ਪੌਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੌਲ ਵਿੱਚ ਘੱਟ ਪੌਦਿਆਂ ਲਈ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਕੁੱਲ RNA ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਕੁੱਲ RNA ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਿੱਟ
ਨਿਰਧਾਰਨ
50 ਤਿਆਰੀ, 200 ਤਿਆਰੀ
ਕਿੱਟ ਫੋਰਜੀਨ ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੇ ਸਪਿਨ ਕਾਲਮ ਅਤੇ ਫਾਰਮੂਲੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਘੱਟ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਸਮੱਗਰੀ ਵਾਲੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਤੋਂ ਉੱਚ-ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਕੁੱਲ RNA ਨੂੰ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਕੱਢ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਉੱਚ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਜਾਂ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਸਮੱਗਰੀ ਵਾਲੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਵਧੀਆ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਪਲੱਸ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਕਿੱਟ ਡੀਐਨਏ-ਕਲੀਨਿੰਗ ਕਾਲਮ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀ ਹੈ ਜੋ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਅਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਲਾਈਸੇਟ ਤੋਂ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਹਟਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।RNA-ਸਿਰਫ ਕਾਲਮ RNA ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਕਿੱਟ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਵਿੱਚ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਪੂਰੇ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ RNase ਸ਼ਾਮਲ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਸ਼ੁੱਧ RNA ਨੂੰ ਡੀਗਰੇਡ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇਗਾ।ਬਫਰ PRW1 ਅਤੇ Buffer PRW2 ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾ ਸਕਦੇ ਹਨ ਕਿ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ RNA ਪ੍ਰੋਟੀਨ, DNA, ਆਇਨਾਂ ਅਤੇ ਜੈਵਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੁਆਰਾ ਦੂਸ਼ਿਤ ਨਹੀਂ ਹੈ।
ਕਿੱਟ ਦੇ ਹਿੱਸੇ
| ਬਫਰ PSL1, ਬਫਰ PS, ਬਫਰ PSL2 |
| ਬਫਰ PRW1, ਬਫਰ PRW2 |
| RNase-ਮੁਕਤ ddH2O, DNA-ਸਫ਼ਾਈ ਕਾਲਮ |
| RNA-ਸਿਰਫ਼ ਕਾਲਮ |
| ਹਦਾਇਤਾਂ |
ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਅਤੇ ਫਾਇਦੇ
■ ਪੂਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੌਰਾਨ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (15-25℃) 'ਤੇ ਸੰਚਾਲਨ, ਬਿਨਾਂ ਬਰਫ਼ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਅਤੇ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਦੇ।
■ ਪੂਰੀ ਕਿੱਟ RNase-ਮੁਕਤ, RNA ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਬਾਰੇ ਚਿੰਤਾ ਕਰਨ ਦੀ ਕੋਈ ਲੋੜ ਨਹੀਂ।
■ ਡੀਐਨਏ-ਸਫ਼ਾਈ ਕਾਲਮ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਡੀਐਨਏ ਨਾਲ ਜੁੜਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਕਿੱਟ ਡੀਐਨਏਸ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਹਟਾ ਸਕੇ।
■ ਉੱਚ RNA ਉਪਜ: RNA-ਸਿਰਫ ਕਾਲਮ ਅਤੇ ਵਿਲੱਖਣ ਫਾਰਮੂਲਾ RNA ਨੂੰ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
■ ਤੇਜ਼ ਗਤੀ: ਚਲਾਉਣ ਲਈ ਆਸਾਨ ਅਤੇ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਪੂਰਾ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
■ ਸੁਰੱਖਿਆ: ਕੋਈ ਜੈਵਿਕ ਰੀਐਜੈਂਟ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ।
■ ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ: ਸ਼ੁੱਧ RNA ਟੁਕੜੇ ਉੱਚ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਹੋਰ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਤੋਂ ਮੁਕਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਕਿੱਟ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ
ਇਹ ਘੱਟ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਸਮੱਗਰੀ ਵਾਲੇ ਤਾਜ਼ੇ ਜਾਂ ਜੰਮੇ ਹੋਏ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨਮੂਨਿਆਂ (ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਤਾਜ਼ੇ ਪੌਦੇ ਦੇ ਪੱਤੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ) ਤੋਂ ਕੁੱਲ RNA ਨੂੰ ਕੱਢਣ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਹੈ।
ਕੰਮ ਦਾ ਪ੍ਰਵਾਹ
ਚਿੱਤਰ
ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਨੇ 50 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਦੇ ਤਾਜ਼ੇ ਪੱਤਿਆਂ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕੀਤੀ, ਅਤੇ 5% ਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੁਆਰਾ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ।
1: ਕੇਲਾ
2: ਜਿੰਕਗੋ
3: ਕਪਾਹ
4: ਅਨਾਰ
ਸਟੋਰੇਜ ਅਤੇ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ
ਕਿੱਟ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (15–25 ℃) ਤੇ ਖੁਸ਼ਕ ਵਾਤਾਵਰਣ ਵਿੱਚ 12 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ, ਅਤੇ 2–8 ℃ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ (24 ਮਹੀਨਿਆਂ) ਲਈ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਬਫਰ PSL1 ਨੂੰ 2-ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸੀ-1-ਏਥੇਥਿਓਲ (ਵਿਕਲਪਿਕ) ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 1 ਮਹੀਨੇ ਲਈ 4 ℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਸਮੱਸਿਆ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਗਾਈਡ
ਉਹਨਾਂ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਦਾ ਨਿਮਨਲਿਖਤ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਜੋ ਤੁਹਾਨੂੰ ਆ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨਪਲਾਂਟ ਕੁੱਲRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
ਸਪਿਨ ਕਾਲਮ ਬੰਦ ਹੈ
ਸਪਿੱਨ ਕਾਲਮ ਦੀ ਰੁਕਾਵਟ ਕਾਰਨ ਆਰਐਨਏ ਉਪਜ ਘਟੇਗੀ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਸ਼ੁੱਧ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕੇਗੀ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਘੱਟ ਹੋਵੇਗੀ।
ਆਮ ਕਾਰਨ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ:
1. ਨਮੂਨਾ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਟੁੱਟਿਆ ਨਹੀਂ ਹੈ.
ਅਧੂਰਾ ਨਮੂਨਾ ਫਰੈਗਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਡੀਐਨਏ-ਕਲੀਨਿੰਗ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਉਪਜ ਅਤੇ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨੂੰ ਵੀ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਟੁਕੜੇ ਕਰਨ ਵੇਲੇ, ਜਿੰਨੀ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ, ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਸੈੱਲ ਦੀਆਂ ਕੰਧਾਂ ਅਤੇ ਸੈੱਲ ਝਿੱਲੀ ਵਰਗੇ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਨੂੰ ਤੋੜਨ ਲਈ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਦੀ ਲੋੜੀਂਦੀ ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਪੀਸ ਲਓ।ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਤੁਸੀਂ ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
2. ਡੀਐਨਏ-ਕਲੀਨਿੰਗ ਕਾਲਮ ਆਈਸੋਲੇਟਿਡ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਨੂੰ ਐਸਪੀਰੇਟ ਕਰੋ, ਸੰਭਵ ਸੈੱਲ ਮਲਬੇ ਦੀ ਗੋਲੀ ਨੂੰ ਐਸਪੀਰੇਟ ਕਰੋ।
ਐਸਪੀਰੇਟਿਡ ਸੈੱਲ ਮਲਬੇ ਵਾਲੀ ਗੋਲੀ RNA ਸੋਸ਼ਣ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੌਰਾਨ RNA-ਸਿਰਫ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਰੋਕ ਸਕਦੀ ਹੈ (ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦਾ ਕਦਮ 5, ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦਾ ਕਦਮ 6 ਦੇਖੋ)।ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਸੈੱਲ ਦੇ ਮਲਬੇ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਇਸ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਦੀ ਇੱਛਾ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਧਿਆਨ ਰੱਖਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
3. ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਮਾਤਰਾ ਬਹੁਤ ਵੱਡੀ ਹੈ।
ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਬਫਰ PRL1 ਜਾਂ Buffer PSL1 ਦੁਆਰਾ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਅਧੂਰੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਟੁਕੜੇ ਜਾਂ ਅਧੂਰੇ lysis ਹੋ ਜਾਣਗੇ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਰਜਾਂ ਲਈ ਇੱਕ ਬੰਦ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਹੋਵੇਗਾ।ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਸੰਚਾਲਿਤ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਪ੍ਰਤੀ ਸਿੰਗਲ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਅਧਿਕਤਮ 50 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਤੁਸੀਂ ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕਰੋ।
4. ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਹੈ।
ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿਘਨ ਨੂੰ ਛੱਡ ਕੇ, ਪੂਰੇ ਆਰਐਨਏ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ, ਸਾਰੇ ਕਦਮ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25 ° C) 'ਤੇ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਕੁਝ ਘੱਟ-ਤਾਪਮਾਨ ਵਾਲੇ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਜਾਂ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 20 °C ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜੋ DNA-ਸਫਾਈ ਕਾਲਮ ਅਤੇ/ਜਾਂ RNA-ਸਿਰਫ਼ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਰੁਕਾਵਟਾਂ ਪੈਦਾ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਜੇਕਰ ਅਜਿਹਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 20-25 °C 'ਤੇ ਸੈੱਟ ਕਰੋ ਅਤੇ ਲਿਸਿਸ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਗਰਮ ਕਰੋ ਅਤੇ/ਜਾਂ ਈਥਾਨੋਲ ਵੱਖ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਨੂੰ 37 °C ਤੱਕ ਜੋੜੋ।
ਕੋਈ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਿਆ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਉਪਜ ਘੱਟ ਨਹੀਂ ਹੈ
ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਕਾਰਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਜੋ ਰਿਕਵਰੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ: ਨਮੂਨਾ ਆਰਐਨਏ ਸਮੱਗਰੀ, ਸੰਚਾਲਨ ਵਿਧੀ, ਇਲੂਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ, ਆਦਿ।
ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਆਮ ਕਾਰਨਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ:
1. ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਦੌਰਾਨ ਬਰਫ਼ ਦਾ ਇਸ਼ਨਾਨ ਜਾਂ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ (4°C) ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੁਝਾਅ: ਪੂਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (15-25 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ) 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰੋ, ਬਰਫ਼ ਦਾ ਇਸ਼ਨਾਨ ਨਾ ਕਰੋ ਅਤੇ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਨਾ ਕਰੋ।
2.ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਗਲਤ ਸੰਭਾਲ ਜਾਂ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸੰਭਾਲ ਦੇ ਕਾਰਨ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਘਟਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।
ਸਿਫਾਰਸ਼: ਤਾਜ਼ੇ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ -80 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣ ਅਤੇ ਪਿਘਲਣ ਤੋਂ ਬਚੋ;ਜਾਂ ਤੁਰੰਤ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ RNA ਸਟੈਬੀਲਾਈਜ਼ਰ RNAlater ਘੋਲ (ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ) ਵਿੱਚ ਭਿਓ ਦਿਓ।
3.ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਨਮੂਨਾ ਫ੍ਰੈਗਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਲਿਸਿਸ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਦੀ ਰੁਕਾਵਟ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਸੁਝਾਅ: ਟਿਸ਼ੂ ਨੂੰ ਪੀਸਣ ਵੇਲੇ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਟਿਸ਼ੂ ਕਾਫ਼ੀ ਜ਼ਮੀਨ ਵਿੱਚ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਤੁਰੰਤ ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਤਿਆਰ ਬਫਰ PSL1 ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ (ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰੋ ਕਿ β-ME ਦਾ ਸਹੀ ਅਨੁਪਾਤ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦਾ ਕਦਮ 1 ਦੇਖੋ)।
4. ਐਲੂਐਂਟ ਨੂੰ ਗਲਤ ਤਰੀਕੇ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੁਝਾਅ: ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ RNase-ਮੁਕਤ ddH2O ਨੂੰ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਮੱਧ ਵਿੱਚ ਟਪਕਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
5. ਪੂਰਨ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਸਹੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਬਫਰ PSL2 ਜਾਂ ਬਫਰ PRW2 ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੁਝਾਅ: ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਹਿਦਾਇਤਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕਰੋ, ਬਫਰ PSL2 ਅਤੇ Buffer PRW2 ਵਿੱਚ ਪੂਰਨ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਸਹੀ ਮਾਤਰਾ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ ਅਤੇ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
6. ਟਿਸ਼ੂ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਅਣਉਚਿਤ ਹੈ।
ਸੁਝਾਅ: ਬਫਰ PSL1 ਦੇ 500 μl ਪ੍ਰਤੀ 50 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਨਾਲ ਕੱਢੇ ਗਏ RNA ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਘੱਟ ਜਾਵੇਗੀ ਅਤੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ RNA ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵੀ ਘੱਟ ਜਾਵੇਗੀ।ਅਸੀਂ ਜ਼ੋਰਦਾਰ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਖੁਰਾਕ ਪ੍ਰਤੀ RNA ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਓਪਰੇਸ਼ਨ 50 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਹੀਂ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ।
7. ਅਣਉਚਿਤ ਇਲੂਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ ਜਾਂ ਅਧੂਰਾ ਇਲੂਸ਼ਨ।
ਸੁਝਾਅ: ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਦੀ ਐਲੂਐਂਟ ਵਾਲੀਅਮ 50-200 μl ਹੈ;ਜੇਕਰ ਇਲੂਸ਼ਨ ਪ੍ਰਭਾਵ ਤਸੱਲੀਬਖਸ਼ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਤਾਂ ਪ੍ਰੀਹੀਟਿਡ RNase-ਫ੍ਰੀ ddH ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਸਮਾਂ ਵਧਾਉਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।2ਓ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ 5-10 ਮਿੰਟ.
8. ਬਫਰ PRW2 ਨਾਲ ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਈਥਾਨੋਲ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਸੁਝਾਅ: ਜੇਕਰ ਖਾਲੀ ਟਿਊਬ ਨੂੰ 1 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਬਫਰ PRW2 ਵਿੱਚ ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਵੀ ਈਥਾਨੌਲ ਬਾਕੀ ਰਹਿੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ ਖਾਲੀ ਟਿਊਬ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸਮੇਂ ਨੂੰ 2 ਮਿੰਟ ਤੱਕ ਵਧਾ ਸਕਦੇ ਹੋ, ਜਾਂ ਬਾਕੀ ਬਚੇ ਈਥਾਨੋਲ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਨੂੰ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਰੱਖ ਸਕਦੇ ਹੋ।
9. ਕਿੱਟ ਦੀ ਗਲਤ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
ਸੁਝਾਅ: ਪੌਲੀਫੇਨੋਲਿਕ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਆਮ ਕਿੱਟਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪਲਾਂਟ ਕੁੱਲ RNA ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਆਦਰਸ਼ RNA ਨਮੂਨੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦੇ।ਅਸੀਂ ਤੁਹਾਨੂੰ ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ, ਜੋ ਕਿ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲਿਕ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਇੱਕ ਕਿੱਟ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੋਲੀਫੇਨੋਲ ਅਤੇ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਪਲਾਂਟ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਲਈ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।
OD260/OD280 ਮੁੱਲ ਘੱਟ ਹੈ
ddH ਨਾਲ RNA ਇਲੂਸ਼ਨ2O ਅਤੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਰੀਡਿੰਗਾਂ ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਘੱਟ OD260/OD280 ਮੁੱਲ ਹਨ।ਅਸੀਂ RNase-ਮੁਕਤ ddH ਦੀ ਬਜਾਏ 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ2ਆਰ ਐਨ ਏ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ O) ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਸਹੀ OD260/OD280 ਮੁੱਲ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ, ਪੰਨਾ 19 'ਤੇ "RNA ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਅਸੇਜ਼" ਦੇਖੋ।
ਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਡੀਗਰੇਡ ਹੁੰਦਾ ਹੈ
ਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸੰਭਾਲ, ਆਰਨੇਜ਼ ਗੰਦਗੀ, ਅਤੇ ਹੇਰਾਫੇਰੀ ਵਰਗੇ ਕਾਰਕਾਂ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੈ।
ਆਮ ਕਾਰਨਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ:
1. ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਇਕੱਤਰ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਨਹੀਂ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਜੇਕਰ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਤਾਂ ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਤੁਰੰਤ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕਰੋ ਜਾਂ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ ਠੰਢ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ -80 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ, ਜਾਂ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਤੁਰੰਤ RNA ਸਟੈਬੀਲਾਈਜ਼ਰ RNAlater ਘੋਲ (ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ) ਵਿੱਚ ਡੁਬੋ ਦਿਓ।RNA ਕੱਢਣ ਲਈ, ਤਾਜ਼ੇ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਵਰਤਣ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕਰੋ।
2. ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣਾ ਅਤੇ ਪਿਘਲਾਉਣਾ।
ਸੁਝਾਅ: ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਸਟੋਰ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਸੰਭਾਲਣ ਲਈ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਵਿੱਚ ਕੱਟਣਾ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣ ਅਤੇ ਪਿਘਲਣ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਆਰਐਨਏ ਦੇ ਵਿਗੜਨ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਉਹਨਾਂ ਦਾ ਇੱਕ ਹਿੱਸਾ ਕੱਢ ਲੈਣਾ।
3.RNase ਨੂੰ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਰੂਮ ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਾਂ ਡਿਸਪੋਜ਼ੇਬਲ ਦਸਤਾਨੇ, ਮਾਸਕ ਆਦਿ ਨਹੀਂ ਪਹਿਨੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
ਸੁਝਾਅ: RNA ਕੱਢਣ ਦੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਵੱਖਰੇ RNA ਓਪਰੇਸ਼ਨਾਂ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਢੰਗ ਨਾਲ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਟੇਬਲ ਨੂੰ ਪ੍ਰਯੋਗ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਸਾਫ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ RNase ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਦੇ ਕਾਰਨ RNA ਦੇ ਵਿਗੜਨ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੌਰਾਨ ਡਿਸਪੋਸੇਬਲ ਦਸਤਾਨੇ ਅਤੇ ਮਾਸਕ ਪਹਿਨੇ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।
4. ਰੀਐਜੈਂਟ ਵਰਤੋਂ ਦੌਰਾਨ RNase ਦੁਆਰਾ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਸੁਝਾਅ: ਸੰਬੰਧਿਤ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਲਈ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਕੁੱਲ RNA ਕੱਢਣ ਵਾਲੀਆਂ ਕਿੱਟਾਂ ਦੀ ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਲੜੀ ਨਾਲ ਬਦਲੋ।
5. RNA ਹੇਰਾਫੇਰੀ ਲਈ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਂਦੀਆਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬਾਂ ਅਤੇ ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪਸ RNase ਨਾਲ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹਨ।
ਸੁਝਾਅ: ਇਹ ਸੁਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕਰੋ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਵਿੱਚ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਣ ਵਾਲੀਆਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬਾਂ, ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪਸ, ਪਾਈਪੇਟਸ, ਆਦਿ ਸਭ RNase-ਮੁਕਤ ਹਨ।
ਨਿਰਦੇਸ਼ ਮੈਨੂਅਲ:
