ਤੁਸੀਂ ਕਿੰਨਾ ਕੁ ਜਾਣਦੇ ਹੋ

ਇਸ ਬਾਰੇ ਐਨucleic ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ

ਸ਼ੁੱਧ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਅਤੇ ਅੰਤ

ਸਭ ਕੁਝ ਸ਼ੁਰੂ ਵਿਚ ਔਖਾ ਹੈ, ਸ਼ੁੱਧ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਹੈ

ਅਣੂ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ, ਬਾਅਦ ਦੇ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਲਈ

ਸਫਲਤਾ ਜਾਂ ਅਸਫਲਤਾ ਦਾ ਇੱਕ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

ਟਰੇਸ/ਅਲਟਰਾ-ਟਰੇਸ ਯੂਵੀ ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਨੂੰ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਵਿਗਿਆਨਕ ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਦੁਆਰਾ ਪਸੰਦ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਲੂਣ ਆਇਨ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ, ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਆਰਥਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਖੋਜ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਅਸੀਂ ਸਾਰੇ ਜਾਣਦੇ ਹਾਂ, A260 ਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ nucleic acid absorbance OD ਮੁੱਲ, A280 ਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਸੋਖਣ OD ਮੁੱਲ, A230 ਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ ਲੂਣ ਆਇਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਸੋਖਣ OD ਮੁੱਲ, ਇਸਲਈ A260 ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ ਬਦਲ ਸਕਦਾ ਹੈ, A260/280 ਦਾ ਅਰਥ ਹੈ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ, ਪਰ A260/280 ਦਾ ਮਤਲਬ ਹੈ ਖੋਜ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਿਯਮ, A260/260 ਦੁਆਰਾ ਖੋਜ ਕੀਤੀ ਗਈ ਲੂਣ, ਸਿਰਫ ਖੋਜ ਨਿਯਮ ਹੈ। ਮਾਪ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ 'ਤੇ, ਅਤੇ ਇਹ ਹੈ "ਰਵਾਇਤੀ"ਇਹ ਵਿਸ਼ਵਾਸ ਕਰਨਾ ਕਿ ਇਹ ਡੀਐਨਏ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈਇੱਕ ਖਾਸ ਹੱਦ ਤੱਕ.ਇਹ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਉਪਜ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੀ ਪਛਾਣ ਲਈ ਇਕੋਮਾਤਰ ਮਾਪਦੰਡ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਇਹ ਸਿਰਫ ਇੱਕ ਸੰਦਰਭ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ "ਸੋਨੇ ਦਾ ਮਿਆਰ" ਨਹੀਂ ਹੈ।

ਥਰਮੋ ਫਿਸ਼ਰ ND-2000 ਮੈਨੂਅਲ ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਭਰੋਸੇਯੋਗਤਾ 'ਤੇ ਜ਼ੋਰ ਦਿੰਦਾ ਹੈ

ਕਾਰਨ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਮਾਈਕ੍ਰੋ/ਅਲਟਰਾਮਾਈਕਰੋ ਯੂਵੀ ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਨਤੀਜੇ ਸਿਰਫ ਪਾਸੇ ਤੋਂ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਉਪਜ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਕਾਰਕ ਹਨ (ਆਪਟੀਕਲ ਮਾਰਗ, ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਮਾਤਰਾ, ਨਮੂਨਾ ਇਕਾਗਰਤਾ, pH ਮੁੱਲ, ਹੋਰ ਆਇਨ ਜੋ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਮਾਪ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਆਦਿ), OD ਦਾ ਮੁੱਲ ਜ਼ਰੂਰੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਪਿਆ ਨਹੀਂ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਦੇ ਨਾਲ ਹੀ, ਸੋਖਣ ਮੁੱਲ ਨਿਰਧਾਰਨ ਸਮੱਗਰੀ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੀ ਘਾਟ ਕਾਰਨ, ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ DNA, ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ DNA, RNA, dNTPs, ਅਤੇ ਕੁਝ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸਾਰੇ 260nm ਤਰੰਗ-ਲੰਬਾਈ 'ਤੇ ਸਮਾਈ ਦੀਆਂ ਸਿਖਰਾਂ ਰੱਖਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ A260 ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਿਤ ਇਕਾਗਰਤਾ ਜ਼ਰੂਰੀ ਤੌਰ 'ਤੇ RNA ਜਾਂ RNA ਅਸਲੀ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਇਕਾਗਰਤਾ, ਅਤੇ ਇਸਦੀ ਅਖੰਡਤਾ ਅਤੇ ਪਤਨ ਦਾ ਨਿਰਣਾ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ।

ਤਾਂ ਫਿਰ ਸਾਡੇ ਸ਼ੁੱਧ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਦਾ ਨਿਰਣਾ ਕਿਵੇਂ ਕਰੀਏ?ਖੋਜ ਲਈ ਮਾਈਕ੍ਰੋ/ਅਲਟਰਾਮਾਈਕਰੋ ਯੂਵੀ ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਅਖੰਡਤਾ ਨੂੰ ਦ੍ਰਿਸ਼ਟੀਗਤ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਨ ਲਈ, ਅਤੇ ਕੁਝ ਹੱਦ ਤੱਕ ਤਵੱਜੋ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਣ ਲਈ ਐਗਰੋਜ਼ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਵਰਗੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀ ਵੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ, ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੇ ਖੋਜ ਨਤੀਜਿਆਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਉਪਜ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਭਰੋਸੇਯੋਗ ਹੈ।

ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਚਾਰਟ ਦੀ ਤੁਲਨਾ

H1299 ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਕੰਪਨੀ ਏ ਦੀਆਂ ਡੀਐਨਏ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਐਕਸਟਰੈਕਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅਸ਼ੁੱਧਤਾ ਗੰਦਗੀ ਦੇਖੀ ਗਈ ਸੀ, ਜਿਸ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਉੱਚ ਓ.ਡੀ.

(OD ਮਾਪ ਮੁੱਲ ਅਤੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੇਰੋਗ੍ਰਾਮ)

ਮੁਲਾਂਕਣ ਸੂਚਕਾਂਕ

ਕੀ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਉਪਜ ਅਤੇ ਗੁਣਵੱਤਾ ਜਾਂਚ ਲਈ ਕੋਈ "ਗੋਲਡ ਸਟੈਂਡਰਡ" ਹੈ?

ਜਿੱਥੋਂ ਤੱਕ ਅਸੀਂ ਜਾਣਦੇ ਹਾਂ, ਕੋਈ ਸਧਾਰਨ, ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਸਸਤਾ ਤਰੀਕਾ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਭਾਵੇਂ ਇਹ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ, ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ, ਜਾਂ ਪੁੰਜ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟਰੀ ਹੋਵੇ, ਇਹ ਸਾਰੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪਹਿਲੂਆਂ ਤੋਂ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਦੂਜੇ ਦਾ ਹਵਾਲਾ ਦੇ ਕੇ ਨਿਰਣਾ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।

ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਮੁਲਾਂਕਣ ਸੂਚਕਾਂਕ ਹਮੇਸ਼ਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈਫਾਲੋ-ਅੱਪ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ.ਇਹ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਭਰੋਸੇਮੰਦ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦਾਂ ਅਤੇ ਸੀਟੀ ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨਾ, ਅਤੇ ਕ੍ਰਮ ਦੁਆਰਾ ਇੱਕ ਸੰਪੂਰਨ ਕ੍ਰਮ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨਾ ਸਫਲ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣਾ ਹੈ।

ਸੰਖੇਪ ਵਿੱਚ, ਅਨੁਪਾਤ-ਸਿਰਫ ਥਿਊਰੀ ਦੇ ਦ੍ਰਿਸ਼ਟੀਕੋਣ ਨੂੰ "ਚੰਗੇ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਪੈਰਾਮੀਟਰਾਂ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਚੰਗੇ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ" ਦੇ ਦ੍ਰਿਸ਼ਟੀਕੋਣ ਦੁਆਰਾ ਚੁਣੌਤੀ ਦਿੱਤੀ ਜਾਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ!

ਉੱਚ ਡੀਐਨਏ/ਆਰਐਨਏ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਫੋਰਜੀਨ ਡੀਐਨਏ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਵਾਲੀਆਂ ਕਿੱਟਾਂ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਗਈ:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/