ਐਨੀਮਲ ਟਿਸ਼ੂ ਡਾਇਰੈਕਟ ਪੀ.ਸੀ.ਆਰ. ਕਿੱਟ-ਯੂ.ਐੱਨ.ਜੀ. (ਬਿਨਾਂ ਸੈਂਪਲਿੰਗ ਟੂਲਸ) ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ
ਵਰਣਨ
ਇਹ ਕਿੱਟ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਲਈ ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਜਾਰੀ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਵਿਲੱਖਣ ਲਾਈਸਿਸ ਬਫਰ ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਇਹ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵੱਡੇ ਪੈਮਾਨੇ ਦੇ ਜੈਨੇਟਿਕ ਟੈਸਟਿੰਗ ਲਈ ਢੁਕਵੀਂ ਹੈ।
ਲਾਇਸਿਸ ਬਫਰ ਤੋਂ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਜਾਰੀ ਕਰਨ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ 10-30 ਮਿੰਟ ਦੇ ਅੰਦਰ 65 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਪੂਰੀ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਹਟਾਉਣ ਵਰਗੀਆਂ ਹੋਰ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਅਤੇ ਜਾਰੀ ਕੀਤੇ ਟਰੇਸ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਈ ਨਮੂਨੇ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
2×PCR ਆਸਾਨTMਮਿਕਸ (UNG) 2×PCR Easy ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ dTTP ਦੀ ਬਜਾਏ dUTP ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈTMਮਿਲਾਓ, ਅਤੇ UNG ਐਂਜ਼ਾਈਮ (Uracil-N-glycosylase) ਜੋੜਦਾ ਹੈ ਜੋ ਉਸੇ ਸਮੇਂ dUTP ਵਾਲੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨੂੰ ਡੀਗਰੇਡ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਯੂਐਨਜੀ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਯੂਰੇਸਿਲ ਵਾਲੇ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਡੀਗਰੇਡ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।UNG ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦਾ ਉਸ ਟੈਂਪਲੇਟ 'ਤੇ ਕੋਈ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨਹੀਂ ਹੋਵੇਗਾ ਜਿਸ ਵਿੱਚ uracil ਨਹੀਂ ਹੈ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਪ੍ਰਸਾਰ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਵੱਡੇ ਪੈਮਾਨੇ ਦੇ ਜੈਨੇਟਿਕ ਟੈਸਟਿੰਗ ਦੌਰਾਨ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਗੰਦਗੀ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ।
ਡੀ-ਟੈਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਇੱਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਹੈ ਜੋ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਿੱਧੇ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਲਈ ਫੋਰਜੀਨ ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਡੀ-ਟੈਕ ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਵਿੱਚ ਕਈ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੇ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਇਨਿਹਿਬਟਰਾਂ ਲਈ ਮਜ਼ਬੂਤ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਵਿੱਚ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਟਰੇਸ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਵਧਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸਪੀਡ 2Kb/min ਤੱਕ ਪਹੁੰਚ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਸਿੱਧੀ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਈ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਢੁਕਵੀਂ ਹੈ।
ਕਿੱਟ ਦੇ ਹਿੱਸੇ
ਭਾਗ I | ਬਫਰ AL |
ਫੋਰਜੀਨ ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼ | |
6× DNA ਲੋਡਿੰਗ ਬਫਰ | |
ਭਾਗ II | 2×PCR ਆਸਾਨTMਮਿਕਸ(UNG) |
ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਅਤੇ ਫਾਇਦੇ
■ਕੋਈ ਸਮਾਂ ਬਰਬਾਦ ਕਰਨ ਵਾਲਾ ਅਤੇ ਮਹਿੰਗਾ ਡੀਐਨਏ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਨਹੀਂ
■ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਮੰਗ ਛੋਟੀ ਹੈ, ਜਿੰਨਾ ਘੱਟ 5mg ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
■ ਕਿਸੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਇਲਾਜ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪੀਸਣ ਅਤੇ ਕੁਚਲਣ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਅਤੇ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਸਧਾਰਨ ਹੈ।
■ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਪੀਸੀਆਰ ਸਿਸਟਮ ਪੀਸੀਆਰ ਨੂੰ ਉੱਚ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਇਨਿਹਿਬਟਰਾਂ ਪ੍ਰਤੀ ਮਜ਼ਬੂਤ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
■ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਵਿਰੋਧੀ PCR ਸਿਸਟਮ 2×ਪੀਸੀਆਰ ਆਸਾਨTMਮਿਕਸ (UNG) ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੁਆਰਾ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਖਤਮ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪ੍ਰਸਾਰ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
ਕਿੱਟ ਪੈਰਾਮੀਟਰ
ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ: ਜਾਨਵਰ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਇੱਕ ਕਿਸਮ ਦੇ.
ਡੀਐਨਏ ਨਮੂਨਾ ਲਾਈਸਿਸ ਤੋਂ ਜਾਰੀ ਕੀਤਾ ਗਿਆ: ਕੇਵਲ ਇੱਕ ਪੀਸੀਆਰ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਕਿੱਟ ਨੂੰ ਹੇਠ ਲਿਖੇ ਉਦੇਸ਼ਾਂ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ: ਟ੍ਰਾਂਸਜੇਨੋਸਿਸ ਦੀ ਪਛਾਣ, ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੀ ਜੀਨੋਟਾਈਪਿੰਗ, ਆਦਿ।
ਕੰਮ ਦਾ ਪ੍ਰਵਾਹ
ਸਟੋਰੇਜ ਅਤੇ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ
ਇਸ ਕਿੱਟ ਦਾ ਭਾਗ I 2-8 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ℃.
ਰੀਐਜੈਂਟ ਬਫਰ AL ਨੂੰ ਖੁਸ਼ਕ ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ 12 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ;ਇਸ ਨੂੰ 2-8 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ℃ਲੰਬੇ ਸਟੋਰੇਜ਼ ਲਈ.
ਰੀਏਜੈਂਟ ਫੋਰਜੀਨ ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼ ਦਾ ਇੱਕ ਵਿਲੱਖਣ ਫਾਰਮੂਲਾ ਹੈ।ਇਸਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਤੇ ਸਥਿਰਤਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਇਸਨੂੰ 4 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ℃12 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ.
ਰੀਐਜੈਂਟ 6×DNA ਲੋਡਿੰਗ ਬਫਰ ਨੂੰ 4 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ℃ਜਾਂ -20℃ਲੰਮੇ ਸਮੇ ਲਈ.
ਇਸ ਕਿੱਟ ਦਾ ਭਾਗ II -20 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ℃.
ਰੀਐਜੈਂਟ 2×ਪੀਸੀਆਰ ਆਸਾਨTMਮਿਕਸ(UNG), ਜੇਕਰ ਇਸਨੂੰ ਅਕਸਰ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਸਨੂੰ 4 'ਤੇ ਵੀ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ℃ਥੋੜ੍ਹੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ (10 ਦਿਨਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਵਰਤੋਂ)।