ਸੰਖੇਪ ਜਾਣਕਾਰੀ
ਟ੍ਰਾਂਸਜੇਨਿਕ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਪਛਾਣ
ਟੈਕਸਟ/ਟੋਂਗ ਯੂਚੇਂਗ
ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਕਾਰਵਾਈ/ਹਾਨ ਯਿੰਗ
ਸੰਪਾਦਕ/ਵੇਨ ਯੂਜੁਨ
ਸ਼ਬਦ/1600+
ਸੁਝਾਇਆ ਗਿਆ ਪੜ੍ਹਨ ਦਾ ਸਮਾਂ/8-10 ਮਿੰਟ
ਟ੍ਰਾਂਸਜੇਨਿਕ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਪਛਾਣ
ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਨਵੇਂ ਵਿਅਕਤੀ ਵਜੋਂ, ਘੱਟ ਪਰਿਵਰਤਨ ਦਰ ਵਾਲੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਝੁੰਡ ਵਿੱਚੋਂ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨਾ ਚੰਗਾ ਕੰਮ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਸਭ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਇੱਕ-ਇੱਕ ਕਰਕੇ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਵਿੱਚ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚੋਂ ਕੱਢਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਪੀਸੀਆਰ ਦੁਆਰਾ ਵਿਦੇਸ਼ੀ ਜੀਨਾਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਇਆ ਜਾਵੇਗਾ।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਨਤੀਜੇ ਅਕਸਰ ਖਾਲੀ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕਦੇ-ਕਦਾਈਂ ਕੁਝ ਆਈਟਮਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਬੈਂਡ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਇਹ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨਾ ਅਸੰਭਵ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਕਿ ਕੀ ਖੁੰਝੀਆਂ ਖੋਜਾਂ ਜਾਂ ਗਲਤ ਖੋਜਾਂ ਹਨ।.ਕੀ ਅਜਿਹੀ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਅਤੇ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦਾ ਸਾਹਮਣਾ ਕਰਨਾ ਬਹੁਤ ਲਾਚਾਰ ਹੈ?ਚਿੰਤਾ ਨਾ ਕਰੋ, ਭਰਾ ਤੁਹਾਨੂੰ ਸਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਟ੍ਰਾਂਸਜੇਨਿਕ ਪੌਜ਼ਟਿਵ ਪੌਦਿਆਂ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਕਿਵੇਂ ਬਾਹਰ ਕੱਢਿਆ ਜਾਵੇ।
ਕਦਮ 1: ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਖੋਜ ਪ੍ਰਾਈਮਰ
ਟੈਸਟ ਕੀਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਖੋਜੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਅਤੇ ਐਕਸੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਲਈ ਜੀਨ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਪ੍ਰਤੀਨਿਧੀ 100-500bp ਕ੍ਰਮ ਚੁਣੋ।ਚੰਗੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਖੋਜ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਖੋਜ ਦੇ ਸਮੇਂ ਨੂੰ ਛੋਟਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ (ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਖੋਜ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਲਈ ਅੰਤਿਕਾ ਦੇਖੋ)।
ਨੋਟ:
ਨਵੇਂ ਡਿਜ਼ਾਇਨ ਕੀਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਉਣ ਅਤੇ ਵੱਡੇ ਪੈਮਾਨੇ ਦੀ ਖੋਜ ਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਖੋਜ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ, ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਖੋਜ ਸੀਮਾ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਕਦਮ 2:ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਵਿਕਸਿਤ ਕਰੋ
ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ: ਇਹ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਕਿ ਕੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਅਤੇ ਸਥਿਤੀਆਂ ਆਮ ਹਨ, ਇੱਕ ਨਮੂਨੇ ਵਜੋਂ ਟੀਚੇ ਦੇ ਟੁਕੜੇ ਵਾਲੇ ਸ਼ੁੱਧ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
ਨਕਾਰਾਤਮਕ/ਖਾਲੀ ਨਿਯੰਤਰਣ: ਇੱਕ DNA ਟੈਂਪਲੇਟ ਜਾਂ ddH ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ2ਓ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਇਹ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਕਿ ਕੀ ਪੀਸੀਆਰ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਗੰਦਗੀ ਦਾ ਕੋਈ ਸਰੋਤ ਹੈ, ਇੱਕ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਟੁਕੜਾ ਸ਼ਾਮਲ ਨਹੀਂ ਹੈ।
ਅੰਦਰੂਨੀ ਸੰਦਰਭ ਨਿਯੰਤਰਣ: ਇਹ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਕਿ ਕੀ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨੂੰ ਪੀਸੀਆਰ ਦੁਆਰਾ ਖੋਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਟੈਸਟ ਕੀਤੇ ਜਾਣ ਲਈ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਦੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ/ਪ੍ਰੋਬ ਸੁਮੇਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
ਨੋਟ:
ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਵੈਧਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਹਰੇਕ ਟੈਸਟ ਲਈ ਸਕਾਰਾਤਮਕ, ਨਕਾਰਾਤਮਕ/ਖਾਲੀ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਅੰਦਰੂਨੀ ਨਿਯੰਤਰਣ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸੈੱਟ ਕੀਤੇ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।
ਕਦਮ3: ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੀ ਤਿਆਰੀ
ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਧਿਆਨ ਰੱਖੋ ਕਿ ਕੀ ਘੋਲ ਬਰਾਬਰ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਜੇਕਰ ਵਰਖਾ ਮਿਲਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਸਨੂੰ ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਨਿਰਦੇਸ਼ਾਂ ਅਨੁਸਾਰ ਭੰਗ ਅਤੇ ਮਿਲਾਇਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ.ਅਸਮਾਨ ਆਇਨ ਵੰਡ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ 2×PCR ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਪਾਈਪੇਟ ਕਰਨ ਅਤੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਿਪੇਟ ਨਾਲ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਮਿਲਾਉਣ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਨੋਟ:
ਹਦਾਇਤਾਂ ਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ ਅਤੇ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਪੜ੍ਹੋ, ਅਤੇ ਹਦਾਇਤਾਂ ਅਨੁਸਾਰ ਸਖਤੀ ਨਾਲ ਪ੍ਰਯੋਗ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਤਿਆਰੀਆਂ ਕਰੋ।
ਕਦਮ 4: ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਤਿਆਰ ਕਰੋ
ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਮਿਲਾਓ, ਐੱਚ2O, 2×PCR ਮਿਕਸ, ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਅਤੇ ਹਰੇਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਵੰਡੋ।
ਨੋਟ:
ਵੱਡੇ ਪੈਮਾਨੇ ਜਾਂ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਲਈ, UNG ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਵਾਲੇ PCR ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਜੋ PCR ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੁਆਰਾ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਐਰੋਸੋਲ ਗੰਦਗੀ ਤੋਂ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਚ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਕਦਮ 5: ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਟੈਮਪਲੇਟ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ
ਡਾਇਰੈਕਟ ਪੀਸੀਆਰ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਔਖੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਕੋਈ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਨਮੂਨਾ ਟੈਂਪਲੇਟ 10 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਸੰਬੰਧਿਤ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਨੋਟ:
Lysis ਵਿਧੀ ਵਿੱਚ ਬਿਹਤਰ ਖੋਜ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੈ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਮਲਟੀਪਲ ਖੋਜ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
5.1: ਪੱਤਿਆਂ ਦਾ ਸਿੱਧਾ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ
ਮੈਨੂਅਲ ਵਿੱਚ ਤਸਵੀਰ ਦੇ ਆਕਾਰ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਪੱਤੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨੂੰ 2-3 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੇ ਵਿਆਸ ਨਾਲ ਕੱਟੋ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ।
ਨੋਟ: ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਪੱਤੇ ਦੇ ਟੁਕੜੇ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਡੁਬੋਏ ਹੋਏ ਹਨ, ਅਤੇ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਪੱਤੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨਾ ਜੋੜੋ।
5.2: ਪੱਤਾ ਲਿਸਿਸ ਵਿਧੀ
ਪੱਤੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨੂੰ 5-7 ਮਿਲੀਮੀਟਰ ਦੇ ਵਿਆਸ ਨਾਲ ਕੱਟੋ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ।ਜੇਕਰ ਤੁਸੀਂ ਪਰਿਪੱਕ ਪੱਤੇ ਚੁਣਦੇ ਹੋ, ਤਾਂ ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਪੱਤੇ ਦੀ ਮੁੱਖ ਨਾੜੀ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਚੋ।ਪਾਈਪੇਟ 50ul ਬਫਰ P1 ਲਾਈਸੇਟ ਨੂੰ ਇੱਕ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਕਿ ਲਾਈਸੇਟ ਪੱਤੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਡੁਬੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਇਸਨੂੰ ਥਰਮਲ ਸਾਈਕਲਰ ਜਾਂ ਮੈਟਲ ਬਾਥ ਵਿੱਚ ਰੱਖ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ 5-10 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 95 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਲਾਈਜ਼ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
50ul Buffer P2 ਨਿਰਪੱਖਤਾ ਦਾ ਹੱਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ ਅਤੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਰਲਾਓ।ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਲਾਈਸੇਟ ਨੂੰ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਨੋਟ: ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਪੀਸੀਆਰ ਸਿਸਟਮ ਦੇ 5-10% ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ 20% ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਹੀਂ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ (ਉਦਾਹਰਣ ਲਈ, 20μl ਪੀਸੀਆਰ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ, 1-2μl ਲਾਈਸਿਸ ਬਫਰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, 4μl ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਹੀਂ)।
ਕਦਮ 6: ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ
ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਟਿਊਬ ਨੂੰ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਐਮਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਇੱਕ ਪੀਸੀਆਰ ਯੰਤਰ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ।
ਨੋਟ:
ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਐਮਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਗੈਰ-ਸ਼ੁੱਧ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਸ਼ੁੱਧ ਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਨਾਲੋਂ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਚੱਕਰਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ 5-10 ਵੱਧ ਚੱਕਰ ਹੈ।
ਕਦਮ 7: ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਖੋਜ ਅਤੇ ਨਤੀਜੇ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ
M:100bp DNA ਪੌੜੀ
1\4: ਸ਼ੁੱਧ DNA ਵਿਧੀ
2\5: ਸਿੱਧੀ PCR ਵਿਧੀ
3\6: ਖਾਲੀ ਨਿਯੰਤਰਣ
ਗੁਣਵੱਤਾ ਕੰਟਰੋਲ:
ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿੱਚ ਸੈੱਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਦੇ ਟੈਸਟ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਹੇਠ ਲਿਖੀਆਂ ਸ਼ਰਤਾਂ ਪੂਰੀਆਂ ਕਰਨੀਆਂ ਚਾਹੀਦੀਆਂ ਹਨ।ਨਹੀਂ ਤਾਂ, ਸਮੱਸਿਆ ਦੇ ਕਾਰਨ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਸਮੱਸਿਆ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦੁਬਾਰਾ ਟੈਸਟ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ.
ਸਾਰਣੀ 1. ਵੱਖ-ਵੱਖ ਨਿਯੰਤਰਣ ਸਮੂਹਾਂ ਦੇ ਆਮ ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਤੀਜੇ
*ਜਦੋਂ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਨੂੰ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਟੈਸਟ ਦਾ ਨਤੀਜਾ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ
ਨਤੀਜਾ ਨਿਰਣਾ:
A. ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਦਾ ਟੈਸਟ ਨਤੀਜਾ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ, ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਆਮ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਡੀਐਨਏ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚੋਂ ਨਹੀਂ ਕੱਢਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਜਾਂ ਕੱਢੇ ਗਏ ਡੀਐਨਏ ਵਿੱਚ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਰੋਕਣ ਵਾਲੇ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਅਤੇ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਦੁਬਾਰਾ ਕੱਢਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
B. ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਦਾ ਟੈਸਟ ਨਤੀਜਾ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ, ਅਤੇ ਐਕਸੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਦਾ ਟੈਸਟ ਨਤੀਜਾ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ, ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਆਮ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਡੀਐਨਏ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚੋਂ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਨਿਰਣਾ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਕਿ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ XXX ਜੀਨ ਦਾ ਪਤਾ ਨਹੀਂ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।
C. ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਐਂਡੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਦਾ ਟੈਸਟ ਨਤੀਜਾ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ, ਅਤੇ ਐਕਸੋਜੇਨਸ ਜੀਨ ਦਾ ਟੈਸਟ ਨਤੀਜਾ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਹੈ, ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਆਮ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਡੀਐਨਏ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚੋਂ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਡੀਐਨਏ ਵਿੱਚ XXX ਜੀਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ।ਪੁਸ਼ਟੀਕਰਨ ਪ੍ਰਯੋਗ ਹੋਰ ਵੀ ਕੀਤੇ ਜਾ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਕਦਮ 8: ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕਰੋ
ਪ੍ਰਯੋਗ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਖੇਤਰ ਨੂੰ ਪੂੰਝਣ ਲਈ 2% ਸੋਡੀਅਮ ਹਾਈਪੋਕਲੋਰਾਈਟ ਘੋਲ ਅਤੇ 70% ਈਥਾਨੋਲ ਘੋਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
ਅੰਤਿਕਾ
ਸਾਰਣੀ 2. ਜੈਨੇਟਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੋਧੇ ਹੋਏ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਆਮ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਲਈ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ
ਹਵਾਲਾ ਦਸਤਾਵੇਜ਼:
SN/T 1202-2010, ਭੋਜਨ ਵਿੱਚ ਜੈਨੇਟਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੋਧੇ ਹੋਏ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਤੱਤਾਂ ਲਈ ਗੁਣਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਖੋਜ ਵਿਧੀ।
ਖੇਤੀਬਾੜੀ ਮੰਤਰਾਲੇ ਦੀ ਘੋਸ਼ਣਾ 1485-5-2010, ਜੈਨੇਟਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੋਧੇ ਹੋਏ ਪੌਦਿਆਂ ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਤੱਤਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ-ਚਾਵਲ M12 ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਡੈਰੀਵੇਟਿਵਜ਼।
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਜੂਨ-09-2021
