ਗਲੂ ਰਿਕਵਰੀ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਲਈ ਸੁਝਾਅ

1. ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਨਮੂਨਾ ਲੋਡ ਵਧਾਓ.

2. ਤਾਜ਼ੇ ਤਿਆਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਬਫਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।

3. ਗੂੰਦ ਨੂੰ ਕੱਟਣ ਵੇਲੇ, ਗੂੰਦ ਕੱਟਣ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਸਿਰਫ ਪੱਟੀਆਂ ਨਾਲ ਗੂੰਦ ਨੂੰ ਕੱਟਣ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕਰੋ: ਕੁਝ ਉਦੇਸ਼ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨਾਲ ਗੂੰਦ ਦੀ ਜ਼ਰੂਰਤ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇਹ ਰਿਕਵਰੀ ਰੇਟ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰੇਗਾ।

4. ਗੂੰਦ ਦੇ ਦੋ ਜਾਂ ਦੋ ਤੋਂ ਵੱਧ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਪਿਘਲਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਇੱਕ ਟਿਊਬ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ ਭਾਵੇਂ ਇਹ ਕਿੰਨੀ ਵੱਡੀ ਹੋਵੇ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਉਸੇ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ।

5. ਸੋਲ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਘੋਲ ਥੋੜਾ ਹੋਰ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਝਿੱਲੀ ਨਾਲ ਜੋੜਨ ਲਈ ਵਧੇਰੇ ਅਨੁਕੂਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ 750ul ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ।

6. ਜੈੱਲ ਰਿਕਵਰੀ ਦੀ ਕੁੰਜੀ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਲੂਣ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ, ਐਸਿਡਿਟੀ (ਚਾਰਜ) ਅਤੇ ਘੋਲ ਦੀ ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਸੀਟੀ ਦੁਆਰਾ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਬੰਨ੍ਹਣਾ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਜੇਕਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਬਫਰ ਦਾ pH ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ 10ul (pH 5.0, 3mol/L NaAC) ਨੂੰ ਸੋਲ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ;ਝਿੱਲੀ 'ਤੇ ਡੀਐਨਏ ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਢੰਗ ਨਾਲ ਰੋਕਣ ਲਈ, 30% ਆਈਸੋਪ੍ਰੋਪਾਨੋਲ ਨੂੰ ਗੂੰਦ ਨੂੰ ਘੁਲਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਤਰਲ ਵਿੱਚ ਗਰਮ ਕਰਨ ਲਈ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

7. ਐਲੂਏਂਟ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਈਥਾਨੋਲ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਭਾਫ਼ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਕੁਝ ਮਿੰਟਾਂ (ਲਗਭਗ 10 ਮਿੰਟ) ਲਈ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਛੱਡ ਦਿਓ।

8. ਅੰਤ ਵਿੱਚ, ਰਿਕਵਰੀ ਵਾਲੀਅਮ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ ਘੱਟ ਐਲੂਏਂਟ ਜੋੜੋ।ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ, 30-50μl ਐਲੂਐਂਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਇਲੂਸ਼ਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ (ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਨਹੀਂ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇਹ ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਗਿੱਲਾ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕੇਗਾ, ਜੋ ਕਿ ਇਲੂਸ਼ਨ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਨਹੀਂ ਹੈ);ਈਲੂਸ਼ਨ ਬੂੰਦਾਂ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਕੇਂਦਰ ਵਿੱਚ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਝਿੱਲੀ ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਅਲਟ ਕਰਦੀਆਂ ਹਨ।

9. ਐਲੂਐਂਟ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਇਸਨੂੰ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ 55 ਡਿਗਰੀ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਵਿੱਚ 5 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਜਾਂ 50 ਡਿਗਰੀ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਵਿੱਚ 10 ਮਿੰਟਾਂ ਤੋਂ ਵੱਧ ਲਈ ਰੱਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਾਂ ਪੈਰਾਫਿਲਮ ਨਾਲ ਰਾਤ ਭਰ 4 ਡਿਗਰੀ 'ਤੇ ਸੀਲ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਅਗਲੇ ਦਿਨ ਰਿਕਵਰੀ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਪ੍ਰਭਾਵ ਚੰਗਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

10. ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜਡ ਐਲੂਏਟ ਨੂੰ ਐਡਸੋਰਪਸ਼ਨ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਵਾਪਸ ਜੋੜੋ ਅਤੇ ਦੁਬਾਰਾ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ।

ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਰਿਕਵਰੀ ਲਈ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਢੰਗ ਅਤੇ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ

1. ਆਮ ਰਬੜ ਰੀਸਾਈਕਲਿੰਗ

ਜੇ ਤੁਸੀਂ ਗੂੰਦ ਨੂੰ ਮੁੜ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨਾ ਚਾਹੁੰਦੇ ਹੋ, ਤਾਂ ਇੱਕ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਸੁਵਿਧਾਜਨਕ ਹੈ ਅਤੇ ਰਿਕਵਰੀ ਦੀ ਦਰ ਥੋੜ੍ਹੀ ਉੱਚੀ ਹੈ।ਜੇਕਰ ਤੁਹਾਨੂੰ ਅਸਲ ਵਿੱਚ ਇਸਨੂੰ ਹੱਥੀਂ ਮੁੜ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ, ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ ਗੂੰਦ ਨੂੰ ਕੱਟਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ TE ਦੀ 3 ਗੁਣਾ ਵਾਲੀਅਮ ਜੋੜ ਸਕਦੇ ਹੋ।ਪਾਣੀ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਵਿੱਚ ਪਿਘਲਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਫਿਨੋਲ, ਫਿਨੋਲ/ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਨੂੰ ਸਾਫ਼-ਸੁਥਰਾ ਕੱਢਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਈਥਾਨੌਲ ਨੂੰ ਪ੍ਰਚਲਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਹੀ ਗੱਲ ਹੈ.

2. ਘੱਟ ਪਿਘਲਣ ਵਾਲੇ ਪੁਆਇੰਟ ਜੈੱਲਾਂ ਤੋਂ ਡੀਐਨਏ ਰਿਕਵਰੀ

ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਜੈੱਲ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਦੇ ਬਰਾਬਰ TE (10 mmol/l Tris-HCl pH8.0, 0.1 mmol/l EDTA) ਜੋੜੋ, ਅਤੇ ਜੈੱਲ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਘੁਲਣ ਲਈ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ 65 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਪਾਣੀ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ।

ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਲਿਆਉਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਫਿਨੋਲ ਦੀ ਬਰਾਬਰ ਮਾਤਰਾ (TE ਨਾਲ ਸੰਤ੍ਰਿਪਤ, TE ਨੂੰ ਉਪਰਲੀ ਪਰਤ ਵਿੱਚ ਸੀਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਫਿਨੋਲ ਦੀ ਹੇਠਲੀ ਪਰਤ ਨੂੰ ਹਟਾ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਸੀ) ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਲਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ (ਮਿਲਾਉਣ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ), ਅਤੇ 3 ਮਿੰਟ ਲਈ 12,000 rpm 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।1-2 ਵਾਰ ਦੁਹਰਾਓ.

ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਲਓ, ਈਥਾਨੋਲ ਵਰਖਾ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਲਈ 3mol/L ਸੋਡੀਅਮ ਐਸੀਟੇਟ (pH 5.2) ਦੀ 0.1 ਵਾਲੀਅਮ ਅਤੇ ਪੂਰਨ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ 2.5 ਗੁਣਾ ਮਾਤਰਾ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਸ਼ੁੱਧ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ TE ਦੀ ਉਚਿਤ ਮਾਤਰਾ ਨਾਲ ਭੰਗ ਕਰੋ, ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ ਮਾਪੋ ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕਰੋ (ਇਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਟੀਚੇ ਦੇ ਜੀਨ ਢਾਂਚੇ ਦੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ, ਜਾਂਚ ਦੀ ਤਿਆਰੀ, ਆਦਿ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ)।

3. ਪੀਸੀਆਰ ਰਿਕਵਰੀ ਚੰਗੀ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੇ ਨਾਲ

ਜੇ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਚੰਗੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਹ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਇੱਕ ਸਧਾਰਨ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਰਿਕਵਰੀ ਹੈ।ਤੁਸੀਂ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਵਿੱਚ 50g/ml ਪ੍ਰੋਟੀਨੇਜ਼ ਕੇ, 1 ਘੰਟੇ ਲਈ 37 ਡਿਗਰੀ, ਫਿਨੋਲ/ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਨਾਲ ਇੱਕ ਵਾਰ ਐਕਸਟਰੈਕਟ, ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਨਾਲ ਇੱਕ ਵਾਰ ਐਕਸਟਰੈਕਟ, ਅਤੇ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਦੀ 0.1 ਵਾਲੀਅਮ ਜੋੜ ਸਕਦੇ ਹੋ।ਸੋਡੀਅਮ ਐਸੀਟੇਟ ਨੂੰ 2.5 ਖੰਡਾਂ ਦੇ ਪੂਰਨ ਈਥਾਨੌਲ ਨਾਲ ਵਰਖਾ ਦੁਆਰਾ ਬਰਾਮਦ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।

ਸੰਬੰਧਿਤ ਉਤਪਾਦ:

https://www.foreivd.com/pcr-purification-kit-2-product/

https://www.foreivd.com/blood-superdirecttm-pcr-kit-edta-product/