ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCR ਕਿੱਟ II
ਕਿੱਟ ਦਾ ਵੇਰਵਾ:
◮ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCR ਕਿੱਟ, ਫੋਰਜੀਨ ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਫੋਰਜੀਨ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ ਅਤੇ ਫੋਰਜੀਨ ਐਚਐਸ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਵਿਲੱਖਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਬਫਰ ਦੇ ਨਾਲ, ਇਸ ਕਿੱਟ ਨੂੰ ਮਜ਼ਬੂਤ ਰੋਧ ਅਤੇ ਅਨੁਕੂਲਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਫੋਰਜੀਨ ਲਾਈਸਿਸ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਸਿੱਧੀ ਜਾਂਚ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਹ ਕਿੱਟ COVID-19 ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਖੋਜ ਕਿੱਟ ਅਤੇ ਹੋਰ ਜਰਾਸੀਮ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਖੋਜ ਕਿੱਟ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਲਈ ਅਰਜ਼ੀ ਦੇ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਵਰਣਨ
ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCR ਕਿੱਟ ਵੱਖਰੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੈਕ ਕੀਤੇ RT-qPCR ਬਫਰ, ਉੱਚ ਕੁਸ਼ਲ ਐਚਐਸ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਅਤੇ ਫੋਰਸੀ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ (MMLV),ਸਧਾਰਨ ਤਸਦੀਕ ਦੇ ਅੰਦਰ, ਬੈਕ-ਐਂਡ ਕਿੱਟਾਂ ਅਤੇ ਸਿਸਟਮ ਵਿਵਸਥਾ ਨੂੰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਇਸਨੂੰ ਸੁਵਿਧਾਜਨਕ ਬਣਾਉਣਾ।
ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCR ਕਿੱਟ, ਫੋਰਜੀਨ ਦੁਆਰਾ ਵਿਕਸਤ ਫੋਰਜੀਨ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ ਅਤੇ ਫੋਰਜੀਨ ਐਚਐਸ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਵਿਲੱਖਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਬਫਰ ਦੇ ਨਾਲ, ਇਸ ਕਿੱਟ ਨੂੰ ਮਜ਼ਬੂਤ ਰੋਧ ਅਤੇ ਅਨੁਕੂਲਤਾ ਦੇ ਨਾਲ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਫੋਰਜੀਨ ਲਾਈਸਿਸ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਸਿੱਧੀ ਜਾਂਚ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਹ ਕਿੱਟ COVID-19 ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਖੋਜ ਕਿੱਟ ਅਤੇ ਹੋਰ ਜਰਾਸੀਮ ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਖੋਜ ਕਿੱਟ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਲਈ ਅਰਜ਼ੀ ਦੇ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਇਹ ਕਿੱਟ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ IVD ਉਤਪਾਦ ਦਾ ਹਿੱਸਾ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਤੇਜ਼ ਵਰਤ ਕੇ।ਇਸਨੂੰ ਦੁਬਾਰਾ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ, ਸਿਰਫ਼ ਆਸਾਨ ਪੁਸ਼ਟੀਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ।
ਨਿਰਧਾਰਨ
500T, 50,000T
ਕਿੱਟ ਦੇ ਹਿੱਸੇ
| ਕਿੱਟ ਸਮੱਗਰੀ (20 μL ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 ਟੀ | 50,000 ਟੀ | |
| ਫੋਰੈਸੀ ਆਰਈਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ (200 ਯੂ/μL) | 50 μL×1 | 1 ਮਿ.ਲੀ×5 |
| Foreasy HS Taq DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ (5 ਯੂ/μL) | 100 μL×1 | 1 ਮਿ.ਲੀ×10 |
| 2× ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCRਬਫਰ | 1 ਮਿ.ਲੀ. × 5 | 500 ਮਿ.ਲੀ. × 1 |
| ਹਦਾਇਤ | 1 | 1 |
ਓਪਰੇਟਿੰਗ ਕਦਮ
A: ਟੈਂਪਲੇਟ ਅਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟ ਦੀ ਤਿਆਰੀ
1. ਤਿਆਰ ਆਰਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਤਿਆਰ ਕਰੋ (ਆਰਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨੂੰ ਕੱਢਣ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨ ਲਈ ਫੋਰਜੀਨ ਟੋਟਲ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਲੇਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਸੀਰੀਜ਼ ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ) ਜਾਂ ਨਮੂਨਾ ਕ੍ਰੈਕਿੰਗ ਉਤਪਾਦ (ਫੋਰਜੀਨ ਲਾਈਸਿਸ ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ), ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ (10 μM) ਅਤੇ ਹੋਰ ਸੰਬੰਧਿਤ ਉਪਭੋਗ ਸਮੱਗਰੀ, ਸਾਧਨ।
2. 2× ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCR ਬਫਰ, RNase-ਮੁਕਤ ddH2O ਅਤੇ 20× ROX ਰੈਫਰੈਂਸ ਡਾਈ (ਜੇਕਰ ਲੋੜ ਹੋਵੇ) ਨੂੰ ਬਰਫ਼ ਵਾਲੇ ਬਕਸੇ ਵਿੱਚ ਪਾਓ, ਇਹਨਾਂ ਨੂੰ ਕੁਦਰਤੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਿਘਲਾ ਕੇ, ਅਤੇ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਮਿਕਸ ਕਰੋ।
ਬੀ: RT-qPCR ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਤਿਆਰੀ
ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਬਫਰ ਦੀ ਅੱਧੀ ਮਾਤਰਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰੋ (ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, ਜੇਕਰ ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਮਾਤਰਾ 20 μL ਹੈ, ਤਾਂ ਇਸਨੂੰ 10 μL 2× ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCR ਬਫਰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ।). ਲਈਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਅਨੁਸਾਰੀ ਮਾਤਰਾ, ਅਸੀਂ ਇਹ ਸੁਝਾਅ ਦਿੰਦੇ ਹਾਂM-MLV: 10-30 U/20 μL ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ,ਤਾਕਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼：1-2 U/20 μL ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀਇਹ ਸਾਡਾ ਸੁਝਾਅ ਹੈ, ਤੁਹਾਨੂੰ ਇਸ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਨੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਵਿਵਸਥਿਤ ਕਰਨੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ), RNA ਟੈਂਪਲੇਟ, ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਪੜਤਾਲਾਂ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਅਤੇ RNase-ਮੁਕਤ ddH ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ2ਓ ਤੋਂ 20 μL.RT-qPCR ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਖਾਸ ਤਿਆਰੀ ਨੂੰ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੀ ਸਾਰਣੀ 1 ਦਾ ਹਵਾਲਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਸਾਰਣੀ 1 : RT-qPCR ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਤਿਆਰੀ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟ | ਵਾਲੀਅਮ | ਅੰਤਮ ਇਕਾਗਰਤਾ |
| 2× ਡਾਇਰੈਕਟ RT-qPCR ਬਫਰ | 10 μL | 1× |
| ਫੋਰਸੀ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟਸ (MMLV) | 10-30 ਯੂ | |
| Foreasy HS Taq DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ | 1-2 ਯੂ | |
| ਫਾਰਵਰਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ਉਲਟਾ ਪ੍ਰਾਈਮਰ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ਪੜਤਾਲ(4 μM) | 1 μL | 200nM |
| ਟੈਂਪਲੇਟ(RNA ਜਾਂ Lysate) | X μL | |
| 20× ROX ਰੈਫਰੈਂਸ ਡਾਈ | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| ਕੁੱਲ ਵੌਲਯੂਮ | 20 μL |
ਨੋਟ: ਫਾਰਵਰਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਰਿਵਰਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਟਾਰਗੇਟ ਜੀਨ ਦੇ ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਹਨ।qPCR ਦੀ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਨੂੰ ਵਿਹਾਰਕ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਅਤੇ PCR ਮਾਡਲਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਐਡਜਸਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਅਸੀਂ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਅੰਤਮ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਲਈ 400nM ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ।ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ, ਤਿਆਰ ਕੀਤੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਅੰਤਮ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਖਾਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਅਤੇ ਪੜਤਾਲਾਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨੂੰ ਵਿਵਸਥਿਤ ਕਰੋ।
1*: ਵੱਖ-ਵੱਖ ਮਾਤਰਾਤਮਕ PCR ਯੰਤਰਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ROX ਰੈਫਰੈਂਸ ਡਾਈ ਦੀ ਢੁਕਵੀਂ ਅੰਤਮ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਚੁਣੋ।ਆਮ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਯੰਤਰਾਂ ਦੀ ਸਰਵੋਤਮ ROX ਸੰਦਰਭ ਡਾਈ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੀ ਸਾਰਣੀ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ:
| ਮਾਤਰਾਤਮਕ PCR ਯੰਤਰ | ROX ਸੰਦਰਭ ਡਾਈ ਦੀ ਅੰਤਮ ਇਕਾਗਰਤਾ |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/ਪਹਿਲਾ ਪਹਿਲਾ,ਆਦਿ | 1× (ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, 20 μL ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ 1μl 20×ROX ਸੰਦਰਭ ਡਾਈ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P ਅਤੇ Mx4000, ਆਦਿ। | 0.5× (ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, 20 μL ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ 0.5μl 20×ROX ਸੰਦਰਭ ਡਾਈ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ) |
| Roche PCR ਯੰਤਰ, Bio-Rad PCR ਯੰਤਰ, Eppendorf quantitative PCR ਯੰਤਰ, ਆਦਿ। | ROX ਸੰਦਰਭ ਡਾਈ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ |
ਸਟੋਰੇਜ ਅਤੇ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ
ਕਿੱਟ ਨੂੰ -20 ± 5℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਇਸਨੂੰ ਤੁਰੰਤ -20 ℃ ਥਰਮੋਸਟੈਟਿਕ ਫਰਿੱਜ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।ਵੈਧਤਾ ਦੀ ਮਿਆਦ 2 ਸਾਲ ਹੈ ਜੇਕਰ ਇਸਨੂੰ ਢੁਕਵੀਂ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
