ਲੀਡ

ਲੰਬਾ ਗੈਰ-ਕੋਡਿੰਗ RNA, lncRNA ਇੱਕ ਗੈਰ-ਕੋਡਿੰਗ RNA ਹੈ ਜਿਸਦੀ ਲੰਬਾਈ 200 ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਾਂ ਤੋਂ ਵੱਧ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 200-100000 nt ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ।lncRNA ਐਪੀਜੇਨੇਟਿਕ, ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਅਤੇ ਪੋਸਟ-ਟਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨਲ ਪੱਧਰਾਂ 'ਤੇ ਜੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤ੍ਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ X ਕ੍ਰੋਮੋਸੋਮ ਸਾਈਲੈਂਸਿੰਗ, ਜੀਨੋਮ ਛਾਪਣ ਅਤੇ ਕ੍ਰੋਮੈਟਿਨ ਸੋਧ, ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ, ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਦਖਲਅੰਦਾਜ਼ੀ, ਪ੍ਰਮਾਣੂ ਆਵਾਜਾਈ, ਸੈੱਲ ਚੱਕਰ ਨਿਯਮ, ਸੈੱਲ ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਅਤੇ ਹੋਰ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤ੍ਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕੰਪੋਜ਼ੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਨਿਯੰਤ੍ਰਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਮਨੁੱਖੀ ਬਿਮਾਰੀਆਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ, ਵਿਕਾਸ ਅਤੇ ਰੋਕਥਾਮ ਨਾਲ ਨੇੜਿਓਂ ਸਬੰਧਤ ਹਨ, ਅਤੇ ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ ਬਾਇਓਮੈਡੀਸਨ ਦੇ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਗਰਮ ਸਥਾਨ ਹਨ।

01  LncRNA ਦੀਆਂ ਕਿਸਮਾਂ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ

lncRNA ਨੂੰ ਇਸਦੇ ਗਠਨ ਦੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਰੋਤਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕਈ ਕਿਸਮਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਉੱਪਰ ਚਿੱਤਰ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਹੇਠ ਲਿਖੇ ਗੁਣ ਹਨ:

1. lncRNAs ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਲੰਬੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਗਤੀਸ਼ੀਲ ਸਮੀਕਰਨ ਅਤੇ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਸਪਲੀਸਿੰਗ ਤਰੀਕਿਆਂ ਨਾਲ
2. ਕੋਡਿੰਗ ਜੀਨਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ, lncRNA ਵਿੱਚ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਘੱਟ ਸਮੀਕਰਨ ਪੱਧਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ
3. ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ lncRNAs ਵਿੱਚ ਟਿਸ਼ੂ ਵਿਭਿੰਨਤਾ ਅਤੇ ਵਿਕਾਸ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਸਪੱਸ਼ਟ ਅਸਥਾਈ ਅਤੇ ਸਥਾਨਿਕ ਸਮੀਕਰਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
4. ਟਿਊਮਰ ਅਤੇ ਹੋਰ ਬਿਮਾਰੀਆਂ ਵਿੱਚ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਪ੍ਰਗਟਾਵੇ ਹਨ
5. lncRNA ਦੇ ਉਪ-ਸੈਲੂਲਰ ਸਥਾਨ ਵਿਭਿੰਨ ਹਨ
6. ਕ੍ਰਮ ਸੰਭਾਲ ਵਿੱਚ ਘੱਟ ਹੈ, ਪਰ ਫੰਕਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਕੁਝ ਹੱਦ ਤੱਕ ਸੰਭਾਲ ਹੈ, ਆਦਿ।

02 LncRNA ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਬਾਰੇ ਅਕਸਰ ਪੁੱਛੇ ਜਾਂਦੇ ਸਵਾਲ

ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ lncRNA ਦੀ ਘੱਟ ਸਮੱਗਰੀ, ਲੰਮੀ ਲੰਬਾਈ ਅਤੇ ਉੱਚ-ਪੱਧਰੀ ਬਣਤਰ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਅਜਿਹੇ RNA ਵਿੱਚ ਅਕਸਰ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਬਣਤਰ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਸਟੈਮ ਲੂਪ ਜਾਂ ਵਾਲਪਿਨ, ਅਤੇ RT-qPCR ਅਸਫਲ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਜਾਂ ਘੱਟ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਦੀਆਂ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਦਾ ਸ਼ਿਕਾਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

03 LncRNA ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਹੱਲ

ਕੇਂਦਰੀ ਨਿਯਮ ਵਿੱਚ, ਆਰਐਨਏ ਵਾਇਰਸਾਂ ਦੀ ਆਪਣੀ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ਼ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਇੱਕ ਟੈਪਲੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਦੇ ਹੋਏ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਵਿਟਰੋ ਵਿੱਚ ਸੀਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨੂੰ ਸਿੰਥੇਸਾਈਜ਼ ਕਰਨ ਲਈ ਆਰਐਨਏ ਵਾਇਰਸ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਮੁੱਖ ਤੱਤ: ਆਰਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ, ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਸ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਹੋਰ ਭਾਗ।

1.RNA ਟੈਂਪਲੇਟ

ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ 'ਤੇ ਆਰਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਇਸਦੀ ਬਣਤਰ, ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਅਖੰਡਤਾ ਵਿੱਚ ਝਲਕਦਾ ਹੈ।ਐਕਸਟਰੈਕਟ ਕੀਤੇ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਇਕਸਾਰਤਾ ਜਿੰਨੀ ਉੱਚੀ ਹੋਵੇਗੀ, ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਉਨੀ ਹੀ ਉੱਚੀ ਹੋਵੇਗੀ ਅਤੇ ਬਾਅਦ ਦੇ ਗਿਣਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਵਧੇਰੇ ਸਹੀ ਹੋਣਗੇ।ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਆਰਐਨਏ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦੁਆਰਾ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤੇ ਗਏ ਆਰਐਨਏ ਵਿੱਚ ਅਕਸਰ ਅਲਕੋਹਲ ਅਤੇ ਗੁਆਨੀਡੀਨ ਲੂਣ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜਿਸਦਾ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ 'ਤੇ ਇੱਕ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​​​ਰੋਧਕ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

2. ਉਲਟਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ

ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਸ ਦਾ ਪੂਰੇ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮੁੱਖ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੈ।ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਤਾਪਮਾਨ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 42 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਵਾਸਤਵ ਵਿੱਚ, ਉੱਚ-ਪੱਧਰੀ ਆਰਐਨਏ ਢਾਂਚੇ ਨੂੰ ਖੋਲ੍ਹਣ ਲਈ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ ਲਈ ਲੋੜਾਂ ਵੱਧ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ।

3.ਪ੍ਰਾਈਮਰ

ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਵਿੱਚ ਜੀਨ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਪ੍ਰਾਈਮਰ, ਬੇਤਰਤੀਬ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਓਲੀਗੋ ਡੀਟੀ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ lncRNAs ਵਿੱਚ ਪੋਲੀਏ ਟੇਲਾਂ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ, ਅਤੇ ਓਲੀਗੋ ਡੀਟੀ ਨਾਲ ਬੇਤਰਤੀਬ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਮੇਲਣਾ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ।

4. ਹੋਰ ਭਾਗ

ਇਸ ਤੱਥ ਦੇ ਮੱਦੇਨਜ਼ਰ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਡੀਗਰੇਡ ਕਰਨਾ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਆਸਾਨ ਹੈ, ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ RNase ਦੇ ਦਾਖਲੇ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਰੋਕ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਦੀ ਨਿਰਵਿਘਨ ਪ੍ਰਗਤੀ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

FਓਰੇਜੀਨRNA ਟੈਂਪਲੇਟ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, qPCR ਨੂੰ ਉਲਟਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ

ਆਪਣੀ lncRNA ਖੋਜ ਨੂੰ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਕਰੋ

ਜਾਨਵਰ ਕੁੱਲ RNA Iਹੱਲਕਿੱਟ (gDNA ਹਟਾਉਣ ਵਾਲੇ ਕਾਲਮ ਦੇ ਨਾਲ)

ਸੈੱਲ ਕੁੱਲ RNA Iਹੱਲਕਿੱਟ (gDNA ਹਟਾਉਣ ਵਾਲੇ ਕਾਲਮ ਦੇ ਨਾਲ)

Lnc-RT HeroTM I (gDNase ਦੇ ਨਾਲ)(lncRNA ਤੋਂ ਪਹਿਲੇ-ਸਟਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਸੁਪਰ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ)

ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਈਜ਼ੀਟੀਐਮ-ਐਸਵਾਈਬੀਆਰ ਗ੍ਰੀਨ ਆਈ

Aਫਾਇਦੇ ofRNA ਕੱਢਣ:

ਕਿੱਟ ਤੀਜੀ ਪੀੜ੍ਹੀ ਦੀ RNA ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ, DNase ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਕੋਈ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ।

96, 24, 12, ਅਤੇ 6-ਵਧੀਆ ਪਲੇਟ ਸੰਸਕ੍ਰਿਤ ਸੈੱਲਾਂ ਤੋਂ 11 ਮਿੰਟ, ਜੀਡੀਐਨਏ-ਮੁਕਤ, ਉੱਚ-ਸ਼ੁੱਧਤਾ, ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਕੁੱਲ ਸੈੱਲ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਉੱਚ-ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਕੱਢਣਾ।

lncRNA ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਦੇ ਫਾਇਦੇ:

ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਹਟਾਉਣ ਲਈ LncRNA ਲਈ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਿਕਸਤ ਇੱਕ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ।

ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਥਰਮਲ ਸਥਿਰਤਾ ਹੈ ਅਤੇ ਅਜੇ ਵੀ 50 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਵਧੀਆ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਹੈ।

ਉੱਚ GC ਸਮੱਗਰੀ ਅਤੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਸੈਕੰਡਰੀ ਢਾਂਚੇ ਵਾਲੇ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਉੱਚ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਉਲਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਲਾਭof qPCR:

ਹੌਟ ਸਟਾਰਟ ਫੋਰਜੀਨ ਟਾਕ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ, ਉੱਚ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ, ਅਤੇ ਉੱਚ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਹੈ

ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਰੀਅਲ ਪੀਸੀਆਰ ਈਜ਼ੀ ਮਿਕਸ SYBR ਗ੍ਰੀਨ I ਨੂੰ ਉੱਚ ਖੋਜ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਦੀ ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਤੀਬਰਤਾ ਸਮਾਨ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨਾਲੋਂ 3-5 ਗੁਣਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੀਆਂ ਜ਼ਰੂਰਤਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।