ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ, ਮਲਟੀਪਲ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ, ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ, ਉਲਟਾ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ, RT-PCR, qPCR (1)-ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ

ਅਸੀਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਸੰਕਲਪਾਂ, ਕਦਮਾਂ ਅਤੇ ਵੇਰਵਿਆਂ ਨੂੰ ਛਾਂਟ ਦੇਵਾਂਗੇ

Ⅰ. ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ

ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਚੇਨ ਰੀਐਕਸ਼ਨ, ਜਿਸਨੂੰ ਪੀਸੀਆਰ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਇੱਕ ਅਣੂ ਜੈਵਿਕ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਹੈ ਜੋ ਖਾਸ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਵੱਡਾ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਇਸਨੂੰ ਵਿਟਰੋ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਡੀਐਨਏ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਤੀ ਵਜੋਂ ਮੰਨਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ (ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ I) ਦੀ ਖੋਜ 1955 ਦੇ ਸ਼ੁਰੂ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਅਤੇ ਈ. ਕੋਲੀ ਦੇ ਕਲੇਨੋ ਫ੍ਰੈਗਮੈਂਟ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਮੁੱਲ ਅਤੇ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਹੈ, ਦੀ ਖੋਜ 1970 ਦੇ ਦਹਾਕੇ ਦੇ ਸ਼ੁਰੂ ਵਿੱਚ ਡਾ. ਐਚ. ਕਲੇਨੋ ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਪਰ ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਬਰਦਾਸ਼ਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ, ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਇਸ ਨੂੰ ਡੀਜਨਰੇਟ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਇਹ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੇ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਡੀਜਨਰੇਟ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਅੱਜ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ (ਜਿਸਨੂੰ ਟਾਕ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ), ਨੂੰ 1976 ਵਿੱਚ ਥਰਮਸ ਐਕਵਾਟਿਕਸ, ਇੱਕ ਗਰਮ ਬਸੰਤ ਦੇ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਸਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਇਹ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਦਾ ਵਿਰੋਧ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇੱਕ ਆਦਰਸ਼ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਹੈ, ਪਰ ਇਹ 1980 ਦੇ ਦਹਾਕੇ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਮੂਲ ਮੁੱਢਲੇ ਪ੍ਰੋਟੋਟਾਈਪ ਦੀ ਮੂਲ ਧਾਰਨਾ ਜੀਨ ਦੀ ਮੁਰੰਮਤ ਅਤੇ ਨਕਲ ਦੇ ਸਮਾਨ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ 1971 ਵਿੱਚ ਡਾ. ਕੇਜੇਲ ਕਲੇਪ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਉਸਨੇ ਪਹਿਲੀ ਸਧਾਰਨ ਅਤੇ ਛੋਟੀ ਮਿਆਦ ਦੇ ਜੀਨ ਕਾਪੀ (ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਪਹਿਲੇ ਦੋ ਚੱਕਰ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮਾਂ ਦੇ ਸਮਾਨ) ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਕੀਤੀ।ਅੱਜ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਪੀਸੀਆਰ 1983 ਵਿੱਚ ਡਾ. ਕੈਰੀ ਬੀ. ਮੁਲਿਸ ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਡਾ. ਮੁਲਿਸ ਨੇ ਉਸ ਸਾਲ ਪੀਈ ਕੰਪਨੀਆਂ ਦੀ ਸੇਵਾ ਕੀਤੀ, ਇਸਲਈ ਪੀਸੀਆਰ ਉਦਯੋਗ ਵਿੱਚ ਪੀਈ ਦਾ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਦਰਜਾ ਹੈ।ਡਾ. ਮੁਲਿਸ ਨੇ ਅਧਿਕਾਰਤ ਤੌਰ 'ਤੇ 1985 ਵਿੱਚ ਸਾਈਕੀ ਅਤੇ ਹੋਰਾਂ ਨਾਲ ਪਹਿਲਾ ਸੰਬੰਧਿਤ ਪੇਪਰ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ। ਉਦੋਂ ਤੋਂ, ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਹਜ਼ਾਰਾਂ ਮੀਲ ਪ੍ਰਤੀ ਦਿਨ ਹੈ, ਅਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਪੇਪਰਾਂ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨੂੰ ਹੋਰ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਖੋਜ ਤਰੀਕਿਆਂ ਨੂੰ ਬੇਲੋੜਾ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਕਿਹਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜੈਵਿਕ ਵਿਗਿਆਨਕ ਖੋਜ ਅਤੇ ਕਲੀਨਿਕਲ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਖੋਜ ਦੀ ਸਭ ਤੋਂ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਬਣ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਮੁਲਿਸ ਨੇ ਰਸਾਇਣ ਵਿਗਿਆਨ ਵਿੱਚ 1993 ਦਾ ਨੋਬਲ ਪੁਰਸਕਾਰ ਵੀ ਜਿੱਤਿਆ ਸੀ।

ਪੀ.ਸੀ.ਆਰਅਸੂਲ

ਪੀਸੀਆਰ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦਾ ਮੂਲ ਸਿਧਾਂਤ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਕੁਦਰਤੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਤੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੇ ਸਮਾਨ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ ਜੋ ਟੀਚੇ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਦੇ ਦੋਵਾਂ ਸਿਰਿਆਂ ਲਈ ਪੂਰਕ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ-ਐਨੀਲਿੰਗ-ਵਿਸਤਾਰ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਤਿੰਨ ਬੁਨਿਆਦੀ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮਾਂ ਦੇ ਪੜਾਵਾਂ ਤੋਂ ਬਣਿਆ ਹੈ: ①ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ ਦਾ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ: ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਇੱਕ ਨਿਸ਼ਚਤ ਸਮੇਂ ਲਈ ਲਗਭਗ 93 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤੱਕ ਗਰਮ ਕੀਤੇ ਜਾਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਏ ਗਏ ਦੋਹਰੇ-ਚੇਨ ਡੀਐਨਏ ਲਈ ਦੋਹਰਾ ਡੀਐਨਏ ਘੋਲ, ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੇ ਨਾਲ ਇਸ ਨੂੰ ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ ਡੀਐਨਏ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਅਗਲੇ ਦੌਰ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ.②ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਐਨੀਲਿੰਗ (ਕੰਪਾਊਂਡ): ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਗਰਮ ਹੋਣ ਅਤੇ ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ ਚੇਨ ਵਿੱਚ ਡੀਜਨਰੇਟ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਤਾਪਮਾਨ ਲਗਭਗ 55 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤੱਕ ਘੱਟ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ ਸਿੰਗਲ-ਚੇਨ ਦਾ ਪੂਰਕ ਕ੍ਰਮ।③ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦਾ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ: ਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ-ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਬਾਈਡਿੰਗ TaqDNA ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਕਿਰਿਆ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ, ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਕੱਚੇ ਮਾਲ ਵਜੋਂ dNTP ਦੇ ਨਾਲ।ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਤੀ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਨੂੰ ਬਣਾਈ ਰੱਖੋ, ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਅਰਧ-ਰਿਜ਼ਰਵਡ ਕਾਪੀ ਚੇਨ ਨੂੰ ਸਿੰਥੇਸਾਈਜ਼ ਕਰੋ ਜੋ ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ ਚੇਨ ਨੂੰ ਪੂਰਕ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਦੁਹਰਾਓ ਚੱਕਰ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ-ਐਨੀਲਿੰਗ-ਐਕਸਟੇਂਸ਼ਨ ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਧੇਰੇ "ਅਰਧ-ਰਿਜ਼ਰਵਡ ਕਾਪੀ ਚੇਨ" ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ, ਅਤੇ ਇਹ ਨਵੀਂ ਚੇਨ ਦੁਬਾਰਾ ਉਪਲਬਧ ਅਗਲੇ ਚੱਕਰ ਲਈ ਇੱਕ ਟੈਂਪਲੇਟ ਬਣ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਲੂਪ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਵਿੱਚ 2-4 ਮਿੰਟ ਲੱਗਦੇ ਹਨ, ਟੀਚੇ ਵਾਲੇ ਜੀਨ ਨੂੰ 2-3 ਘੰਟਿਆਂ ਵਿੱਚ ਕਈ ਮਿਲੀਅਨ ਵਾਰ ਵਧਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਮਿਆਰੀਪੀ.ਸੀ.ਆਰਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਸਿਸਟਮ

ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਪੰਜ ਤੱਤ

PCR ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੰਜ ਕਿਸਮ ਦੇ ਪਦਾਰਥ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਰਥਾਤ ਪ੍ਰਾਈਮਰ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ, dNTP, ਟੈਂਪਲੇਟ ਅਤੇ ਬਫਰ (Mg2+ ਲੋੜੀਂਦਾ ਹੈ)।[ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ]

ਮਿਆਰੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਤਿੰਨ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਗਿਆ ਹੈ

1. ਡੀਐਨਏ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ (90°C-96°C): ਥਰਮਲ ਐਕਸ਼ਨ ਅਧੀਨ ਦੋਹਰੇ-ਚੇਨ ਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟਸ, ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਬਾਂਡ ਟੁੱਟਦੇ ਹਨ, ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ-ਚੇਨ ਡੀਐਨਏ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ।

2. ਐਨੀਲਿੰਗ (25℃ -65℃): ਸਿਸਟਮ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ ਘਟਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਪਰਾਈਮਰ ਨੂੰ ਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਇੱਕ ਸਥਾਨਕ ਦੋਹਰੀ-ਚੇਨ ਬਣ ਸਕੇ।

3. ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ (70℃ -75℃): Taq ਐਨਜ਼ਾਈਮ (ਲਗਭਗ 72°C, ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਗਤੀਵਿਧੀ) ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਦੇ ਤਹਿਤ, dNTP ਨੂੰ ਕੱਚੇ ਮਾਲ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੇ 5′ ਸਿਰੇ ਤੋਂ 3′ ਸਿਰੇ ਤੱਕ ਫੈਲਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਇੱਕ ਦੂਜੇ DNA ਚੇਨ ਦੇ ਪੂਰਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।

ਹਰੇਕ ਚੱਕਰ ਡੀਐਨਏ ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ ਦੁੱਗਣਾ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਡੀਨੇਚਰਡ, ਐਨੀਲਡ ਅਤੇ ਵਧਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ, ਛੋਟੇ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੇਤਰ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਕੁਝ ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਦੁਹਰਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਭਾਵੇਂ ਕਿ ਟਾਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਨੁਕੂਲ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਇਸਨੂੰ ਦੋ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਬਦਲਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਯਾਨੀ, ਐਨੀਲਿੰਗ ਅਤੇ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ 60°C-65°C 'ਤੇ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਲਿਫਟਿੰਗ ਅਤੇ ਕੂਲਿੰਗ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਅਤੇ ਜਵਾਬ ਦੀ ਗਤੀ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ.

ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ

● ਉੱਚ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ

ਪੀਸੀਆਰ ਜਵਾਬ ਦੇ ਖਾਸ ਨਿਰਣਾਇਕ ਕਾਰਕ ਹਨ: ①ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਡੀਐਨਏ ਦਾ ਖਾਸ ਸੁਮੇਲ।②ਬੇਸ ਪੇਅਰਿੰਗ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ।③ TaqDNA ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਸਿੰਥੇਸਿਸ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਵਫ਼ਾਦਾਰੀ।④ ਟੀਚਾ ਜੀਨ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਰੂੜੀਵਾਦੀਤਾ।

ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਦਾ ਸਹੀ ਸੁਮੇਲ ਕੁੰਜੀ ਹੈ।ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੀ ਬਾਈਡਿੰਗ ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਚੇਨ ਦਾ ਵਿਸਤਾਰ ਅਲਕਲੀਨ ਬੇਸ ਮੈਚਿੰਗ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ।ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਵਫ਼ਾਦਾਰੀ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ ਟੈਂਪਲੇਟ ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਬਾਈਡਿੰਗ (ਮਿਸ਼ਤੇਕ) ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੇ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਪ੍ਰਤੀਰੋਧ ਨੂੰ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਸੁਮੇਲ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਬਹੁਤ ਵਧ ਗਈ ਹੈ.ਕਲਿੱਪ ਉੱਚ ਪੱਧਰੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਕਾਇਮ ਰੱਖ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਉੱਚ ਰੂੜੀਵਾਦੀਤਾ ਅਤੇ ਉੱਚ ਰੂੜੀਵਾਦੀਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਇੱਕ ਟੀਚਾ ਜੈਨੇਟਿਕ ਖੇਤਰ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰਕੇ, ਇਸਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਵੱਧ ਹੈ।

● ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ

ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਉਤਪਾਦਨ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਸੂਚਕਾਂਕ ਦੁਆਰਾ ਵਧਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਮਾਈਕ੍ਰੋਗ੍ਰਾਮ (μg= -6) ਦੇ ਪੱਧਰ ਤੱਕ ਮਾਈਕ੍ਰੋਕੰਟਰੋਲਰ ਦੇ ਪੱਧਰ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ ਪਿਕਰ (PG=10-12) ਦੇ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦਾ ਵਿਸਤਾਰ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।1 ਮਿਲੀਅਨ ਸੈੱਲਾਂ ਤੋਂ ਇੱਕ ਟੀਚਾ ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ;ਵਾਇਰਸਾਂ ਦੀ ਖੋਜ ਵਿੱਚ, ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ 3 ਆਰਐਫਯੂ ਤੱਕ ਪਹੁੰਚ ਸਕਦੀ ਹੈ (ਖਾਲੀ ਥਾਂਵਾਂ ਤੋਂ ਬਣੇ ਯੂਨਿਟ);ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਵਿਗਿਆਨ ਵਿੱਚ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਖੋਜ ਦਰ 3 ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਹੈ।

● ਸਰਲ ਅਤੇ ਤੇਜ਼

ਪੀਸੀਆਰ ਰਿਫਲਿਕਸ਼ਨ ਇੱਕ ਉੱਚ-ਤਾਪਮਾਨ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਇੱਕ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਹੱਲ ਜੋੜਦਾ ਹੈ, ਯਾਨੀ ਡੀਐਨਏ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਘੋਲ ਅਤੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਹਾਉਣ ਵਾਲੇ ਘੜੇ ਉੱਤੇ ਇੱਕ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ-ਐਨੀਲ-ਐਕਸਟੇਂਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ।ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ 2 ਤੋਂ 4 ਘੰਟਿਆਂ ਵਿੱਚ ਪੂਰੀ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਵਧੇ ਹੋਏ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦਾ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਿਜਲਈ ਤਲਵਾਰ ਦੁਆਰਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਆਈਸੋਟੋਪ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨਹੀਂ ਕਰਨੀ ਪੈਂਦੀ, ਕੋਈ ਰੇਡੀਓ ਐਕਟਿਵ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ, ਅਤੇ ਆਸਾਨ ਪ੍ਰਚਾਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

● ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਘੱਟ ਹੈ

ਵਾਇਰਸ ਜਾਂ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਅਤੇ ਕਲਚਰ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੀ ਕੋਈ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਡੀਐਨਏ ਕੱਚੇ ਉਤਪਾਦਾਂ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਐਂਪਲੀਫਾਇਰ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਡੀਐਨਏ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਖੋਜ ਨੂੰ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕਲੀਨਿਕਲ ਨਮੂਨੇ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਖੂਨ, ਸਰੀਰ ਦੇ ਤਰਲ, ਖੰਘ ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਤਰਲ, ਵਾਲ, ਸੈੱਲ ਅਤੇ ਜੀਵਤ ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਪੀ.ਸੀ.ਆਰਆਮ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ

● ਗਲਤ ਨੈਗੇਟਿਵ, ਕੋਈ ਐਂਪਲੀਫਾਈਡ ਬੈਂਡ ਨਹੀਂ

ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਮੁੱਖ ਪੜਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ: ① ਟੈਂਪਲੇਟ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਤਿਆਰੀ, ② ਗੁਣਵੱਤਾ ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ, ③ ਪਾਚਕ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ④ ਪੀਸੀਆਰ ਚੱਕਰ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ।ਕਾਰਨ ਲੱਭਣ ਲਈ ਉਪਰੋਕਤ ਲਿੰਕਾਂ ਦਾ ਵੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।

ਟੈਮਪਲੇਟ: ① ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਿੱਚ ਫੁਟਕਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ② ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਿੱਚ ਟਾਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਨਿਹਿਬਟਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ③ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਖਤਮ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ, ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਕ੍ਰੋਮੋਸੋਮ ਵਿੱਚ ਸਮੂਹ ਪ੍ਰੋਟੀਨ।⑤ ਡਿਮਿਨਰ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਜਦੋਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਚੰਗੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਕੋਈ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਬੈਂਡ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ, ਜੋ ਕਿ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਪਾਚਕ ਇਲਾਜ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ।ਟੈਂਪਲੇਟ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਕੁਝ ਗਲਤ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਇੱਕ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਅਤੇ ਸਥਿਰ ਪਾਚਨ ਹੱਲ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ, ਇਸਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਮਨਮਾਨੇ ਢੰਗ ਨਾਲ ਬਦਲਿਆ ਨਹੀਂ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ।

ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਨਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ: ਇੱਕ ਨਵਾਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਜਾਂ ਪੁਰਾਣੇ ਅਤੇ ਨਵੇਂ ਦੋਵੇਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ ਤਾਂ ਜੋ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ ਕਿ ਕੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਖਤਮ ਹੋ ਗਈ ਹੈ ਜਾਂ ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਗਲਤ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਨਿਕਲਦੇ ਹਨ।ਇਹ ਨੋਟ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਕਿ ਟਾਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਜਾਂ ਐਥੀਡੀਅਮ ਬਰੋਮਾਈਡ ਨੂੰ ਕਈ ਵਾਰ ਭੁੱਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ.

ਪ੍ਰਾਈਮਰ: ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ, ਅਤੇ ਕੀ ਦੋ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਸਮਮਿਤੀ ਹੈ।ਇਹ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਅਸਫਲਤਾ ਦਾ ਇੱਕ ਆਮ ਕਾਰਨ ਹੈ ਜਾਂ ਵਧ ਰਿਹਾ ਬੈਂਡ ਆਦਰਸ਼ਕ ਨਹੀਂ ਹੈ ਅਤੇ ਫੈਲਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ।ਕੁਝ ਬੈਚ ਨੰਬਰਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਿੱਚ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਹਨ।ਦੋ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਅਤੇ ਘੱਟ ਤਵੱਜੋ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਘੱਟ-ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਅਸਮਮਿਤ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਵਿਰੋਧੀ ਉਪਾਅ ਹਨ: ① ਇਕਾਈਆਂ ਨੂੰ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਵਧੀਆ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਚੁਣੋ।② ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਨਾ ਸਿਰਫ਼ OD ਮੁੱਲ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਸਗੋਂ ਅਗਰ ਸ਼ੂਗਰ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੇ ਮੂਲ ਤਰਲ ਵੱਲ ਵੀ ਧਿਆਨ ਦਿੰਦੀ ਹੈ।ਇੱਕ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਸਟ੍ਰਿਪ ਜ਼ੋਨ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਦੋ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਚਮਕ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਕਸਾਰ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ।ਬੈਲਟ, ਪੀਸੀਆਰ ਇਸ ਸਮੇਂ ਫੇਲ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਸਿੰਥੇਸਿਸ ਯੂਨਿਟ ਨਾਲ ਹੱਲ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਜੇ ਇੱਕ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਉੱਚਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਚਮਕ ਘੱਟ ਹੈ, ਅਤੇ ਪਤਲਾ ਹੋਣ 'ਤੇ ਇਸਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਸੰਤੁਲਿਤ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ।③ ਫਰਿੱਜ ਦੇ ਮਲਟੀਪਲ ਫ੍ਰੀਜ਼ਿੰਗ ਜਾਂ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੇ ਫਰਿੱਜ ਵਾਲੇ ਹਿੱਸਿਆਂ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦਾ ਭੁਗਤਾਨ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਉੱਚ ਸੰਘਣਾਤਾ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਖਰਾਬ ਅਤੇ ਵਿਗੜ ਜਾਵੇਗਾ।④ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦਾ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਗੈਰ-ਵਾਜਬ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਡੀ ਕਲੱਸਟਰ ਬਣਦਾ ਹੈ।

Mg2+ ਇਕਾਗਰਤਾ: Mg2+ ਆਇਨ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦਾ PCR ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ 'ਤੇ ਬਹੁਤ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪੈਂਦਾ ਹੈ।ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਇਕਾਗਰਤਾ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਦੇ ਉਲਟ ਲਿੰਗ ਨੂੰ ਘਟਾ ਸਕਦੀ ਹੈ.ਜੇਕਰ ਇਕਾਗਰਤਾ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਹੈ, ਤਾਂ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਆਉਟਪੁੱਟ ਐਕਸਪੇਂਸ਼ਨ ਬੈਂਡ ਦੇ ਬਿਨਾਂ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਅਸਫਲਤਾ ਵੀ ਬਣਾ ਦੇਵੇਗੀ।

ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਾਲੀਅਮ ਦੀ ਤਬਦੀਲੀ: ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਵਿੱਚ ਵਰਤੀ ਗਈ ਮਾਤਰਾ 20ul, 30ul, ਅਤੇ 50ul ਜਾਂ 100uL ਹੈ, ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ ਦੀ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿਗਿਆਨਕ ਖੋਜ ਅਤੇ ਕਲੀਨਿਕਲ ਟੈਸਟਿੰਗ ਦੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਉਦੇਸ਼ਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।ਛੋਟੇ ਵਾਲੀਅਮ ਜਿਵੇਂ ਕਿ 20ul ਬਣਾਉਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਆਕਾਰ ਬਣਾਉਣ ਵੇਲੇ ਕੋਰਡ ਕੰਡੀਸ਼ਨ ਬਣਾਉਣਾ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹੈ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇਹ ਫੇਲ ਹੋ ਜਾਵੇਗਾ।

ਭੌਤਿਕ ਕਾਰਨ: ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਲਈ ਪਰਿਵਰਤਨ ਬਹੁਤ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ।ਜੇ ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ ਘੱਟ ਹੈ, ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ ਦਾ ਸਮਾਂ ਛੋਟਾ ਹੈ, ਇਹ ਝੂਠੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਹੋਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ;ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਖਾਸ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਦੇ ਸੁਮੇਲ ਨੂੰ ਬਹੁਤ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਕਈ ਵਾਰ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ ਜਾਂ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਕੁੱਕਰ ਵਿੱਚ ਪਰਿਵਰਤਨਸ਼ੀਲਤਾ, ਐਨੀਲਿੰਗ ਅਤੇ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਤਾਪਮਾਨ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਮਿਆਰੀ ਥਰਮਾਮੀਟਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨੀ ਪੈਂਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਅਸਫਲਤਾ ਦਾ ਇੱਕ ਕਾਰਨ ਹੈ।

ਟਾਰਗੇਟ ਕ੍ਰਮ ਵੇਰੀਐਂਟ: ਜੇਕਰ ਟੀਚਾ ਕ੍ਰਮ ਵਾਪਰਦਾ ਹੈ, ਇੱਕ ਪਰਿਵਰਤਨ ਜਾਂ ਮਿਟਾਉਣਾ, ਪ੍ਰੋਟੋਟਾਈਪ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੇ ਸੁਮੇਲ ਨੂੰ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਾਂ ਇੱਕ ਟੀਚਾ ਕ੍ਰਮ ਦੀ ਘਾਟ ਕਾਰਨ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਪੂਰਕ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਗੁਆ ਦੇਣਗੇ, ਅਤੇ ਇਸਦਾ PCR ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸਫਲ ਨਹੀਂ ਹੋਵੇਗਾ।

● ਗਲਤ ਸਕਾਰਾਤਮਕ

ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਬੈਂਡ ਟੀਚੇ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਬੈਂਡ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਕਈ ਵਾਰ ਇਸਦਾ ਬੈਂਡ ਵਧੇਰੇ ਸਾਫ਼ ਅਤੇ ਉੱਚਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਢੁਕਵਾਂ ਨਹੀਂ ਹੈ: ਚੁਣੇ ਹੋਏ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਕ੍ਰਮ ਅਤੇ ਗੈਰ-ਉਦੇਸ਼ ਭਰਪੂਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕ੍ਰਮ ਸਮਰੂਪ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਇਸਲਈ ਜਦੋਂ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ, ਐਂਪਲੀਫਾਈਡ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਗੈਰ-ਉਦੇਸ਼ਪੂਰਨ ਕ੍ਰਮ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਟੀਚਾ ਕ੍ਰਮ ਬਹੁਤ ਛੋਟਾ ਹੈ ਜਾਂ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਬਹੁਤ ਛੋਟਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਗਲਤ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੋਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ।ਮੁੜ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ।

ਟੀਚੇ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਜਾਂ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦਾ ਅੰਤਰ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ: ਇਸ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਦੇ ਦੋ ਕਾਰਨ ਹਨ: ਪਹਿਲਾ, ਪੂਰੇ ਜੀਨੋਮ ਜਾਂ ਵੱਡੇ ਹਿੱਸਿਆਂ ਦਾ ਅੰਤਰ-ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਝੂਠੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਕਿਸਮ ਦੇ ਝੂਠੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨੂੰ ਨਿਮਨਲਿਖਤ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੁਆਰਾ ਹੱਲ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ: ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਬੰਦੂਕ ਵਿੱਚ ਸਾਹ ਲੈਣ ਜਾਂ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗਲ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚੋਂ ਬਾਹਰ ਨਿਕਲਣ ਤੋਂ ਟਾਰਗੇਟ ਕ੍ਰਮ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਕਾਰਵਾਈ ਦੌਰਾਨ ਸਾਵਧਾਨ ਅਤੇ ਨਰਮ ਰਹੋ।ਪਾਚਕ ਅਤੇ ਪਦਾਰਥਾਂ ਨੂੰ ਛੱਡ ਕੇ ਜੋ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਦਾ ਸਾਮ੍ਹਣਾ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦੇ, ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਜਾਂ ਉਪਕਰਣਾਂ ਨੂੰ ਉੱਚ ਦਬਾਅ ਨਾਲ ਰੋਗਾਣੂ ਮੁਕਤ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਗਲ ਪਾਈਪਾਂ ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਵਰਤੇ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।ਜਦੋਂ ਲੋੜ ਹੋਵੇ, ਨਮੂਨੇ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਮੌਜੂਦਾ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਨੂੰ ਨਸ਼ਟ ਕਰਨ ਲਈ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਟਿਊਬ ਅਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟ ਅਲਟਰਾਵਾਇਲਟ ਕਿਰਨਾਂ ਦੇ ਸੰਪਰਕ ਵਿੱਚ ਆਉਂਦੇ ਹਨ।ਦੂਜਾ, ਹਵਾ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਵਿੱਚ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜੇ.ਇਹ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜੇ ਟੀਚੇ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਤੋਂ ਛੋਟੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਇਹਨਾਂ ਦੀ ਕੁਝ ਸਮਰੂਪਤਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਇਹ ਇੱਕ ਦੂਜੇ ਨਾਲ ਵੰਡਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ.ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਕ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦਾ ਵਿਸਤਾਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਗਲਤ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਉਤਪਾਦਨ ਹੋਵੇਗਾ.ਇਸਦੀ ਵਰਤੋਂ Nest PCR ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਜਾਂ ਖ਼ਤਮ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।

● ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਬੈਂਡ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦਾ ਹੈ

ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦਿਖਾਈ ਦੇਣ ਵਾਲੇ ਬੈਂਡ ਸੰਭਾਵਿਤ ਆਕਾਰ, ਜਾਂ ਵੱਡੇ ਜਾਂ ਛੋਟੇ, ਜਾਂ ਉਸੇ ਸਮੇਂ, ਜਾਂ ਉਸੇ ਸਮੇਂ, ਖਾਸ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਬੈਂਡ ਅਤੇ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਬੈਂਡਾਂ ਨਾਲ ਅਸੰਗਤ ਹਨ।ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਬੈਂਡਾਂ ਦਾ ਉਭਾਰ ਹੈ: ਪਹਿਲਾਂ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਟੀਚੇ ਦੇ ਕ੍ਰਮ ਦੇ ਅਧੂਰੇ ਪੂਰਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜਾਂ ਡਾਇ ਕਲੱਸਟਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦਾ ਪੋਲੀਮਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਦੂਜਾ ਇਹ ਹੈ ਕਿ MG2+ ਆਇਨਾਂ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ, ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਹੈ, ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਚੱਕਰਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਸੰਬੰਧਿਤ ਹੈ।ਦੂਜਾ, ਪਾਚਕ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਅਤੇ ਮਾਤਰਾ.ਅਕਸਰ, ਕੁਝ ਸਰੋਤਾਂ ਦੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਬੈਂਡਾਂ ਦਾ ਸ਼ਿਕਾਰ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਦੂਜੇ ਸਰੋਤ ਦੇ ਪਾਚਕ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਕਈ ਵਾਰ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ ਦਾ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਪ੍ਰਸਾਰ ਵੀ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਜਵਾਬੀ ਉਪਾਅ ਹਨ: ਜੇਕਰ ਲੋੜ ਹੋਵੇ ਤਾਂ ਆਕਰਸ਼ਕਾਂ ਨੂੰ ਮੁੜ-ਡਿਜ਼ਾਇਨ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇ।ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਘਟਾਓ ਜਾਂ ਕਿਸੇ ਹੋਰ ਸਰੋਤ ਦੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਬਦਲੋ।ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਘਟਾਓ, ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਵਧਾਓ, ਅਤੇ ਚੱਕਰਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਘਟਾਓ।ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਵਧਾਓ ਜਾਂ ਦੋ ਤਾਪਮਾਨ ਬਿੰਦੂ ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ (93°C ਡੀਜਨਰੇਸ਼ਨ, ਐਨੀਲਿੰਗ ਅਤੇ ਲਗਭਗ 65°C 'ਤੇ ਫੈਲਾਉਣਾ)।

● ਫਲੈਕੀ ਟੋ ਜਾਂ ਸਮੀਅਰ ਟੇਪ ਦਿਖਾਈ ਦੇਣਾ

ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕਈ ਵਾਰ ਲਾਗੂ ਜਾਂ ਸ਼ੈੱਲ ਜਾਂ ਕਾਰਪੇਟ ਵਰਗੀ ਬੈਲਟ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦਾ ਹੈ।ਕਾਰਨ ਕਰਕੇ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਮਾਤਰਾ ਜਾਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਮਾੜੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਦੇ ਕਾਰਨ, dNTP ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ, Mg2+ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ, ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਹੈ, ਅਤੇ ਚੱਕਰਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ।ਵਿਰੋਧੀ ਉਪਾਅ ਹਨ: ① ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਘਟਾਓ, ਜਾਂ ਕਿਸੇ ਹੋਰ ਸਰੋਤ ਦੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਬਦਲੋ।②dNTP ਦੀ ਤਵੱਜੋ ਨੂੰ ਘਟਾਓ ③ Mg2+ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਘਟਾਓ।④ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਵਧਾਓ ਅਤੇ ਚੱਕਰਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਘਟਾਓ।

ਸੰਬੰਧਿਤ ਉਤਪਾਦ

PCR Heroᵀᴹ (ਡਾਈ ਨਾਲ)

◮ ਉੱਚ ਵਫ਼ਾਦਾਰੀ: ਸਾਧਾਰਨ ਟਾਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਨਾਲੋਂ 6 ਗੁਣਾ;

◮ ਤੇਜ਼ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸਪੀਡ

◮ ਹੋਰ ਟੈਮਪਲੇਟ ਅਨੁਕੂਲਤਾ

◮ ਉੱਚ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ

◮ ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੀ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ ਵਧੇਰੇ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​ਹੁੰਦੀ ਹੈ: 90% ਤੋਂ ਵੱਧ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਕਾਇਮ ਰੱਖਦੇ ਹੋਏ, ਇੱਕ ਹਫ਼ਤੇ ਲਈ 37°C 'ਤੇ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ;

◮ ਇਸ ਵਿੱਚ 5'→3' ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਤੇ 5'→3' ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਹੈ, ਬਿਨਾਂ 3'→5' ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ।

PCR Easyᴹ (ਰਾਈ ਨਾਲ)

ਵਿਲੱਖਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਅਤੇ ਉੱਚ-ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਤਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਉੱਚ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਕੁਸ਼ਲਤਾ, ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ।

RT-qPCR Easyᵀᴹ (ਇੱਕ ਕਦਮ)-SYBR ਗ੍ਰੀਨ ਆਈ

◮ ਇੱਕ-ਪੜਾਅ ਵਾਲੀ ਕਿੱਟ ਇੱਕੋ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਅਤੇ qPCR ਦੋ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ, ਸਿਰਫ਼ ਟੈਂਪਲੇਟ RNA, ਖਾਸ PCR ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ RNase-ਮੁਕਤ ddH ਜੋੜਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।₂O.

◮ ਕਿੱਟ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਵਾਇਰਲ RNA ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ ਜਾਂ RNA ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।

◮ ਕਿੱਟ ਇੱਕ ਵਿਲੱਖਣ ਫੋਰਜੀਨ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਰੀਏਜੈਂਟ ਅਤੇ ਫੋਰਜੀਨ ਹੌਟਸਟਾਰ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ ਜੋ ਇੱਕ ਵਿਲੱਖਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੇ ਨਾਲ ਮਿਲਾ ਕੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਸੁਧਾਰਦੀ ਹੈ।

◮ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਉੱਚ ਖੋਜ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ, ਮਜ਼ਬੂਤ ​​ਥਰਮਲ ਸਥਿਰਤਾ, ਅਤੇ ਬਿਹਤਰ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।

◮ RT-qPCR ਆਸਾਨ^TM(ਇੱਕ ਕਦਮ)-SYBR ਗ੍ਰੀਨ I ਕਿੱਟ ROX ਅੰਦਰੂਨੀ ਸੰਦਰਭ ਰੰਗ ਦੇ ਨਾਲ ਆਉਂਦੀ ਹੈ, ਜਿਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਖੂਹਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਸਿਗਨਲ ਬੈਕਗ੍ਰਾਊਂਡ ਅਤੇ ਸਿਗਨਲ ਗਲਤੀਆਂ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਗਾਹਕਾਂ ਲਈ ਮਾਤਰਾਤਮਕ PCR ਯੰਤਰਾਂ ਦੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਮਾਡਲਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤਣ ਲਈ ਸੁਵਿਧਾਜਨਕ ਹੈ।

RT ਆਸਾਨ^TMII (ਇਸ ਲਈ ਮਾਸਟਰ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ ਲਈ ਪਹਿਲੀ-ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ.)

-ਜੀਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲ ਯੋਗਤਾ, ਜੋ 2 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਿੱਚ ਜੀਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਹਟਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।

-ਕੁਸ਼ਲ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ, ਪਹਿਲੇ ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਿਰਫ 15 ਮਿੰਟ ਲੱਗਦੇ ਹਨ।

-ਕੰਪਲੈਕਸ ਟੈਂਪਲੇਟਸ: ਉੱਚ GC ਸਮੱਗਰੀ ਅਤੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਸੈਕੰਡਰੀ ਢਾਂਚੇ ਵਾਲੇ ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਨੂੰ ਵੀ ਉੱਚ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਉਲਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

-ਉੱਚ-ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ, ਪੀਜੀ-ਪੱਧਰ ਦੇ ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਵੀ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਸੀਡੀਐਨਏ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।

-ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਥਰਮਲ ਸਥਿਰਤਾ ਹੈ, ਅਨੁਕੂਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 42 ℃ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸ ਵਿੱਚ ਅਜੇ ਵੀ 50 ℃ ਤੇ ਵਧੀਆ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਹੈ।