Lnc-RT Heroᵀᴹ I (gDNase ਦੇ ਨਾਲ)(lncRNA ਤੋਂ ਪਹਿਲੇ-ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਸੁਪਰ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ)
ਨਿਰਧਾਰਨ
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase ਦੇ ਨਾਲ) ਇੱਕ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਹੈ ਜੋ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ lncRNA ਲਈ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਜਲਦੀ ਦੂਰ ਕਰਨ ਲਈ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।5×gDNase ਮਿਕਸ 2 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 42°C 'ਤੇ RNA ਵਿੱਚ ਬਾਕੀ ਰਹਿੰਦੇ ਜੀਨੋਮ ਨੂੰ ਤੁਰੰਤ ਹਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, qPCR ਨਤੀਜਿਆਂ 'ਤੇ ਜੀਨੋਮ ਦੀ ਦਖਲਅੰਦਾਜ਼ੀ ਤੋਂ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਬਚਦਾ ਹੈ।
5×L-RT HeroTM ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਫੋਰਜੀਨ LncRNA ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ ਜੋ ਫੋਰਜੀਨ ਦੁਆਰਾ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਕਿਸਮ ਦਾ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ ਹੈ, ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ lncRNA ਅਤੇ ਹੋਰ ਲੰਬੇ RNA ਕੰਪਲੈਕਸ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਲਈ, ਮਜ਼ਬੂਤ RNA ਸਬੰਧ ਅਤੇ ਉੱਚ ਰਿਵਰਸਲ ਰਿਕਾਰਡਿੰਗ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਦੇ ਨਾਲ।ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਸਿਸਟਮ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਰੇਟ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਉੱਚ GC ਸਮੱਗਰੀ ਅਤੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਸੈਕੰਡਰੀ ਢਾਂਚੇ ਦੇ ਨਾਲ ਆਰਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪਹਿਲਾ ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ 42°C 'ਤੇ 15 ਮਿੰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਪੂਰਾ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਕਿੱਟ ਦੇ ਹਿੱਸੇ
| 5× gDNase ਮਿਕਸ |
| 5× L-RT HeroTM ਮਿਕਸ |
| RNase-ਮੁਕਤ ddH2O |
| ਹਦਾਇਤਾਂ |
ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਅਤੇ ਫਾਇਦੇ
■gDNA ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲ ਯੋਗਤਾ, ਜੋ 2 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਿੱਚ gDNA ਨੂੰ ਹਟਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
■ ਇਹ lncRNA ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਲਿਪੀ ਨੂੰ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਉਲਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਜਦੋਂ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦ qPCR ਦੇ ਅਧੀਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ Ct ਮੁੱਲ ਰਵਾਇਤੀ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਨਾਲੋਂ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
■ ਕੁਸ਼ਲ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ, ਪਹਿਲੇ ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਿਰਫ 15 ਮਿੰਟ ਲੱਗਦੇ ਹਨ।
■ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਟੈਮਪਲੇਟਸ: ਉੱਚ GC ਸਮੱਗਰੀ ਅਤੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਸੈਕੰਡਰੀ ਢਾਂਚੇ ਵਾਲੇ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਵੀ ਉੱਚ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਉਲਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
■ ਉੱਚ-ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ, ਪੀਜੀ-ਪੱਧਰ ਦੇ ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਵੀ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ cDNA ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।
■ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਥਰਮਲ ਸਥਿਰਤਾ ਹੈ, ਅਨੁਕੂਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 42 ਹੈ℃, ਅਤੇ ਇਸ ਵਿੱਚ ਅਜੇ ਵੀ 50 'ਤੇ ਵਧੀਆ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਹੈ℃.
ਕਿੱਟ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ
lncRNA ਅਨੁਸਾਰੀ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ।
lncRNA ਸੰਪੂਰਨ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ।
ਇਹ ਟਰੇਸ ਆਰਐਨਏ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਵਾਇਰਸ ਦਾ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਸਹੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਉੱਚ GC ਸਮੱਗਰੀ ਜਾਂ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਸੈਕੰਡਰੀ ਢਾਂਚੇ ਦੇ ਨਾਲ RNA ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਦਾ ਉਲਟਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ।
ਕੰਮ ਦਾ ਪ੍ਰਵਾਹ
ਸਟੋਰੇਜ ਅਤੇ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ
ਕਿੱਟ ਨੂੰ -20 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ°C. ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ -20 'ਤੇ ਸਥਿਰ ਤਾਪਮਾਨ ਵਾਲੇ ਫਰਿੱਜ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕਰੋ°ਪ੍ਰਾਪਤੀ ਦੇ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ ਸੀ.ਜੇਕਰ ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਉਚਿਤ ਹਨ, ਤਾਂ ਉਤਪਾਦ 1-ਸਾਲ ਦੀ ਵੈਧਤਾ ਅਵਧੀ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਕਿਸੇ ਵੀ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਨੂੰ ਨਹੀਂ ਘਟਾਏਗਾ।
ਸਮੱਸਿਆ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਗਾਈਡ
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-ਖਾਸ ਵਾਧਾ
1. ਗੈਰ-ਵਾਜਬ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਸਿਧਾਂਤਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕਰੋ।
2. ਜੀਨੋਮ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ।
ਸੁਝਾਅ: ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ gDNA ਹਟਾਉਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਪਹਿਲਾ ਪੜਾਅ ਤਾਪਮਾਨ 42°C ਹੈ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਸਮਾਂ 5 ਮਿੰਟ ਤੱਕ ਵੀ ਵਧਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
RT-qPCR ਦੁਆਰਾ ਕੋਈ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸਿਗਨਲ ਨਹੀਂ ਹੈ
1. ਆਰ ਐਨ ਏ ਡੀਗਰੇਡ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਸਿਫਾਰਸ਼: ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਲਈ ਸਮੱਗਰੀ ਜਿੰਨੀ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਤਾਜ਼ਾ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਅਤੇ ਉੱਚ-ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਾਲੇ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ।
2. ਆਰਐਨਏ ਵਿੱਚ ਇਨਿਹਿਬਟਰ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਇਨਿਹਿਬਟਰਾਂ ਵਿੱਚ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ SDS, guanidine ਲੂਣ, EDTA, ਆਦਿ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਇਨਿਹਿਬਟਰਾਂ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ 70% ਈਥਾਨੌਲ ਨਾਲ RNA ਪ੍ਰੀਪੀਟੇਟ ਨੂੰ ਧੋਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
3. ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਮੁੱਦੇ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਸਿਧਾਂਤ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਜਾਂਚ ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਦੁਬਾਰਾ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕਰੋ।
ਟੀਚਾ ਬੈਂਡ ਖਾਲੀ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦਾ ਹੈ
1. ਓਪਰੇਟਿੰਗ ਟੂਲਸ ਜਾਂ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਦੀ ਗੰਦਗੀ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਪ੍ਰਯੋਗ ਲਈ ਸਾਰੇ ਰੀਐਜੈਂਟ ਜਾਂ ਉਪਕਰਣ ਆਟੋਕਲੇਵ ਕੀਤੇ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।ਡੀਐਨਏ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਪਾਈਪੇਟ ਵਿੱਚ ਚੂਸਣ ਜਾਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚੋਂ ਬਾਹਰ ਨਿਕਲਣ ਤੋਂ ਰੋਕਣ ਲਈ ਸੰਭਾਲਣ ਵੇਲੇ ਸਾਵਧਾਨ ਅਤੇ ਨਰਮ ਰਹੋ।
2. ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਦੌਰਾਨ ਗੰਦਗੀ ਆਈ.
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਸੰਭਾਲਣ ਵੇਲੇ ਜ਼ਰੂਰੀ ਸਾਵਧਾਨੀ ਵਰਤੋ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ: ਲੇਟੈਕਸ ਦਸਤਾਨੇ ਪਹਿਨਣੇ, ਫਿਲਟਰ ਟਿਪਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ।ਇੱਕ ਗੰਦਗੀ-ਪ੍ਰੂਫ਼ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਮਿਕਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
3. ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡੀਗਰੇਡ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।
ਸੁਝਾਅ: ਇਹ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ SDS-PAGE ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ ਕਿ ਕੀ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡੀਗਰੇਡ ਹੋ ਗਏ ਹਨ, ਅਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਖੋਜ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਲਈ ਨਵੇਂ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨਾਲ ਬਦਲੋ।
ਹਦਾਇਤ ਮੈਨੂਅਲ:
