ਸੰਸਥਾ ਵਿਧੀ ਸੰਕਲਪ ਨੂੰ ਜਾਰੀ ਰੱਖਦੀ ਹੈ “ਵਿਗਿਆਨਕ ਪ੍ਰਬੰਧਨ, ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਪ੍ਰਮੁੱਖਤਾ, ਚੀਨ ਨਿਰਮਾਤਾ ਲਈ ਖਰੀਦਦਾਰ ਸਰਵਉੱਚ 2× ਅਸ਼ੁੱਧ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਕੇਂਦਰਿਤ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ ਲਈ ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਕੁਆਂਟੀਟੇਟਿਵ ਪੀਸੀਆਰ ਡਾਇਰੈਕਟ ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ ਪੜਤਾਲ Qpcr ਮਿਕਸ ਪਲੱਸ ਯੂ, ਸਾਡਾ ਕਾਰੋਬਾਰ ਗਾਹਕਾਂ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅਤੇ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੀਆਂ ਸੇਵਾਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਹਰੇਕ ਗਾਹਕ ਨੂੰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਸਮਰਪਿਤ ਹੈ।
ਸੰਸਥਾ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਸੰਕਲਪ 'ਤੇ ਕਾਇਮ ਹੈ "ਵਿਗਿਆਨਕ ਪ੍ਰਬੰਧਨ, ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਪ੍ਰਮੁੱਖਤਾ, ਖਰੀਦਦਾਰ ਲਈ ਸਰਵਉੱਚਚਾਈਨਾ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਅਤੇ Qpcr, ਸਾਡੀ ਕੰਪਨੀ ਕੋਲ ਭਰਪੂਰ ਤਾਕਤ ਹੈ ਅਤੇ ਇੱਕ ਸਥਿਰ ਅਤੇ ਸੰਪੂਰਣ ਵਿਕਰੀ ਨੈੱਟਵਰਕ ਸਿਸਟਮ ਹੈ।ਅਸੀਂ ਚਾਹੁੰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਅਸੀਂ ਆਪਸੀ ਲਾਭਾਂ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਦੇਸ਼ ਅਤੇ ਵਿਦੇਸ਼ ਦੇ ਸਾਰੇ ਗਾਹਕਾਂ ਨਾਲ ਚੰਗੇ ਵਪਾਰਕ ਸਬੰਧ ਸਥਾਪਿਤ ਕਰ ਸਕੀਏ।
ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਸਿਧਾਂਤ

ਫਾਰਵਰਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਰਿਵਰਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ

ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਲਈ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਬਹੁਤ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ।ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹਨ, ਅਤੇ ਇਹਨਾਂ ਨੂੰ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਸਿਧਾਂਤਾਂ ਦੇ ਸੰਦਰਭ ਵਿੱਚ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ:

• ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਲੰਬਾਈ: 18-30bp.
• GC ਸਮੱਗਰੀ: 40-60%.
• Tm ਮੁੱਲ: ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਸੌਫਟਵੇਅਰ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪ੍ਰਾਈਮਰ 5, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦਾ Tm ਮੁੱਲ ਦੇ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਅੱਪਸਟਰੀਮ ਅਤੇ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ Tm ਮੁੱਲ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਨੇੜੇ ਹੋਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।Tm ਗਣਨਾ ਫਾਰਮੂਲਾ ਵੀ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ: Tm = 4 °C (G + C) + 2 ° C (A + T)।ਪੀਸੀਆਰ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, 5 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਦੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਟੀਐਮ ਮੁੱਲ ਤੋਂ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਵਜੋਂ ਚੁਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ (ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਵਿੱਚ ਅਨੁਸਾਰੀ ਵਾਧਾ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਨੂੰ ਵਧਾ ਸਕਦਾ ਹੈ)।
• ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ:

1. ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਤਰਜੀਹੀ ਤੌਰ 'ਤੇ 100-150bp ਹੈ।
2. ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੇ ਸੈਕੰਡਰੀ ਢਾਂਚਾਗਤ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਬਚਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
3. ਅੱਪਸਟਰੀਮ ਅਤੇ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ 3′ ਸਿਰਿਆਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ 2 ਜਾਂ ਵਧੇਰੇ ਪੂਰਕ ਅਧਾਰਾਂ ਦੇ ਗਠਨ ਤੋਂ ਬਚੋ।
4. ਪ੍ਰਾਈਮਰ 3′ ਟਰਮੀਨਲ ਬੇਸ 3 ਵਾਧੂ ਲਗਾਤਾਰ G ਜਾਂ C ਦੇ ਨਾਲ ਮੌਜੂਦ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।
5. ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਵਿੱਚ ਆਪਣੇ ਆਪ ਵਿੱਚ ਪੂਰਕ ਬਣਤਰ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇੱਕ ਹੇਅਰਪਿਨ ਬਣਤਰ ਦਾ ਗਠਨ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇਗਾ, ਜੋ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰੇਗਾ।
6. ATCG ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਕ੍ਰਮ ਵਿੱਚ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਬਰਾਬਰ ਵੰਡਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ 3′ ਟਰਮੀਨਲ ਬੇਸ ਨੂੰ T ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਬਚਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।

ਅੰਤਿਕਾ1: ਸੀell ਡਾਇਰੈਕਟRT-qPCR ਕਿੱਟ ਭਾਗਟੀ ਪੂਰਕ ਪੈਕ

1. ਸੈੱਲ ਲਾਈਸਿਸ ਹੱਲ

 ਸੰਸਥਾ ਵਿਧੀ ਸੰਕਲਪ ਨੂੰ ਜਾਰੀ ਰੱਖਦੀ ਹੈ “ਵਿਗਿਆਨਕ ਪ੍ਰਬੰਧਨ, ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਪ੍ਰਮੁੱਖਤਾ, ਚੀਨ ਨਿਰਮਾਤਾ ਲਈ ਖਰੀਦਦਾਰ ਸਰਵਉੱਚ 2× ਅਸ਼ੁੱਧ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਕੇਂਦਰਿਤ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ ਲਈ ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਕੁਆਂਟੀਟੇਟਿਵ ਪੀਸੀਆਰ ਡਾਇਰੈਕਟ ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ ਪੜਤਾਲ Qpcr ਮਿਕਸ ਪਲੱਸ ਯੂ, ਸਾਡਾ ਕਾਰੋਬਾਰ ਗਾਹਕਾਂ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅਤੇ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੀਆਂ ਸੇਵਾਵਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਹਰੇਕ ਗਾਹਕ ਨੂੰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਸਮਰਪਿਤ ਹੈ।
ਲਈ ਚੀਨ ਨਿਰਮਾਤਾਚਾਈਨਾ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਅਤੇ Qpcr, ਸਾਡੀ ਕੰਪਨੀ ਕੋਲ ਭਰਪੂਰ ਤਾਕਤ ਹੈ ਅਤੇ ਇੱਕ ਸਥਿਰ ਅਤੇ ਸੰਪੂਰਣ ਵਿਕਰੀ ਨੈੱਟਵਰਕ ਸਿਸਟਮ ਹੈ।ਅਸੀਂ ਚਾਹੁੰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਅਸੀਂ ਆਪਸੀ ਲਾਭਾਂ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਦੇਸ਼ ਅਤੇ ਵਿਦੇਸ਼ ਦੇ ਸਾਰੇ ਗਾਹਕਾਂ ਨਾਲ ਚੰਗੇ ਵਪਾਰਕ ਸਬੰਧ ਸਥਾਪਿਤ ਕਰ ਸਕੀਏ।

ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਸਿਧਾਂਤ

ਫਾਰਵਰਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਰਿਵਰਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ

ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਲਈ, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਬਹੁਤ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਹੈ।ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹਨ, ਅਤੇ ਇਹਨਾਂ ਨੂੰ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਸਿਧਾਂਤਾਂ ਦੇ ਸੰਦਰਭ ਵਿੱਚ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ:

• ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੀ ਲੰਬਾਈ: 18-30bp.
• GC ਸਮੱਗਰੀ: 40-60%.
• Tm ਮੁੱਲ: ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਸੌਫਟਵੇਅਰ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪ੍ਰਾਈਮਰ 5, ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦਾ Tm ਮੁੱਲ ਦੇ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਅੱਪਸਟਰੀਮ ਅਤੇ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ Tm ਮੁੱਲ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਨੇੜੇ ਹੋਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ।Tm ਗਣਨਾ ਫਾਰਮੂਲਾ ਵੀ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ: Tm = 4 °C (G + C) + 2 ° C (A + T)।ਪੀਸੀਆਰ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, 5 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਦੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਟੀਐਮ ਮੁੱਲ ਤੋਂ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਵਜੋਂ ਚੁਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ (ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਵਿੱਚ ਅਨੁਸਾਰੀ ਵਾਧਾ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਨੂੰ ਵਧਾ ਸਕਦਾ ਹੈ)।
• ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦ:

1. ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਤਰਜੀਹੀ ਤੌਰ 'ਤੇ 100-150bp ਹੈ।
2. ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੇ ਸੈਕੰਡਰੀ ਢਾਂਚਾਗਤ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਨੂੰ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਬਚਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
3. ਅੱਪਸਟਰੀਮ ਅਤੇ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ 3′ ਸਿਰਿਆਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ 2 ਜਾਂ ਵਧੇਰੇ ਪੂਰਕ ਅਧਾਰਾਂ ਦੇ ਗਠਨ ਤੋਂ ਬਚੋ।
4. ਪ੍ਰਾਈਮਰ 3′ ਟਰਮੀਨਲ ਬੇਸ 3 ਵਾਧੂ ਲਗਾਤਾਰ G ਜਾਂ C ਦੇ ਨਾਲ ਮੌਜੂਦ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।
5. ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਵਿੱਚ ਆਪਣੇ ਆਪ ਵਿੱਚ ਪੂਰਕ ਬਣਤਰ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਨਹੀਂ ਤਾਂ ਇੱਕ ਹੇਅਰਪਿਨ ਬਣਤਰ ਦਾ ਗਠਨ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇਗਾ, ਜੋ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਤ ਕਰੇਗਾ।
6. ATCG ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਕ੍ਰਮ ਵਿੱਚ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਬਰਾਬਰ ਵੰਡਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ 3′ ਟਰਮੀਨਲ ਬੇਸ ਨੂੰ T ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਬਚਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।

ਅੰਤਿਕਾ1: ਸੀell ਡਾਇਰੈਕਟRT-qPCR ਕਿੱਟ ਭਾਗਟੀ ਪੂਰਕ ਪੈਕ

1. ਸੈੱਲ ਲਾਈਸਿਸ ਹੱਲ

ਨਿਰਦੇਸ਼ ਮੈਨੂਅਲ:

 ਤੇਜ਼ ਆਸਾਨ ਸੈੱਲ ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCR ਕਿੱਟ-ਟੈਕਮੈਨ