨੂੰ ਸਿਧਾਂਤਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਚਾਰ ਖੇਤਰਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਰਥਾਤ ਰੀਏਜੈਂਟ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਦਾ ਖੇਤਰ, ਨਮੂਨਾ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਖੇਤਰ, ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਅਤੇ ਐਮਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਖੇਤਰ।ਪਹਿਲੇ ਦੋ ਖੇਤਰ ਪ੍ਰੀ-ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਹਨ, ਅਤੇ ਆਖਰੀ ਦੋ ਖੇਤਰ ਪੋਸਟ-ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਹਨ।ਪ੍ਰੀ-ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਜ਼ੋਨ ਅਤੇ ਪੋਸਟ-ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਜ਼ੋਨ ਨੂੰ ਸਖਤੀ ਨਾਲ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਸਮੱਗਰੀ, ਰੀਐਜੈਂਟਸ, ਰਿਕਾਰਡਿੰਗ ਪੇਪਰ, ਪੈੱਨ, ਸਫਾਈ ਸਮੱਗਰੀ, ਆਦਿ, ਸਿਰਫ ਪ੍ਰੀ-ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਤੋਂ ਪੋਸਟ-ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਤੱਕ ਵਹਿ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਯਾਨੀ ਰੀਏਜੈਂਟ ਤਿਆਰੀ ਖੇਤਰ → ਨਮੂਨਾ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਖੇਤਰ → ਐਮਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ → ਐਮਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਖੇਤਰ, ਅਤੇ ਪਿੱਛੇ ਵੱਲ ਨਹੀਂ ਵਹਿਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਹਵਾ ਦਾ ਪ੍ਰਵਾਹ ਵੀ ਪ੍ਰੀ-ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਤੋਂ ਪੋਸਟ-ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਤੱਕ ਵਹਿਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਪਿੱਛੇ ਵੱਲ ਨਹੀਂ ਵਹਿਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਆਦਰਸ਼ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਹੇਠਾਂ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ:
ਚਿੱਤਰ A: ਬਫਰ ਰੂਮ ਵਿੱਚ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਦਬਾਅ ਦੇ ਨਾਲ ਆਦਰਸ਼ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਸੈੱਟਅੱਪ ਮੋਡ
ਚਿੱਤਰ B: ਬਫਰ ਰੂਮ ਵਿੱਚ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਦਬਾਅ ਦੇ ਨਾਲ ਆਦਰਸ਼ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਸੈੱਟਅੱਪ ਮੋਡ
ਚਿੱਤਰ A ਅਤੇ ਚਿੱਤਰ B ਵਿੱਚ ਦਿੱਤੇ ਗਏ PCR ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਸੈਟਅਪ ਡਾਇਗ੍ਰਾਮ ਇੱਕ ਵਧੇਰੇ ਆਦਰਸ਼ ਸੈੱਟਅੱਪ ਮੋਡ ਹੋਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਸ਼ਰਤਾਂ ਵਾਲੀ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਲਈ ਇਸ ਮੋਡ ਦਾ ਹਵਾਲਾ ਦੇ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਆਮ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਲਈ, ਇਹ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਅਤੇ ਉਤਪਾਦ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਖੇਤਰ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨਾ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਖੇਤਰ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਕਵਰ ਦੇ ਖੁੱਲਣ ਨੂੰ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਘੱਟ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਯਾਦ ਰੱਖੋ: ਉਤਪਾਦ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਉਤਪਾਦਾਂ ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਸਪਲਾਈਆਂ ਨੂੰ ਨਮੂਨਾ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਖੇਤਰ ਅਤੇ PCR ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਲਿਜਾਏ ਜਾਣ ਦੀ ਸਖ਼ਤ ਮਨਾਹੀ ਹੈ।
ਜੇਕਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਸਿਰਫ਼ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਅਤੇ ਪਛਾਣ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਰਵਾਇਤੀ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਬਜਾਏ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸੰਕੇਤਾਂ ਦੁਆਰਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਲਈ ਢੱਕਣ ਨੂੰ ਖੋਲ੍ਹਣ ਦੀ ਕੋਈ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਐਰੋਸੋਲ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਲੀਕ ਹੋਣ ਕਾਰਨ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੇ ਗੰਦਗੀ ਤੋਂ ਬਚਦਾ ਹੈ।ਜੇ ਤੁਸੀਂ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੇ ਲੋਡਿੰਗ ਪੜਾਅ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਕੈਪ ਓਪਨਿੰਗ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਨੂੰ ਵਧਾਉਂਦੇ ਹੋ, ਤਾਂ ਐਰੋਸੋਲ ਗੰਦਗੀ ਹੋਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ।ਗਿਣਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰਨ ਅਤੇ ਗੁਣਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਬਦਲਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
UNG ਐਂਟੀ-ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੂਸ਼ਣ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਸਿਸਟਮ dTTP ਦੀ ਬਜਾਏ dUTP ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਸਾਰੇ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ (ਡੀਐਨਏ ਟੁਕੜੇ) ਡੀਯੂਟੀਪੀ ਨਾਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ;ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਅਗਲੇ ਦੌਰ ਵਿੱਚ, ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਗਏ UNG ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਪੀਸੀਆਰ ਤੋਂ 5 ਮਿੰਟ ਪਹਿਲਾਂ 37 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਡੀਯੂਟੀਪੀ ਵਾਲੇ ਸਾਰੇ ਡੀਐਨਏ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਡੀਗਰੇਡ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਕਾਰਨ ਐਰੋਸੋਲ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੇਠ ਚਿੱਤਰ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ:
ਨੋਟ: ਸਿੱਧੀ ਪੀਸੀਆਰ ਲੜੀ ਲਈ, ਤੁਸੀਂ ਫੋਰਜੀਨ ਦੇ ਐਂਟੀ-ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੂਸ਼ਣ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੇ ਲੜੀਵਾਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹੋ।ਸੁਝਾਅ ਦਿਓ
ਵੱਡੀ ਪੱਧਰ 'ਤੇ ਜੀਨੋਟਾਈਪਿੰਗ ਟੈਸਟਿੰਗ ਕਰਨ ਵਾਲੀਆਂ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਲਈ, ਵਾਜਬ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਦੇ ਨਿਰਮਾਣ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਰੀਐਜੈਂਟਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਲਈ UNG ਐਂਟੀ-ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੂਸ਼ਣ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਜ਼ੋਰਦਾਰ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਰੀਮਾਈਂਡਰ: ਇਸ ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਦੂਰ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦੀ ਜੋ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਕਾਰਨ ਹੋਈ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਯੂ.ਐਨ.ਜੀ. ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਸੰਬੰਧਿਤ ਟੈਸਟ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਜਾਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਯੂ.ਐਨ.ਜੀ. ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ. ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ. ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਰੋਕਿਆ ਜਾ ਸਕੇ।
ਵੱਡੇ ਪੈਮਾਨੇ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਫੋਰਜੀਨ ਦੀ ਸਿੱਧੀ PCR-UNG ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ:
ਪਲਾਂਟ ਲੀਫ ਡਾਇਰੈਕਟ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿੱਟ-UNG;
ਪਲਾਂਟ ਬੀਜ ਡਾਇਰੈਕਟ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿੱਟ-ਯੂ.ਐਨ.ਜੀ.
ਐਨੀਮਲ ਟਿਸ਼ੂ ਡਾਇਰੈਕਟ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿੱਟ-ਯੂ.ਐਨ.ਜੀ.
ਮਾਊਸ ਟੇਲ ਡਾਇਰੈਕਟ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿੱਟ-UNG;
ਜ਼ੈਬਰਾ ਫਿਸ਼ ਡਾਇਰੈਕਟ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿੱਟ-ਯੂ.ਐਨ.ਜੀ.
ਫੋਰਜੀਨ ਤੋਂ ਕਿੱਟਾਂ ਦੀ ਇਹ ਲੜੀਨਾ ਸਿਰਫ਼ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਵੱਡੇ ਪੈਮਾਨੇ 'ਤੇ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਸਗੋਂ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਰੋਕ ਅਤੇ ਕੰਟਰੋਲ ਵੀ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਮਾਰਚ-19-2021
