RNase ਇੱਕ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਸ਼ਬਦ ਹੈ ਜੋ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਵਿਦਿਆਰਥੀ ਜੋ ਅਕਸਰ RNA ਕੱਢਣ ਦੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਕਰਦੇ ਹਨ ਉਹ ਸੁਣਨਾ ਨਹੀਂ ਚਾਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਥਿਆਰਬੰਦ, RNA ਜੋ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਫਿਨੋਲ ਅਤੇ ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਨਾਲ ਕੱਢਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਨੂੰ ਡੀਗਰੇਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।ਮੈਂ ਮੇਲ ਨਹੀਂ ਖਾਂਦਾ!!!ਅੱਜ, ਆਓ ਮਸ਼ਹੂਰ ਰਨੇਸ ਦੀ ਉਤਪਤੀ 'ਤੇ ਇੱਕ ਨਜ਼ਰ ਮਾਰੀਏ.

Ribonuclease (RNase), ਜਾਂ RNase, ਇੱਕ ਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਹੈ ਜੋ RNA ਨੂੰ ਛੋਟੇ ਅਣੂਆਂ ਵਿੱਚ ਹਾਈਡਰੋਲਾਈਜ਼ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।RNase, ਇੱਕ ਛੋਟੇ ਅਣੂ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ, ਅਸਧਾਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਥਿਰ ਹੈ .ਰਵਾਇਤੀ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਅਤੇ ਉੱਚ ਦਬਾਅ ਵਾਲੀ ਭਾਫ਼ ਨਸਬੰਦੀ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਇਨਿਹਿਬਟਰ ਇਸ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।RNase ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਣਤਰ ਵਿੱਚ ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬਾਂਡਾਂ ਤੋਂ ਆਉਂਦੀ ਹੈ।ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਬੋਵਾਈਨ ਪੈਨਕ੍ਰੀਅਸ ਦੇ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ RNase ਵਿੱਚ ਸਿਰਫ਼ 124 ਅਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਇਸ ਵਿੱਚ 4 ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬਾਂਡ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਸਲਫਰ ਬਾਂਡ ਅਤੇ ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬਾਂਡ RNase ਨੂੰ ਸ਼ਾਨਦਾਰ ਥਰਮਲ ਸਥਿਰਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੇ ਹਨ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, rnase ਦਾ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਛੋਟਾ ਅਣੂ ਭਾਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਮਾਮਲਿਆਂ ਵਿੱਚ ਇਸਦੀ ਮੂਲ ਰੂਪ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਬਹਾਲ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਬਹੁਤ ਸਥਿਰ ਹੋਣ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ,RNase ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਸਰਵ ਵਿਆਪਕ ਹਨ .RNase ਇੱਕ ਜੈਵਿਕ ਰੱਖਿਆ ਵਿਧੀ ਹੈ।ਇੱਕ ਸੈੱਲ ਲਈ, ਬਾਹਰੀ RNA ਅਕਸਰ ਘਾਤਕ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਐਕਸੋਜੇਨਸ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ, ਐਕਸੋਜੇਨਸ ਆਰਐਨਏ ਅਕਸਰ ਜ਼ਿਆਦਾ ਖਤਰਨਾਕ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।RNA ਨੂੰ ਖੁਸ਼ੀ ਨਾਲ ਲਿਪੀਅੰਤਰਿਤ ਅਤੇ ਅਨੁਵਾਦ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਲਗਭਗ ਸਾਰੇ ਜੀਵਾਂ ਨੇ ਬਾਹਰੀ RNA ਦੇ ਹਮਲੇ ਤੋਂ ਬਚਾਅ ਲਈ RNases ਦਾ ਵਿਕਾਸ ਕੀਤਾ ਹੈ।ਇਸ ਲਈ, ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਪੈਦਾ ਹੋਏ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਦੇ ਸੈੱਲ ਅਤੇ ਤੁਸੀਂ ਜੋ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਦੇ ਹੋ, ਆਰਨੇਜ਼ ਦੀ ਖੁਸ਼ਬੂ ਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢਦੇ ਹਨ।ਮਨੁੱਖੀ ਸਰੀਰ ਦੇ ਤਰਲ ਪਦਾਰਥਾਂ (ਲਾਰ, ਹੰਝੂ, ਆਦਿ) ਵਿੱਚ ਵੱਡੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ RNase ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਜਦੋਂ RNA ਡਿਗਰੇਡ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਰੋਓ ਨਾ।ਜਿੰਨਾ ਜ਼ਿਆਦਾ ਤੁਸੀਂ ਰੋਂਦੇ ਹੋ, ਓਨਾ ਹੀ ਬੁਰਾ ਆਰਐਨਏ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ!!ਭੈਣ ਦਾਈਯੂ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਲਈ ਯੋਗ ਨਹੀਂ ਹੈ!

ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਤੁਹਾਡੀ ਨਾਜ਼ੁਕ ਚਮੜੀ ਵਿੱਚ ਵੀ ਬਹੁਤ ਸਾਰਾ RNase ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਮਾਰਕਰ, ਪਾਈਪੇਟਸ, ਫਰਿੱਜ ਦੇ ਦਰਵਾਜ਼ੇ, ਅਤੇ ਦਰਵਾਜ਼ੇ ਦੇ ਹੈਂਡਲ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਚਮੜੀ ਦੁਆਰਾ ਛੂਹਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਵਿੱਚ ਵੀ RNase ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।

ਇੰਨੀ ਜ਼ਿਆਦਾ ਘੁੰਮਣਘੇਰੀ ਦੇ ਨਾਲ, ਆਓ ਇੱਕ ਨਜ਼ਰ ਮਾਰੀਏ ਕਿ RNases ਨਾਲ ਕਿਵੇਂ ਨਜਿੱਠਣਾ ਹੈ।

RNA ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਵੇਲੇ ਸਭ ਤੋਂ ਪਹਿਲੀ ਚੀਜ਼ ਜੋ ਹਰ ਕੋਈ ਸੋਚਦਾ ਹੈਡੀ.ਈ.ਪੀ.ਸੀ(ਡਾਇਥਾਈਲ ਪਾਈਰੋਕਾਰਬੋਨੇਟ)।DEPC ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ RNase ਐਕਟਿਵ ਗਰੁੱਪ ਹਿਸਟਿਡਾਈਨ ਦੇ ਇਮੀਡਾਜ਼ੋਲ ਰਿੰਗ ਨਾਲ ਜੋੜ ਕੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਨਕਾਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ।0.1% DEPC ਦਾ Rnase 'ਤੇ ਬਿਹਤਰ ਹਟਾਉਣ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਸਾਨੂੰ ਧਿਆਨ ਦੇਣ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ ਕਿ DEPC ਇੱਕ ਜਾਣਿਆ-ਪਛਾਣਿਆ ਕਾਰਸਿਨੋਜਨ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਇਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਧਿਆਨ ਦਿੱਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।

RNase ਲਈ, ਸਾਨੂੰ ਦੋ ਪਹਿਲੂਆਂ ਤੋਂ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ,ਸਭ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਐਂਡੋਜੇਨਸ RNase ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਰੋਕਣਾ ਹੈ

ਟ੍ਰਾਈਜ਼ੋਲ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ guanidine isothiocyanate ਅਤੇ DTT ਵਰਗੇ ਰਵਾਇਤੀ RNA ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਰੀਐਜੈਂਟ RNase ਦੇ ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬੰਧਨ ਨੂੰ ਖੋਲ੍ਹ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਪਰ ਅਜੇ ਵੀ ਕੁਝ RNase ਹਨ, ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਇਸ ਲਈ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਵੱਲ ਧਿਆਨ ਦਿਓ।

1.ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਤੁਰੰਤ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ, ਜਾਂ ਵਪਾਰਕ RNA ਸੰਭਾਲ ਹੱਲ ਵਿੱਚ ਡੁਬੋ ਦਿਓ।

2.ਸੈੱਲ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਕੱਢਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਇਸਨੂੰ ਲਾਈਸਿਸ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਬਰਫ਼ ਦੇ ਡੱਬੇ 'ਤੇ ਲਾਈਸ ਕਰੋ।

3. ਪੀਸਣ ਲਈ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਹੈ ਜਦੋਂ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਇਕੋ ਜਿਹੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਹੋਮੋਜਨਾਈਜ਼ਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, ਹੋਮੋਜਨੇਟ ਅਡਾਪਟਰ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਪ੍ਰੀ-ਕੂਲਿੰਗ ਕਰਨ ਵੱਲ ਧਿਆਨ ਦਿਓ।

ਦੂਜਾ ਬਾਹਰੀ DNase ਹੈ

1.ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਥਿਆਰਬੰਦ ਬਣੋ, ਲੈਬ ਕੋਟ ਪਹਿਨੋ, ਮਾਸਕ ਪਹਿਨੋ, ਅਤੇ ਨਵੇਂ ਦਸਤਾਨੇ ਪਹਿਨਣਾ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ (ਇੰਨੇ ਕਿਫ਼ਾਇਤੀ ਨਾ ਬਣੋ! ਇਹ ਨੋਟ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਕਿ ਟ੍ਰਾਈਜ਼ੋਲ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਖਰਾਬ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਦਸਤਾਨੇ ਰਾਹੀਂ ਵੀ ਬਹੁਤ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਆਪਣੇ ਹੱਥਾਂ 'ਤੇ ਨਾ ਟਪਕੋ)।

2.ਸਾਰੇ ਵਰਤੇ ਗਏ ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪਸ, EP ਟਿਊਬਾਂ, ਪੀਸੀਆਰ ਟਿਊਬਾਂ ਅਤੇ ਹੋਰ ਉਪਕਰਣਾਂ ਦਾ ਡੀ-ਆਰਨੇਜ਼ ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਨੂੰ 0.1% DEPC ਵਿੱਚ ਭਿੱਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਫਿਰ ਉੱਚ ਦਬਾਅ ਹੇਠ ਦਬਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਫਿਊਮ ਹੁੱਡ ਵਿੱਚ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਵੱਲ ਧਿਆਨ ਦਿਓ।ਸਥਾਨਕ ਜ਼ਾਲਮ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਖਪਤਕਾਰ ਖਰੀਦ ਸਕਦੇ ਹਨ।

PS: ਆਓ ਮੈਂ ਤੁਹਾਨੂੰ ਇੱਕ ਆਲਸੀ ਢੰਗ ਦੱਸਾਂ।ਹਾਲਾਂਕਿ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਅਤੇ ਉੱਚ ਦਬਾਅ RNase ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਨਹੀਂ ਹਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਇਹ ਇਸਦੇ ਇੱਕ ਵੱਡੇ ਹਿੱਸੇ ਨੂੰ ਹਟਾ ਦੇਵੇਗਾ।2 ਵਾਰ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਅਤੇ ਉੱਚ ਦਬਾਅ ਦਾ ਚੰਗਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਦੇ ਕੱਢਣ ਦਾ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੁੰਦਾ ਹੈ.

3.ਅਲਕੋਹਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਵਿਗਾੜ ਸਕਦਾ ਹੈ,ਇਸ ਲਈ ਆਰਐਨਏ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਟੇਬਲ ਨੂੰ 75% ਅਲਕੋਹਲ ਨਾਲ ਪੂੰਝਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ , ਅਤੇ ਦਸਤਾਨੇ ਨੂੰ ਵੀ ਅਲਕੋਹਲ ਨਾਲ ਛਿੜਕਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

4.ਅੰਤਮ RNA ਘੁਲਣ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਅਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਦਾ ਵੀ ਡੀ-ਆਰਨੇਜ਼ ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।DEPC ਪਾਣੀ ਇੱਕ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ RNA ਘੁਲਣ ਵਾਲਾ ਹੱਲ ਹੈ।ਆਉ DEPC ਪਾਣੀ ਦੀ ਸਹੀ ਤਿਆਰੀ ਵਿਧੀ ਬਾਰੇ ਗੱਲ ਕਰੀਏ (ਜਦੋਂ ਤੁਸੀਂ ਇਸਨੂੰ ਖਰੀਦਦੇ ਹੋ ਤਾਂ ਵਪਾਰਕ DEPC ਨੂੰ ਦੁਬਾਰਾ ਪੈਕ ਕਰਨਾ ਯਾਦ ਰੱਖੋ)

DEPC ਨੂੰ 1:1000 'ਤੇ ਅਤਿਅੰਤ ਸ਼ੁੱਧ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਿਲਾਓ, 37 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਰਾਤ ਭਰ ਖੜ੍ਹੇ ਰਹਿਣ ਦਿਓ, ਅਤੇ 15 ਮਿੰਟ ਲਈ ਉੱਚ ਤਾਪਮਾਨ ਅਤੇ ਉੱਚ ਦਬਾਅ ਹੇਠ 121 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਨਿਰਜੀਵ ਕਰੋ।DEPC ਪਾਣੀ ਨੂੰ 1ml ਐਲੀਕੋਟਸ ਵਿੱਚ -20°C 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਅੰਤ ਵਿੱਚ, ਸੰਖੇਪ ਵਿੱਚ: ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਕੁੰਜੀ ਹੈ, ਖਪਤਕਾਰਾਂ ਨੂੰ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੰਭਾਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਥਿਆਰਬੰਦ ਅਤੇ ਘੱਟ ਗੱਲਬਾਤ!

ਖੈਰ, ਇਹ ਅੱਜ ਦੀ ਰਣਨੀਤੀ ਲਈ ਹੈ.ਮੈਂ ਤੁਹਾਡੇ ਦੁਆਰਾ ਜ਼ਿਕਰ ਕੀਤੀ ਸਾਰੀ RNA ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੀ ਕਾਮਨਾ ਕਰਦਾ ਹਾਂ।ਦੋਵੇਂ A260/A280 2.0 ਹਨ!!!

ਬੇਸ਼ੱਕ, ਜੇਕਰ ਤੁਸੀਂ ਏਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਦੀ ਕਾਰਵਾਈ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਕਿੱਟ, ਤੁਹਾਨੂੰ ਉਪਰੋਕਤ ਮੁਸੀਬਤਾਂ ਦਾ ਸਾਹਮਣਾ ਨਹੀਂ ਕਰਨਾ ਪੈ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਓਪਰੇਸ਼ਨ, DNase ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ, 11 ਮਿੰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਸੈੱਲਾਂ ਤੋਂ ਕੁੱਲ RNA ਕੱਢਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਜਾਂ ਪੌਦਿਆਂ ਤੋਂ ਕੁੱਲ RNA ਕੱਢਦਾ ਹੈ।

ਅਜ਼ਮਾਇਸ਼ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਸੰਪਰਕ ਕਰੋ:overseas@foregene.com

ਸੰਬੰਧਿਤ ਉਤਪਾਦ:

https://www.foreivd.com/cell-total-rna-isolation-kit-product/

https://www.foreivd.com/animal-total-rna-isolation-kit-product/

https://www.foreivd.com/plant-total-rna/