ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਲਈ ਫਸਟ-ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਲਈ RT Easyᵀᴹ II ਮਾਸਟਰ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ
ਕਿੱਟ ਵਰਣਨ
ਫੋਰਜੀਨ ਦਾ 2× RT ਜਾਂ- ਆਸਾਨTMਮਿਸ਼ਰਣ 50 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਪਹਿਲੇ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਦੇ ਸੀਡੀਐਨਏ ਦਾ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਸੈਕੰਡਰੀ ਬਣਤਰ ਆਰਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਦੇ ਉਲਟ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਈ ਅਨੁਕੂਲ ਹੈ।
ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤੇ ਗਏ ਆਰਐਨਏ ਵਿੱਚ ਅਕਸਰ ਅਲਕੋਹਲ ਅਤੇ ਗੁਆਨੀਡੀਨ ਲੂਣ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਸ 'ਤੇ ਮਜ਼ਬੂਤ ਨਿਰੋਧਕ ਗੁਣ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਅਸੰਤੁਸ਼ਟ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਭਾਵ ਜਾਂ ਘੱਟ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।ਫੋਰਜੀਨ 2 × RT ਮਿਕਸ ਅਲਕੋਹਲ ਅਤੇ ਗੁਆਨੀਡੀਨ ਲੂਣ ਪ੍ਰਤੀ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ।RNA ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਅਲਕੋਹਲ ਪ੍ਰਤੀ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ 60% ਹੈ, ਅਤੇ ਗੁਆਨੀਡੀਨ ਲੂਣ ਲਈ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਹਿਣਸ਼ੀਲਤਾ 750mM ਹੈ।ਇੱਥੋਂ ਤੱਕ ਕਿ ਅਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਫੋਰਜੀਨ 2×ਆਰਟੀ ਜਾਂ-ਈਜ਼ੀ ਨਾਲ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈTMਮਿਕਸ.
2× RT ਜਾਂ- ਆਸਾਨਟੀ.ਐਮਮਿਕਸ ਇੱਕ ਤੇਜ਼ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਰੀਐਜੈਂਟ ਹੈ ਜੋ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਲਈ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਇਸ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸ ਨੂੰ ਕਿਸੇ ਵੀ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ RNA ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਦੀ ਇੱਕ ਛੋਟੀ ਜਿਹੀ ਮਾਤਰਾ 'ਤੇ ਚੰਗੀ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਵਿਲੱਖਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ RT ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਆਸਾਨ, ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਵਧੇਰੇ ਕੁਸ਼ਲ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਪਹਿਲਾ ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ 20 ਮਿੰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਪੂਰਾ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਫੋਰਜੀਨ ਦੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਉਤਪਾਦ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਈਜ਼ੀ ਨਾਲ ਜੋੜ ਕੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈTMਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ.
ਨਿਰਧਾਰਨ
RT ਆਸਾਨTMII ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਲਈ ਪਹਿਲੀ-ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਮਾਸਟਰ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ | |||
ਕਿੱਟ ਦੇ ਹਿੱਸੇ | ਆਰਟੀ-01021 | ਆਰਟੀ-01022 | ਆਰਟੀ-01023 |
50 ਟੀ (10μl ਸਿਸਟਮ) | 200 T(10μl ਸਿਸਟਮ) | 800 T (10μl ਸਿਸਟਮ) | |
2× RT ਜਾਂ- ਆਸਾਨTMਮਿਕਸ | 0.25 ਮਿ.ਲੀ | 1 ਮਿ.ਲੀ | 1ml × 4 |
RNase-ਮੁਕਤ ddH2O | 1.7 ਮਿ.ਲੀ | 1.7 ਮਿ.ਲੀ | 1.7ml × 3 |
ਹਦਾਇਤ ਮੈਨੂਅਲ | 1 ਟੁਕੜਾ | 1 ਟੁਕੜਾ | 1 ਟੁਕੜਾ |
ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਅਤੇ ਫਾਇਦੇ
- ਕੁਸ਼ਲ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ, ਪਹਿਲੇ ਸਟ੍ਰੈਂਡ cDNA ਦੇ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਿਰਫ 20 ਮਿੰਟ ਲੱਗਦੇ ਹਨ।
- ਉੱਚ-ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ, ਪੀਜੀ-ਪੱਧਰ ਦੇ ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਵੀ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਸੀਡੀਐਨਏ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ।
- ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਥਰਮਲ ਸਥਿਰਤਾ ਹੈ, ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ 50 ℃ ਤੱਕ ਉੱਚਾ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਦਾ ਵਧੀਆ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਹੈ।
- ਇੱਥੋਂ ਤੱਕ ਕਿ ਅਸ਼ੁੱਧ ਆਰਐਨਏ ਨਮੂਨੇ (60% ਤੱਕ ਅਲਕੋਹਲ, 750mM ਤੱਕ ਗੁਆਨੀਡੀਨ ਲੂਣ) ਉਲਟੇ ਪ੍ਰਤੀਲਿਪੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਅਧੀਨ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ।
- 2× RT ਜਾਂ- ਆਸਾਨTMਮਿਕਸ ਨੇ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰ (ਰੈਂਡਮ ਪ੍ਰਾਈਮਰ, ਓਲੀਗੋ(ਡੀਟੀ) ਨੂੰ ਜੋੜਿਆ ਹੈ18ਪ੍ਰਾਈਮਰ)।
ਕਿੱਟ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ
- ਜੀਨ ਸਮੀਕਰਨ ਦਾ ਗਿਣਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਲਈ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਵਿੱਚ ਸਿੱਧਾ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ
- ਇਹ ਆਰਐਨਏ ਦੀਆਂ ਛੋਟੀਆਂ ਮਾਤਰਾਵਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਵਾਇਰਸਾਂ ਦਾ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਸਹੀ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ
- ਉੱਚ GC ਸਮੱਗਰੀ ਜਾਂ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਸੈਕੰਡਰੀ ਢਾਂਚੇ ਦੇ ਨਾਲ RNA ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਦਾ ਉਲਟਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ
ਕੰਮ ਦਾ ਪ੍ਰਵਾਹ
ਸਟੋਰੇਜ ਅਤੇ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ
1. ਆਵਾਜਾਈ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ
ਘੱਟ-ਤਾਪਮਾਨ ਵਾਲੇ ਆਈਸ ਬਾਕਸ ਦੀ ਆਵਾਜਾਈ ਦੀ ਪੂਰੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ, ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਕਿ ਕਿੱਟ <4°C ਦੀ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ ਹੈ।
2. ਸਟੋਰੇਜ਼ ਹਾਲਾਤ
RT ਆਸਾਨTMII ਨੂੰ -20 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਰਸੀਦ ਤੋਂ ਤੁਰੰਤ ਬਾਅਦ ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ -20 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਦੇ ਸਥਿਰ ਤਾਪਮਾਨ ਵਾਲੇ ਫਰਿੱਜ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕਰੋ।ਜੇਕਰ ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਉਚਿਤ ਹਨ, ਤਾਂ ਉਤਪਾਦ 1-ਸਾਲ ਦੀ ਵੈਧਤਾ ਅਵਧੀ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਕਿਸੇ ਵੀ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਨੂੰ ਨਹੀਂ ਘਟਾਏਗਾ।