ਲਈ ਅਕਸਰ ਪੁੱਛੇ ਜਾਂਦੇ ਸਵਾਲਜਾਨਵਰਾਂ ਦੀ ਕੁੱਲ RNA ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ
ਉਹਨਾਂ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਦਾ ਨਿਮਨਲਿਖਤ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਜੋ ਤੁਹਾਨੂੰ ਆ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ/ਸੈੱਲ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣਾ will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
RNA ਕੱਢਿਆ ਨਹੀਂ ਜਾਂਦਾ ਜਾਂ RNA ਦੀ ਪੈਦਾਵਾਰ ਘੱਟ ਹੁੰਦੀ ਹੈ
ਅਕਸਰ ਕਈ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੇ ਕਾਰਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਜੋ ਰਿਕਵਰੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ: ਟਿਸ਼ੂ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਆਰਐਨਏ ਸਮੱਗਰੀ, ਸੰਚਾਲਨ ਦੀ ਵਿਧੀ, ਇਲਿਊਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ, ਆਦਿ।
1. ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਦੌਰਾਨ ਆਈਸ ਬਾਥ ਜਾਂ ਕ੍ਰਾਇਓਜੇਨਿਕ (4 °C) ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਪੂਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੌਰਾਨ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (15-25 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ) 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰੋ, ਬਰਫ਼ ਦਾ ਇਸ਼ਨਾਨ ਨਾ ਕਰੋ ਅਤੇ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਨਾ ਕਰੋ।
2. ਗਲਤ ਨਮੂਨਾ ਸੰਭਾਲ ਜਾਂ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਨਮੂਨਾ ਸਟੋਰੇਜ ਸਮਾਂ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ -80 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ ਜਾਂ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਕਰੋ ਅਤੇ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਫ੍ਰੀਜ਼-ਥੌ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਬਚੋ;RNA ਕੱਢਣ ਲਈ ਤਾਜ਼ੇ ਟਿਸ਼ੂ ਜਾਂ ਸੰਸਕ੍ਰਿਤ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕਰੋ।
3. ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਨਮੂਨਾ lysis.
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਸਮਰੂਪਤਾ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, ਇਹ ਸੁਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕਰੋ ਕਿ ਟਿਸ਼ੂ ਕਾਫ਼ੀ ਸਮਰੂਪ ਹੈ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਰਿਹਾਈ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਕਰਨ ਲਈ ਟਿਸ਼ੂ ਸੈੱਲ ਕਾਫ਼ੀ ਵੰਡੇ ਹੋਏ ਹਨ।
4. ਐਲੂਐਂਟ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਨਹੀਂ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਹੈ।
ਸਿਫਾਰਸ਼: ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰੋ ਕਿ RNase-ਮੁਕਤ ddH2O ਨੂੰ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਮੱਧ ਵਿੱਚ ਡ੍ਰੌਪਵਾਈਜ਼ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
5. ਪੂਰਨ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਸਹੀ ਮਾਤਰਾ ਬਫਰ RL2 ਜਾਂ ਬਫਰ RW2 ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਜੋੜੀ ਗਈ ਸੀ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਹਿਦਾਇਤਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕਰੋ, ਬਫ਼ਰ RL2 ਅਤੇ ਬਫ਼ਰ RW2 ਵਿੱਚ ਪੂਰਨ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਸਹੀ ਮਾਤਰਾ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ ਅਤੇ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
6. ਟਿਸ਼ੂ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਖੁਰਾਕ ਉਚਿਤ ਨਹੀਂ ਹੈ।
ਸਿਫਾਰਸ਼: ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ 10-20 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਜਾਂ (1-5) × 10 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ6ਸੈੱਲ ਪ੍ਰਤੀ 500 μl ਬਫਰ RL1, ਕਿਉਂਕਿ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ RNA ਕੱਢਣ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਆ ਸਕਦੀ ਹੈ।
7. ਗਲਤ ਇਲੂਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ ਜਾਂ ਅਧੂਰਾ ਇਲੂਸ਼ਨ।
ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼: ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਦਾ ਇਲਿਊਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ 50-200 μl ਹੈ;ਜੇਕਰ ਇਲੂਸ਼ਨ ਪ੍ਰਭਾਵ ਤਸੱਲੀਬਖਸ਼ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਤਾਂ ਪ੍ਰੀਹੀਟਿਡ RNase-ਫ੍ਰੀ ddH ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਦੇ ਪਲੇਸਮੈਂਟ ਸਮੇਂ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।2O, ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ 5-10 ਮਿੰਟ ਲਈ।
8. ਬਫਰ RW2 ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਈਥਾਨੋਲ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਜੇਕਰ ਬਫ਼ਰ RW2 ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੈ, 1 ਮਿੰਟ ਲਈ ਖਾਲੀ ਟਿਊਬ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ, ਖਾਲੀ ਟਿਊਬ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਕਾਰਵਾਈ ਲਈ ਸਮਾਂ 2 ਮਿੰਟ ਤੱਕ ਵਧਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਾਂ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਰੱਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਲੋੜੀਂਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਨੂੰ ਹਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕੇ।
ਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਘਟੀਆ ਹੈ
ਸ਼ੁੱਧ RNA ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸੰਭਾਲ, RNase ਗੰਦਗੀ, ਅਤੇ ਹੇਰਾਫੇਰੀ, ਆਦਿ ਵਰਗੇ ਕਾਰਕਾਂ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੈ।
1. ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਸਮੇਂ ਸਿਰ ਨਹੀਂ ਰੱਖੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਜੇਕਰ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਜਾਂ ਸੈੱਲ ਇਕੱਠੇ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਮੇਂ ਸਿਰ ਨਹੀਂ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਤਾਂ ਤੁਰੰਤ -80 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਜਾਂ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ 'ਤੇ ਕ੍ਰਾਇਓਪ੍ਰੀਜ਼ਰਵ ਕਰੋ।ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਲਈ, ਜਦੋਂ ਵੀ ਸੰਭਵ ਹੋਵੇ, ਨਵੇਂ ਲਏ ਗਏ ਟਿਸ਼ੂ ਜਾਂ ਸੈੱਲ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
2. ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਫ੍ਰੀਜ਼-ਪਿਘਲਾਉਣਾ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਸਟੋਰ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਰੱਖਣ ਲਈ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਵਿੱਚ ਕੱਟਣਾ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣ-ਪਿਘਲਣ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਦੇ ਵਿਗੜਨ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਉਹਨਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਟੁਕੜੇ ਨੂੰ ਹਟਾ ਦੇਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
3. ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਦੌਰਾਨ RNase ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ ਜਾਂ ਡਿਸਪੋਜ਼ੇਬਲ ਦਸਤਾਨੇ, ਮਾਸਕ ਆਦਿ ਨਹੀਂ ਪਹਿਨੇ ਗਏ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਦੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਵੱਖਰੇ ਆਰਐਨਏ ਹੇਰਾਫੇਰੀ ਕਮਰਿਆਂ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਢੰਗ ਨਾਲ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਸਾਰਣੀ ਨੂੰ ਸਾਫ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
RNase ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੇ RNA ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੌਰਾਨ ਡਿਸਪੋਸੇਬਲ ਦਸਤਾਨੇ ਅਤੇ ਮਾਸਕ ਪਹਿਨੋ।
4. ਰੀਐਜੈਂਟ ਵਰਤੋਂ ਦੌਰਾਨ RNase ਨਾਲ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।
ਸਿਫਾਰਸ਼: ਸੰਬੰਧਿਤ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਲਈ ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਐਨੀਮਲ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਨਾਲ ਬਦਲੋ।
5. RNA ਹੇਰਾਫੇਰੀ ਵਿੱਚ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਣ ਵਾਲੀਆਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬਾਂ, ਟਿਪਸ ਆਦਿ RNase ਨਾਲ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹਨ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰੋ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਵਿੱਚ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਣ ਵਾਲੀਆਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬਾਂ, ਟਿਪਸ, ਪਾਈਪੇਟਸ, ਆਦਿ ਸਾਰੀਆਂ ਆਰਨੇਜ਼-ਮੁਕਤ ਹਨ।
ਸ਼ੁੱਧ ਪ੍ਰਾਪਤ ਆਰਐਨਏ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ
ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਦੁਆਰਾ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਆਰਐਨਏ, ਜੇਕਰ ਲੂਣ ਆਇਨਾਂ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਸਮਗਰੀ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਯੋਗ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰੇਗੀ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ: ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ, ਨਾਰਦਰਨ ਬਲੌਟ ਐਟ ਅਲ।
1. ਅਲੋਪ ਕੀਤੇ ਆਰਐਨਏ ਵਿੱਚ ਲੂਣ ਆਇਨ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰੋ ਕਿ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਸਹੀ ਮਾਤਰਾ ਬਫ਼ਰ RW2 ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ ਅਤੇ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਲਈ ਦਰਸਾਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਗਲ ਸਪੀਡ 'ਤੇ 2 ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਵਾਸ਼ ਕਰੋ;ਜੇਕਰ ਕੋਈ ਲੂਣ ਆਇਨ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੈ, ਤਾਂ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਬਫਰ RW2 'ਤੇ ਛੱਡ ਦਿਓ ਅਤੇ ਲੂਣ ਦੀ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਵੱਧ ਤੋਂ ਵੱਧ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਕਰੋ।
2. ਐਲੀਊਡਡ ਆਰਐਨਏ ਵਿੱਚ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ।
ਸਿਫਾਰਿਸ਼: ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰੋ ਕਿ ਬਫਰ RW2 ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਖਾਲੀ ਟਿਊਬ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਲਈ ਦਰਸਾਏ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਗਤੀ 'ਤੇ ਕਰੋ, ਖਾਲੀ ਟਿਊਬ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸਮੇਂ ਨੂੰ 2 ਮਿੰਟ ਤੱਕ ਵਧਾਓ ਜੇਕਰ ਅਜੇ ਵੀ ਈਥਾਨੋਲ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੈ, ਜਾਂ ਇਸ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਛੱਡ ਦਿਓ। ਆਈਡਿਊ
ਨੁਲਸਿਕ ਐਸਿਡ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀਆਂ ਕਿਸਮਾਂ ਨੂੰ ਅਲੱਗ ਕਰਨਾ
ਫੋਰਜੀਨ ਦੀਆਂ RNA ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟਾਂ ਹੇਠ ਲਿਖੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਸੋਸ ਤੋਂ ਕੁੱਲ RNA ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ/ਐਕਸਟ੍ਰਕਸ਼ਨ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ: ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ, ਪੌਦੇ, ਸੈੱਲ, ਵਾਇਰਲ, ਖੂਨ, ਆਦਿ।
ਮੈਂ ਕਿੱਟ ਨੂੰ ਕਿਵੇਂ ਸਟੋਰ ਕਰਾਂ
24 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਦੀ ਸਟੋਰੇਜ।
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਮਾਰਚ-01-2022
