ਪੌਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੌਲ ਨਾਲ ਭਰਪੂਰ ਪੌਦਿਆਂ ਲਈ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਕੁੱਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਕੁੱਲ ਆਰਐਨਏ ਪਿਊਰੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ
ਕਿੱਟ ਦਾ ਵੇਰਵਾ:
Cat.No.RE-05021/05022/05024
ਪੌਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਦੇ ਉੱਚ ਭਾਗਾਂ ਵਾਲੇ ਆਮ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਕੁੱਲ RNA ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਲਈ।
ਪੌਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਦੀ ਉੱਚ ਸਮੱਗਰੀ ਵਾਲੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਕੁੱਲ ਆਰ.ਐਨ.ਏ.
DNA-ਸਫ਼ਾਈ ਕਾਲਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ RNase-ਮੁਕਤ
ਸਧਾਰਨ — ਸਾਰੇ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਪੂਰੇ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ
ਤੇਜ਼-ਓਪਰੇਸ਼ਨ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਪੂਰਾ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ
ਸੁਰੱਖਿਅਤ—ਕੋਈ ਜੈਵਿਕ ਰੀਐਜੈਂਟ ਨਹੀਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ 
ਨਿਰਧਾਰਨ
50 ਤਿਆਰੀ, 200 ਤਿਆਰੀ
ਕਿੱਟ ਫੋਰਜੀਨ ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਸਪਿਨ ਕਾਲਮ ਅਤੇ ਫਾਰਮੂਲੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਉੱਚ ਪੌਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਜਾਂ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਸਮੱਗਰੀ ਵਾਲੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਤੋਂ ਉੱਚ-ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਕੁੱਲ RNA ਨੂੰ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਕੱਢ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਹ ਡੀਐਨਏ-ਕਲੀਨਿੰਗ ਕਾਲਮ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜੋ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਅਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਲਾਈਸੇਟ ਤੋਂ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਹਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।RNA-ਸਿਰਫ ਕਾਲਮ RNA ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਕਿੱਟ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਵਿੱਚ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਪੂਰੇ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ RNase ਸ਼ਾਮਲ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਸ਼ੁੱਧ RNA ਨੂੰ ਡੀਗਰੇਡ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇਗਾ।ਬਫਰ PRW1 ਅਤੇ Buffer PRW2 ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾ ਸਕਦੇ ਹਨ ਕਿ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ RNA ਪ੍ਰੋਟੀਨ, DNA, ਆਇਨਾਂ ਅਤੇ ਜੈਵਿਕ ਮਿਸ਼ਰਣਾਂ ਦੁਆਰਾ ਦੂਸ਼ਿਤ ਨਹੀਂ ਹੈ।
ਕਿੱਟ ਦੇ ਹਿੱਸੇ
| ਬਫਰ PSL1, ਬਫਰ PS, ਬਫਰ PSL2 |
| ਬਫਰ PRW1, ਬਫਰ PRW2 |
| RNase-ਮੁਕਤ ddH2O, DNA-ਸਫ਼ਾਈ ਕਾਲਮ |
| RNA-ਸਿਰਫ਼ ਕਾਲਮ |
ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਅਤੇ ਫਾਇਦੇ
■ ਪੂਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੌਰਾਨ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (15-25℃) 'ਤੇ ਸੰਚਾਲਨ, ਬਿਨਾਂ ਬਰਫ਼ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਅਤੇ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਦੇ।
■ ਪੂਰੀ ਕਿੱਟ RNase-ਮੁਕਤ, RNA ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ ਬਾਰੇ ਚਿੰਤਾ ਕਰਨ ਦੀ ਕੋਈ ਲੋੜ ਨਹੀਂ।
■ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੌਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੌਲ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ।
■ ਡੀਐਨਏ-ਸਫ਼ਾਈ ਕਾਲਮ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਡੀਐਨਏ ਨਾਲ ਜੁੜਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਕਿੱਟ ਡੀਐਨਏਸ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਹਟਾ ਸਕੇ।
■ ਉੱਚ RNA ਉਪਜ: RNA-ਸਿਰਫ ਕਾਲਮ ਅਤੇ ਵਿਲੱਖਣ ਫਾਰਮੂਲਾ RNA ਨੂੰ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।
■ ਤੇਜ਼ ਗਤੀ: ਚਲਾਉਣ ਲਈ ਆਸਾਨ ਅਤੇ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਪੂਰਾ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
■ ਸੁਰੱਖਿਆ: ਕੋਈ ਜੈਵਿਕ ਰੀਐਜੈਂਟ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ।
■ ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ: ਸ਼ੁੱਧ RNA ਟੁਕੜੇ ਉੱਚ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਹੋਰ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਤੋਂ ਮੁਕਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।
ਉਤਪਾਦ ਪੈਰਾਮੀਟਰ
■ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ: ਫਸਟ-ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ, RT-PCR, ਅਣੂ ਕਲੋਨਿੰਗ, ਉੱਤਰੀ ਬਲੌਟ, ਆਦਿ।
■ ਨਮੂਨਾ: ਪੌਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਦੇ ਤਾਜ਼ੇ ਜਾਂ ਜੰਮੇ ਹੋਏ ਪੌਦੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ
■ ਖੁਰਾਕ: 50mg ਪੌਦੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ
■ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਦੀ ਅਧਿਕਤਮ RNA ਬਾਈਡਿੰਗ ਸਮਰੱਥਾ: 80 μg
■ ਇਲੂਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ: 50-200 μl
ਕਿੱਟ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ
ਇਹ ਉੱਚ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਸਮੱਗਰੀ ਵਾਲੇ ਤਾਜ਼ੇ ਜਾਂ ਜੰਮੇ ਹੋਏ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ ਨਮੂਨਿਆਂ (ਖਾਸ ਕਰਕੇ ਤਾਜ਼ੇ ਪੌਦੇ ਦੇ ਪੱਤੇ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ) ਤੋਂ ਕੁੱਲ RNA ਨੂੰ ਕੱਢਣ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਹੈ।
ਕੰਮ ਦਾ ਪ੍ਰਵਾਹ
ਚਿੱਤਰ
ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਨੇ 50 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਅਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲ ਦੇ ਤਾਜ਼ੇ ਪੱਤਿਆਂ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕੀਤੀ, ਅਤੇ 5% ਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੁਆਰਾ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ।
1: ਕੇਲਾ
2: ਜਿੰਕਗੋ
3: ਕਪਾਹ
4: ਅਨਾਰ
ਸਟੋਰੇਜ ਅਤੇ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ
ਇਸ ਕਿੱਟ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (15-25℃) 'ਤੇ ਖੁਸ਼ਕ ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ 24 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ;ਜੇਕਰ ਇਸਨੂੰ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸਟੋਰ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਸਨੂੰ 2-8℃ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਬਫਰ PSL1 ਨੂੰ β-mercaptoethanol ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ 1 ਮਹੀਨੇ ਲਈ 4℃ 'ਤੇ ਰੱਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ (ਇਸ ਨੂੰ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੇ ਉਸੇ ਸਮੇਂ ਜੋੜਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ)।
ਕਾਲਮ ਪਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ
ਕਾਲਮ ਪਲੱਗ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, RNA ਉਪਜ ਘੱਟ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਜਾਂ RNA ਨੂੰ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨਾ ਅਸੰਭਵ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ RNA ਪੁੰਜ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਆਮ ਕਾਰਨ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ:
1. ਨਮੂਨਾ ਬਰੇਕਾਂ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਨਹੀਂ ਹਨ।
ਨਮੂਨਾ ਟੁੱਟਣ ਨਾਲ ਡੀਐਨਏ-ਕਲੀਨਿੰਗ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਬਲੌਕ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਉਪਜ ਅਤੇ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਜਦੋਂ ਤੁਸੀਂ ਨਮੂਨੇ ਤੋੜਦੇ ਹੋ ਤਾਂ ਅਸੀਂ ਇੱਕ ਕਾਫ਼ੀ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਪੀਸਣ ਦੀ ਕਾਰਵਾਈ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ, ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸੈੱਲ ਕੰਧ, ਸੈੱਲ ਝਿੱਲੀ ਅਤੇ ਹੋਰ ਟਿਸ਼ੂ ਨੂੰ ਕੁਚਲਣ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕਰੋ।ਪੌਲੀਓਲ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਤੁਸੀਂ ਪਲਾਂਟ ਕੁੱਲ RNA ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
2. ਜਦੋਂ ਡੀਐਨਏ-ਕਲੀਨਿੰਗ ਕਾਲਮ ਨਾਲ ਵੱਖ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਨੂੰ ਚੂਸਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਸੰਭਾਵਿਤ ਸੈੱਲ ਖੰਡਿਤ ਪਰੀਪੀਟੇਟ ਸਾਹ ਰਾਹੀਂ ਅੰਦਰ ਲਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਲਏ ਗਏ ਸੈੱਲ ਖੰਡਿਤ ਤਲਛਟ ਆਰਐਨਏ-ਓਨਲੀ ਕਾਲਮ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦੇ ਹਨ ਜੋ ਕਿ ਜਦੋਂ ਆਰਐਨਏ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਕਾਰਵਾਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਤਾਂ ਬਲੌਕ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇਗਾ (ਪੜਾਅ 6 ਦੇਖੋ)।ਸੈੱਲ ਮਲਬੇ ਨੂੰ ਚੂਸਣ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਅਸੀਂ ਤੁਹਾਨੂੰ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਇਸ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਨੂੰ ਚੂਸਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ।
3. ਨਮੂਨਾ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਰਕਮ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ।
ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਬਫਰ PSL1 ਦੁਆਰਾ ਅਧੂਰੇ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਟੁਕੜੇ ਜਾਂ ਅਧੂਰੇ ਸੈੱਲ ਲਾਈਸਿਸ ਹੋਣਗੇ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਕਾਲਮ ਦੀ ਰੁਕਾਵਟ ਹੋਵੇਗੀ।ਪਲਾਂਟ ਕੁੱਲ RNA ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਹਰ ਇੱਕ ਸ਼ੁੱਧ ਓਪਰੇਟਿੰਗ ਨਮੂਨਾ 50 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਹੈ।ਪੌਲੀਓਲ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਤੁਸੀਂ ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕਰੋ।
4. ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਹੈ।
ਪੂਰੀ ਆਰਐਨਏ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25°C), ਸਿਵਾਏ ਕਿ ਨਮੂਨਾ ਟਿਸ਼ੂ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਦੁਆਰਾ ਤੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਕੁਝ ਕ੍ਰਾਇਓਜੇਨਿਕ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਜਾਂ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 20 ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।℃, ਜੋ ਕਿ DNA-ਸਫ਼ਾਈ ਕਾਲਮ ਅਤੇ/ਜਾਂ RNA-ਓਨਲੀ ਕਾਲਮ ਦੀ ਰੁਕਾਵਟ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਜੇਕਰ ਅਜਿਹਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 20-25 ਤੱਕ ਸੈੱਟ ਕਰੋ℃, ਅਤੇਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਲਸਿਸ ਮਿਸ਼ਰਣ ਅਤੇ/ਜਾਂ ਈਥਾਨੋਲ-ਜੋੜਿਆ ਹੋਇਆ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ 37 ਤੱਕ ਪਹਿਲਾਂ ਹੀ ਗਰਮ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ°C.
ਕੋਈ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਿਆ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਉਪਜ ਘੱਟ ਨਹੀਂ ਹੈ
ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਕਾਰਕ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਜੋ ਰਿਕਵਰੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ: ਨਮੂਨਾ ਆਰਐਨਏ ਸਮੱਗਰੀ, ਸੰਚਾਲਨ ਵਿਧੀ, ਇਲੂਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ, ਆਦਿ।
ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਆਮ ਕਾਰਨਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ:
1. ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਦੌਰਾਨ ਬਰਫ਼ ਦਾ ਇਸ਼ਨਾਨ ਜਾਂ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ (4°C) ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੁਝਾਅ: ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰੋ (15-25°C) ਪੂਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ, ਬਰਫ਼ ਦਾ ਇਸ਼ਨਾਨ ਅਤੇ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਨਾ ਕਰੋ।
2. ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਗਲਤ ਸੰਭਾਲ ਜਾਂ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸੰਭਾਲ ਕਰਕੇ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਘਟਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।
ਸਿਫਾਰਸ਼: ਤਾਜ਼ੇ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਫ੍ਰੀਜ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ -80 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣ ਅਤੇ ਪਿਘਲਣ ਤੋਂ ਬਚੋ;ਜਾਂ ਤੁਰੰਤ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ RNA ਸਟੈਬੀਲਾਈਜ਼ਰ RNAlater ਘੋਲ (ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ) ਵਿੱਚ ਭਿਓ ਦਿਓ।
3. ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਨਮੂਨਾ ਫ੍ਰੈਗਮੈਂਟੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਲਿਸਿਸ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਕਾਲਮ ਦੀ ਰੁਕਾਵਟ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਸੁਝਾਅ: ਟਿਸ਼ੂ ਨੂੰ ਪੀਸਣ ਵੇਲੇ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਟਿਸ਼ੂ ਕਾਫ਼ੀ ਜ਼ਮੀਨ ਵਿੱਚ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਤੁਰੰਤ ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਤਿਆਰ ਬਫਰ PSL1 ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ (ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰੋ ਕਿ β-ME ਦਾ ਸਹੀ ਅਨੁਪਾਤ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦਾ ਕਦਮ 1 ਦੇਖੋ)।
4. ਐਲੂਐਂਟ ਨੂੰ ਗਲਤ ਤਰੀਕੇ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੁਝਾਅ: ਇਹ ਸੁਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕਰੋ ਕਿ RNase-ਮੁਕਤ ddH2O ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਕਾਲਮ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਮੱਧ ਵਿੱਚ ਟਪਕਦਾ ਹੈ।
5. ਪੂਰਨ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਸਹੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਬਫਰ PSL2 ਜਾਂ ਬਫਰ PRW2 ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਸੁਝਾਅ: ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਹਿਦਾਇਤਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕਰੋ, ਬਫਰ PSL2 ਅਤੇ Buffer PRW2 ਵਿੱਚ ਪੂਰਨ ਈਥਾਨੌਲ ਦੀ ਸਹੀ ਮਾਤਰਾ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ ਅਤੇ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
6. ਟਿਸ਼ੂ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਅਣਉਚਿਤ ਹੈ।
ਸੁਝਾਅ: ਬਫਰ PSL1 ਦੇ 500 μl ਪ੍ਰਤੀ 50 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਟਿਸ਼ੂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਨਾਲ ਕੱਢੇ ਗਏ RNA ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਘੱਟ ਜਾਵੇਗੀ ਅਤੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ RNA ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵੀ ਘੱਟ ਜਾਵੇਗੀ।ਅਸੀਂ ਜ਼ੋਰਦਾਰ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਖੁਰਾਕ ਪ੍ਰਤੀ RNA ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਓਪਰੇਸ਼ਨ 50 ਮਿਲੀਗ੍ਰਾਮ ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਹੀਂ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ।
7. ਅਣਉਚਿਤ ਇਲੂਸ਼ਨ ਵਾਲੀਅਮ ਜਾਂ ਅਧੂਰਾ ਇਲੂਸ਼ਨ।
ਸੁਝਾਅ: ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਦੀ ਐਲੂਐਂਟ ਵਾਲੀਅਮ 50-200 μl ਹੈ;ਜੇਕਰ ਇਲੂਸ਼ਨ ਪ੍ਰਭਾਵ ਤਸੱਲੀਬਖਸ਼ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਤਾਂ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਪ੍ਰੀਹੀਟਡ RNase-ਫ੍ਰੀ ddH2O, ਜਿਵੇਂ ਕਿ 5-10 ਮਿੰਟ ਜੋੜਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਮਾਂ ਵਧਾਉਣ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
8. BufferPRW2 ਨਾਲ ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਈਥਾਨੋਲ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਸੁਝਾਅ: ਜੇਕਰ ਖਾਲੀ ਟਿਊਬ ਨੂੰ 1 ਮਿੰਟ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਬਫਰ PRW2 ਵਿੱਚ ਧੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਵੀ ਈਥਾਨੌਲ ਬਾਕੀ ਰਹਿੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਤੁਸੀਂ ਖਾਲੀ ਟਿਊਬ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸਮੇਂ ਨੂੰ 2 ਮਿੰਟ ਤੱਕ ਵਧਾ ਸਕਦੇ ਹੋ, ਜਾਂ ਬਾਕੀ ਬਚੇ ਈਥਾਨੋਲ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਾਲਮ ਨੂੰ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਰੱਖ ਸਕਦੇ ਹੋ।
9. ਕਿੱਟ ਦੀ ਗਲਤ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
ਸੁਝਾਅ: ਪੌਲੀਫੇਨੋਲਿਕ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼ ਦੇ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ, ਆਮ ਕਿੱਟਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪਲਾਂਟ ਕੁੱਲ RNA ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਆਦਰਸ਼ RNA ਨਮੂਨੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦੇ।ਅਸੀਂ ਤੁਹਾਨੂੰ ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ, ਜੋ ਕਿ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੌਲੀਫੇਨੋਲਿਕ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਪੌਦਿਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਇੱਕ ਕਿੱਟ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੋਲੀਫੇਨੋਲ ਅਤੇ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਪਲਾਂਟ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਲਈ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।
OD260/OD280 ਮੁੱਲ ਘੱਟ ਹੈ
ddH2O ਦੇ ਨਾਲ RNA ਇਲੂਸ਼ਨ ਅਤੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਰੀਡਿੰਗ ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਘੱਟ OD260/OD280 ਮੁੱਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਅਸੀਂ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਸਹੀ OD260/OD280 ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (RNase-ਮੁਕਤ ddH2O ਦੀ ਬਜਾਏ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ, ਪੰਨਾ 19 'ਤੇ "RNA ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਅਸੇਸ" ਦੇਖੋ।
ਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਡੀਗਰੇਡ ਹੁੰਦਾ ਹੈ
ਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸੰਭਾਲ, ਆਰਨੇਜ਼ ਗੰਦਗੀ, ਅਤੇ ਹੇਰਾਫੇਰੀ ਵਰਗੇ ਕਾਰਕਾਂ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੈ।
ਆਮ ਕਾਰਨਾਂ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ:
1. ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਇਕੱਤਰ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਨਹੀਂ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼: ਜੇਕਰ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਤਾਂ ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਤੁਰੰਤ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕਰੋ ਜਾਂ ਤਰਲ ਨਾਈਟ੍ਰੋਜਨ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ ਠੰਢ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ -80 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ, ਜਾਂ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਤੁਰੰਤ RNA ਸਟੈਬੀਲਾਈਜ਼ਰ RNAlater ਘੋਲ (ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ) ਵਿੱਚ ਡੁਬੋ ਦਿਓ।RNA ਕੱਢਣ ਲਈ, ਤਾਜ਼ੇ ਇਕੱਠੇ ਕੀਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਵਰਤਣ ਦੀ ਕੋਸ਼ਿਸ਼ ਕਰੋ।
2. ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣਾ ਅਤੇ ਪਿਘਲਾਉਣਾ।
ਸੁਝਾਅ: ਟਿਸ਼ੂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਸਟੋਰ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਸੰਭਾਲਣ ਲਈ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਵਿੱਚ ਕੱਟਣਾ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣ ਅਤੇ ਪਿਘਲਣ ਕਾਰਨ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਆਰਐਨਏ ਦੇ ਵਿਗੜਨ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਉਹਨਾਂ ਦਾ ਇੱਕ ਹਿੱਸਾ ਕੱਢ ਲੈਣਾ।
3.RNase ਨੂੰ ਓਪਰੇਸ਼ਨ ਰੂਮ ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜਾਂ ਡਿਸਪੋਜ਼ੇਬਲ ਦਸਤਾਨੇ, ਮਾਸਕ ਆਦਿ ਨਹੀਂ ਪਹਿਨੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।
ਸੁਝਾਅ: RNA ਕੱਢਣ ਦੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਵੱਖਰੇ RNA ਓਪਰੇਸ਼ਨਾਂ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵਧੀਆ ਢੰਗ ਨਾਲ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਟੇਬਲ ਨੂੰ ਪ੍ਰਯੋਗ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਸਾਫ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ RNase ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਦੇ ਕਾਰਨ RNA ਦੇ ਵਿਗੜਨ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੌਰਾਨ ਡਿਸਪੋਸੇਬਲ ਦਸਤਾਨੇ ਅਤੇ ਮਾਸਕ ਪਹਿਨੇ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।
4. ਰੀਐਜੈਂਟ ਵਰਤੋਂ ਦੌਰਾਨ RNase ਦੁਆਰਾ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਸੁਝਾਅ: ਸੰਬੰਧਿਤ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਲਈ ਪੌਦਿਆਂ ਦੀ ਕੁੱਲ RNA ਕੱਢਣ ਵਾਲੀਆਂ ਕਿੱਟਾਂ ਦੀ ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਲੜੀ ਨਾਲ ਬਦਲੋ।
5. RNA ਹੇਰਾਫੇਰੀ ਲਈ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਂਦੀਆਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬਾਂ ਅਤੇ ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪਸ RNase ਨਾਲ ਦੂਸ਼ਿਤ ਹਨ।
ਸੁਝਾਅ: ਇਹ ਸੁਨਿਸ਼ਚਿਤ ਕਰੋ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਕੱਢਣ ਵਿੱਚ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਣ ਵਾਲੀਆਂ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬਾਂ, ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪਸ, ਪਾਈਪੇਟਸ, ਆਦਿ ਸਭ RNase-ਮੁਕਤ ਹਨ।
ਨਿਰਦੇਸ਼ ਮੈਨੂਅਲ:
ਪਲਾਂਟ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਪਲੱਸ ਨਿਰਦੇਸ਼ ਮੈਨੂਅਲ
